分子克隆技術是在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到複製與擴增,然後再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。
基本介紹
- 中文名:分子克隆技術
- 所屬學科:生物化學
分子克隆技術是在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到複製與擴增,然後再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。
分子克隆技術是在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到複製與擴增,然後再從篩選的寄主細胞內分離提...
在生物學中其名詞含義系指一個細胞或個體以無性繁殖的方式產生一群細胞或一群個體,在不發生突變的情況下,具有完全相同的遺傳性狀,常稱無性繁殖(細胞)系;其動詞(clone,cloned,cloning)含義指在生物體外用重組技術將特定基因插入載體分子中,即分子克隆技術。研究基因的第一步是分離它並獲得許多與它完全相同的...
《分子克隆實驗指南(第四版)》是2017年3月科學出版社有限責任公司出版的圖書,作者是J.薩姆布魯克、M.R.格林,譯者為賀福初。內容簡介 分子克隆技術30多年來一直是全球生命科學領域實驗室專業技術的基礎。冷泉港實驗室出版社出版的《分子克隆實驗指南》一書擁有的可靠性和權威性,適用於對所有分子生物學技術實驗有...
由於克隆技術是無性生殖所以它並不是根據基因重組、基因突變、染色體變異等原理而發明的技術。雖然克隆很神奇,但是它誘人的地方也就是它最危險的地方。簡單地說,克隆的定義就是:不經過兩性細胞結合而直接繁衍後代,就叫無性繁殖,也稱克隆。定義(二)克隆,是指通過無性生殖而產生的遺傳上均一的生物群,即具有...
分子克隆操作指南 《分子克隆操作指南》是現代曼尼阿蒂斯等編著的工具書。內容簡介 該書49.2萬字,系統介紹了分子克隆技術和方法,簡述了分子克隆的基本原理、操作方法和步驟,並附有注意事項等。書後附錄《生化技術》、《PBR322》、《常用細菌菌株》、《廠商地址和產品簡介》。
《分子克隆實驗指南 | 2版》是1992年科學出版社出版的 圖書,作者是J.薩姆布魯克。圖書簡介 全書共分18章,介紹了分子克隆技術的基本原理與具體操作程式。其中重要的有:有關DNA測序、聚合酶鏈式反應、克隆化基因在哺乳動物細胞中的表達及表達物的檢測與分析等章節。書後還加印了注射器針頭轉換表、專有名詞詳解、...
二是經一系列不同的化學和物理方法處理,以求得差異分辨,或按指令合成不同的高分子物質。如胺基酸序列分析和序列合成、核苷酸序列分析和序列合成等。三是有目的地對 DNA進行剪下拼接,引入細胞中的(或分子克隆技術)和等。為使這些生物化學技術實現高效自動化、靈敏精確重複性好、特異性高,人們設計了一系列有微機...
對已經獲得的目的DNA片段進行重新克隆,其目的在於對目的DNA進行進一步分析,或者進行重組改造等。亞克隆的基本過程包括:(1)目的DNA片段和載體的製備;(2)目的DNA片段和載體的連線;(3)連線產物的轉化;(4)重組子篩選。亞克隆技術:限制性內切酶是一類能識別雙鏈DNA分子中特異核苷酸序列的DNA水解酶,該類酶是體外...
《分子克隆實驗指南 第三版(上、下冊)》具有先進性、實用性、權威性的特點,是生命科學實驗室內當之無愧的“聖經”。《分子克隆實驗指南 第三版(上、下冊)》可供生物學、醫藥衛生,以及農、林、牧等方面有關的科研、教學與技術人員參考。目錄 中譯本序 譯者的話 第三版前言 上冊 第1章 質粒及其在分子克隆...
蛋白質轉運 6.5 蛋白質翻譯後修飾 6.6 蛋白質降解 6.7 翻譯水平調控 第7章 現代分子生物學技術 7.1 分子克隆技術 7.2 分子雜交和印跡技術 7.3 聚合酶鏈式反應 7.4 核酸測序分析技術 7.5 基因文庫 7.6 生物晶片技術 7.7 生物大分子相互作用研究技術 7.8 遺傳修飾動物模型的建立及套用 參考文獻 ...
