《凝血因子活性測定總則(WS/T 220-2002)》於2002年9月第一版、第一次印刷。本標準參考美國國家臨床檢驗標準委員會（NCCLS）H48-A檔案所推薦的凝血因子活性測定標準，由衛生部醫政司提出。並由中華人民共和國衛生部會於2002年4月發布，並於2002年7月實施。
基本介紹
- 書名：凝血因子活性測定總則
- 作者：中華人民共和國衛生部
- 出版日期：2002年9月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066214553
- 外文名：Determination of Coagulant Factor Activities-General Guideline
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：9頁
- 開本：16
- 品牌：北京勁松建達科技圖書有限公司
內容簡介,文摘,
內容簡介
《凝血因子活性測定總則(WS/T 220-2002)》由中國標準出版社出版。
文摘
著作權頁：
插圖：
7.3乏因子血漿：在乏因子血漿中，單獨某個凝血因子活性應低於0.01單位/mL（1%）；但其他凝血因子活性應高於0.5單位/mL（50%）；纖維蛋白原含量應高於1.0 g/L，乏因子血漿若從嚴重遺傳性因子缺乏病人中獲取，其血漿中不能含有凝血因子的抑制物及狼瘡抗凝物。同時，必須貯存在-70℃冰櫃或凍乾保存。
7.4參考血漿：參考血漿應是至少20個以上健康男女各半的混合血漿，年齡18～55歲，未服用任何藥物（女性須非妊娠，非月經期），凝血因子活性應保持在（1±0.2）u/mL，同時應採用世界衛生組織（WHO）的原級或次級標準進行校正。
氯化鈣溶液濃度：25 mmol/L。
8測定方法
8.1內源性途徑的凝血因子活性測定：因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ、PK、HMW活性測定用APTT測定。
APTT測定條件
APTT操作溫度：試驗應在37℃±1℃進行操作。
試驗進行前血漿標本的預溫時間不得長於10 min，按照廠家敘述的該廠專門的APTT試劑製備及處置的方法進行操作。
接觸激活時間：指血漿和APTT試劑一起孵育的時間，嚴格標準化接觸激活時間，是非常重要的。因接觸激活時間是根據所用的儀器特別是試劑而不同的，必須按照廠家的說明嚴格執行。在手工方法使用秒表或同樣準確的計時裝置。
APTT試驗步驟：APTT是二期試驗。第一期將一份APTT試劑及一份檸檬酸鈉血漿混合，同時開動一計時裝置，準確計時，在推薦的激活時間終點開始第二期：即加入預溫的氯化鈣，同時開動另一計時器，記下形成凝塊所需的時間。
APTT終點：纖維凝塊形成即為APTT終點，終點可用手工法、半自動或全自動法以多種光學或機電方法進行測定，APTT通常進行雙份測定，並以其均值報告測定結果。由於半自動及全自動方法測定精密度的改善，如能達到質量標準的要求，亦可測定一份直接報告。
8.2外源性途徑的凝血因子測定：因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ採用PT測定。測得的凝固時間可以通過查對已知凝血因子活性的參考曲線或代入回歸方程，得其凝血因子活性。
PT測定條件
測定溫度36.5℃～38.5℃，上述各試劑及被測血漿，均應預溫至此一溫度。但凝血活酶試劑預溫不可超過30 min；測定血漿預溫一般不宜超過10 min。
所用試管及加樣器等接觸血漿的器具均應為塑膠製品或矽化玻璃管。
吸取檸檬酸鈉患者抗凝血漿一份，乏因子血漿一份，加入一小試管中，加入凝血活酶試劑一份，混勻後置37℃水浴中。再加入氯化鈣溶液一份（也可先將凝血活酶試劑與氯化鈣溶液等量混合後加入0.2 mL）。立即混勻並開動秒表。試管仍浸於水浴中，至約10 s時，自水浴中取出，迅速在紗布上擦去試管外水滴，在明亮處不斷傾斜試管（至90°），在流動狀態下觀察有無纖維蛋白形成。一旦見到纖維蛋白（同時將出現液體流動減慢），立即停表，記錄時間。每次測定二管，求平均數。
