凝血酶原酶，是一種直接激活凝血酶原的凝血因子。在病毒引起的肝損傷、自發性流產及移植排斥反應等病理過程中發揮重要的作用。
基本介紹
- 中文名：凝血酶原酶
- 套用：建立(SARS)模型探討與SARS肺損傷
- 作用：病毒引起肝損傷發揮重要的作用
- 產生：血液凝固後僅餘少量
介紹,研究,作用,套用,
介紹
正常情況下血液凝固後僅餘少量凝血酶原，當被測血液中因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅶ或PF3顯著缺乏所致內源性凝血酶原激酶生成障礙時，血液凝固後血清中則會有較多的凝血酶原，測定血清凝血酶原時間則會顯著縮短。因而PcT是檢查內源性凝血因子和PF3有無缺陷的篩選試驗。
研究
研究鑑定激活hfgl2凝血酶原酶基因的SARS冠狀病毒結構蛋白。從SARS屍檢肺組織中抽提RNA後製備cDNA，分別擴增SARS．CoV的N、s2和M全長基因序列，再分別克隆到真核表達載體pcDNA3.1（+）上。套用免疫組織化學分析鑑定peDNA3.1-N、pcDNA3.1-M和pcDNA3.1-S2的表達。構建人纖維介素（hfgt2）啟動子螢光素酶報告基因質粒，並將SARS冠狀病毒結構蛋白表達質粒分別與其共轉染以明確激活hfgl2基因轉錄的SARS冠狀病毒結構蛋白。將目的片段克隆至pcDNA3.1（+），經酶切鑑定和測序鑑定無誤：免疫組織化學染色可見明顯的CHO細胞胞漿棕染。與hfgl2啟動子共轉染實驗闡明SARS冠狀病毒膜（M）蛋白和刺突糖（S2）蛋白對hfgl2基因的激活與對照組無顯著差異，而SARS冠狀病毒核心（N）蛋白可激活hfgl2啟動子，使其轉染活性提高4.6倍。SAILS冠狀病毒N蛋白可增強hfgl2基因的轉錄活性。
作用
fgl2凝血酶原酶是一種直接激活凝血酶原的凝血因子。反式因子通過與小鼠fgl2凝血酶原酶基因啟動子中正性調控結構域結合而對其表達進行調控,人fgl2凝血酶原酶基因的表達調控可能之相似。作為一種免疫-凝血的中介物,fgl2凝血酶原酶在病毒引起的肝損傷、自發性流產及移植排斥反應等病理過程中發揮重要的作用。
套用
利用鼠肝炎3型病毒(MHV-3)建立小鼠嚴重急性呼吸綜合徵(SARS)模型,探討小鼠fgl2凝血酶原酶基因(mfgl2)與SARS肺損傷,尤其是透明膜和血栓形成之間的關係及其臨床意義。方法:Balb/cJ小鼠氣管途徑感染MHV-3建立小鼠SARS模型,動態觀察小鼠一般情況、組織器官的病理學改變及病毒分布情況;免疫組化和原位雜交方法檢測其肺組織中mfgl2和纖維蛋白的表達。結果:感染小鼠5d內死於以肺損傷為主的多器官功能衰竭;肺呈現典型間質性肺炎樣改變伴透明膜、血栓形成;所有收集的器官均可檢測到病毒的複製;肺支氣管漿液腺上皮細胞、間質浸潤細胞及肺泡上皮細胞可檢測到mfgl2的特異性表達;免疫組化雙染色發現肺內透明膜及微血栓形成區域多見mfgl2與纖維蛋白的共沉積。結論:MHV-3誘導的小鼠SARS模型能較好地模擬人類SARS肺損傷的疾病特徵,mfgl2在模型肺組織中的特異性高表達可激活凝血酶原,啟動局部凝血過程,導致纖維蛋白的沉積,促進肺內血栓和透明膜的形成,提示mfgl2可能是SARS肺損傷又一重要分子機制。