重組DNA技術的基本定義 重組DNA技術是指將一種生物體(供體)的基因與載體在體外進行拼接重組,然後轉入另一種生物體(受體)內,使之按照人們的意願穩定遺傳並表達出新產物或新性狀的DNA體外操作程式,也稱為分子克隆技術。因此,供體、受體、載體是重組DNA技術的三大基本元件。基因工程的基本定義 狹義上僅指基因工程...
為了在細胞世代中保持其穩定性,染色體起碼應具備3個結構要素,那就是有一個DNA複製起點;一個著絲粒(centromere)使細胞分裂時兩個姊妹染色單體能平均分配到子細胞里;最後,在染色體的兩個末端必須有端粒(teloxnere),使DNA能完成複製。近年來人們採用分子克隆技術把真核細胞染色體的複製起點、著絲粒和端粒的DNA片段...
這些DNA探針的獲得有賴於分子克隆技術的發展和套用。以細菌為例,分子雜交技術用於細菌的分類和菌種鑑定比之G+C百分比值要準確的多,是細菌分類學的一個發展方向。加之分子雜交技術的高敏感性,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。細菌的基因組大小約5×106bp,約含3000個基因。各種細菌之間絕大部分DNA是相同...
基因重組狂犬疫苗 基因重組狂犬疫苗,一種新型的狂犬疫苗。利用分子克隆技術,將編碼病毒抗原的基因經加工處理後整合到適當的載體中,然後在原核或真核細胞中進行表達,再經加工製成疫苗。可工業化生產口服無毒活疫苗,對狂犬病毒的控制具有重大的實際意義。
丙型病毒性肝炎(簡稱C型肝炎)早在20世紀70年代即已確認為是一種腸道外傳播的非甲非B型肝炎(post-transfusion hepatitis non A non B,PT-NANBH)。1989年,Choo等經由分子克隆技術首先發現C型肝炎病毒(HCV),1991年,HCV被歸入黃病毒科C型肝炎病毒屬。HCV感染屬全球性的嚴重問題,C型肝炎呈全球性分布,...
基因型疫苗指的是DNA疫苗,即將編碼外源性抗原的基因插入到含真核表達系統的質粒上,然後將質粒直接導入人或動物體內,讓其在宿主細胞中表達抗原蛋白,誘導機體產生免疫應答。凡具有抗原性接種於機體可產生特異的自動免疫力,可抵禦感染病的發生或流行,總稱為疫苗 基因工程疫苗:是用基因工程方法或分子克隆技術,分離出...
但由於當時基因序列分析方法尚未成熟,熱穩定DNA聚合酶尚未報導以及引物合成的困難,這種想法似乎沒有實際意義。加上分子克隆技術的出現提供了一種克隆和擴增基因的途徑,所以Khorana的構想被人們遺忘了。1983年4月的一個星期五晚上,他開車去鄉下別墅的路上,猛然閃現出“多聚酶鏈式反應”的想法。1983年12月,Mullis用...
(1)特異正常基因的分離與克隆:套用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果,已有不少基因並將會有更多人類基因被分離和克隆,這是基因治療的前提,在當代分子生物技術條件下,一般來說,只要有基因探針和準確的基因定位,任何基因都可被克隆。除此,如今既可人工合成DNA探針,還可用DNA合成儀在體外人工合成基因,...
聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR),即PCR 反應技術,是由美國Cetus 公司人類遺傳研究室的科學家Mullis於1983 年發明的一種能在生物體細胞外通過酶促合成反應快速擴增兩段已知序列之間的DNA序列的方法,又稱無細胞分子克隆技術。PCR 技術已被廣泛套用於分子生物學、工業、農業、食品科學醫藥學和法醫學等...
研究方向:3農業微生物生物技術 研究結果 採用分子克隆技術和PCR技術研究大豆和花生根瘤菌的系統發育及其起源和進化關係,為超慢生大豆根瘤菌新種的正式發表提供了依據;對慢生根瘤菌系統發育研究中得出,23S rRNA比16S rRNA基因更為有效的系統發育標誌基因;使用rep-PCR技術研究國內外的花生根瘤菌,得出了中國花生根瘤...