本試驗的最後混合液的pH應為7.2～7.3；大部分商品凝血活酶試劑均用含緩衝劑的溶液配製。
每批均應同時做正常和異常對照，方法應與測定標本完全相同。
8.3凝血因子的自動化測定
凝血因子分析可以採用全自動血凝儀，儀器採用統計程式製備參考與受檢血漿曲線、計算受檢血漿凝血因子濃度和分析曲線線性的可接受性。一些程式可以通過修正曲線，測定落在參考曲線線性限制以外的受檢稀釋血漿。這些程式應該得到有關部門的批准。製造商應確保試驗系統的準確與精密性達到可接受的程度，同時，他們的程式能測出許多抑制物的存在。
插圖：
7.3乏因子血漿：在乏因子血漿中，單獨某個凝血因子活性應低於0.01單位/mL（1%）；但其他凝血因子活性應高於0.5單位/mL（50%）；纖維蛋白原含量應高於1.0 g/L，乏因子血漿若從嚴重遺傳性因子缺乏病人中獲取，其血漿中不能含有凝血因子的抑制物及狼瘡抗凝物。同時，必須貯存在-70℃冰櫃或凍乾保存。
7.4參考血漿：參考血漿應是至少20個以上健康男女各半的混合血漿，年齡18～55歲，未服用任何藥物（女性須非妊娠，非月經期），凝血因子活性應保持在（1±0.2）u/mL，同時應採用世界衛生組織（WHO）的原級或次級標準進行校正。
氯化鈣溶液濃度：25 mmol/L。
8測定方法
8.1內源性途徑的凝血因子活性測定：因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ、PK、HMW活性測定用APTT測定。
APTT測定條件
APTT操作溫度：試驗應在37℃±1℃進行操作。
試驗進行前血漿標本的預溫時間不得長於10 min，按照廠家敘述的該廠專門的APTT試劑製備及處置的方法進行操作。
接觸激活時間：指血漿和APTT試劑一起孵育的時間，嚴格標準化接觸激活時間，是非常重要的。因接觸激活時間是根據所用的儀器特別是試劑而不同的，必須按照廠家的說明嚴格執行。在手工方法使用秒表或同樣準確的計時裝置。
APTT試驗步驟：APTT是二期試驗。第一期將一份APTT試劑及一份檸檬酸鈉血漿混合，同時開動一計時裝置，準確計時，在推薦的激活時間終點開始第二期：即加入預溫的氯化鈣，同時開動另一計時器，記下形成凝塊所需的時間。
APTT終點：纖維凝塊形成即為APTT終點，終點可用手工法、半自動或全自動法以多種光學或機電方法進行測定，APTT通常進行雙份測定，並以其均值報告測定結果。由於半自動及全自動方法測定精密度的改善，如能達到質量標準的要求，亦可測定一份直接報告。
8.2外源性途徑的凝血因子測定：因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ採用PT測定。測得的凝固時間可以通過查對已知凝血因子活性的參考曲線或代入回歸方程，得其凝血因子活性。
PT測定條件
測定溫度36.5℃～38.5℃，上述各試劑及被測血漿，均應預溫至此一溫度。但凝血活酶試劑預溫不可超過30 min；測定血漿預溫一般不宜超過10 min。
所用試管及加樣器等接觸血漿的器具均應為塑膠製品或矽化玻璃管。
吸取檸檬酸鈉患者抗凝血漿一份，乏因子血漿一份，加入一小試管中，加入凝血活酶試劑一份，混勻後置37℃水浴中。再加入氯化鈣溶液一份（也可先將凝血活酶試劑與氯化鈣溶液等量混合後加入0.2 mL）。立即混勻並開動秒表。試管仍浸於水浴中，至約10 s時，自水浴中取出，迅速在紗布上擦去試管外水滴，在明亮處不斷傾斜試管（至90°），在流動狀態下觀察有無纖維蛋白形成。一旦見到纖維蛋白（同時將出現液體流動減慢），立即停表，記錄時間。每次測定二管，求平均數。
本試驗的最後混合液的pH應為7.2～7.3；大部分商品凝血活酶試劑均用含緩衝劑的溶液配製。
每批均應同時做正常和異常對照，方法應與測定標本完全相同。
8.3凝血因子的自動化測定
凝血因子分析可以採用全自動血凝儀，儀器採用統計程式製備參考與受檢血漿曲線、計算受檢血漿凝血因子濃度和分析曲線線性的可接受性。一些程式可以通過修正曲線，測定落在參考曲線線性限制以外的受檢稀釋血漿。這些程式應該得到有關部門的批准。製造商應確保試驗系統的準確與精密性達到可接受的程度，同時，他們的程式能測出許多抑制物的存在。
