冷泉港蛋白質組學實驗手冊

內容簡介

《冷泉港蛋白質組學實驗手冊》為美國冷泉港實驗室蛋白質組學課程培訓用書，為蛋白質組學工作者案頭必備實驗手冊。內容涉及各種蛋白質製備和分離方法、質譜分析的一般方法、用於蛋白質表達的編碼序列的高通量克隆、蛋白質晶片的製備和使用以及驗證這些數據的分析方法等內容。書中附有大量的以step-by-step形式展現的操作程式，針對關鍵性步驟增加說明性文字加以點撥，並有信息框闡述關鍵的知識點，具有很強的實用性和可操作性。

目錄信息

1實驗1全細胞裂解物的雙向凝膠電泳和MALDI 質譜分析11

操作程式11酵母細胞裂解液的製備15

操作程式12IPG膠條的再水化和等電聚焦16

操作程式13等電聚焦膠條的平衡20

操作程式14第二向——SDSPAGE21

操作程式15用SYPRO Ruby進行全蛋白染色23

操作程式16用ProQ Diamond進行磷酸化蛋白染色24

操作程式17用ProQ Emerald進行糖蛋白染色24

操作程式18用考馬斯亮藍進行全蛋白染色25

操作程式19用質譜兼容的銀染進行全蛋白染色26

操作程式1102D膠的圖像分析和蛋白質回收26

操作程式111膠內酶切28

操作程式112MALDI點靶29實驗2用於質譜分析的蛋白質複合物的純化32

操作程式21培養並收集TAP標記的酵母細胞33

操作程式22為純化TAP標記蛋白質複合物製備酵母細胞抽提物35

操作程式23第一步親和富集——利用IgG親和色譜從酵母抽提物中捕獲TAP標記的蛋白質複合物37

操作程式24第二步親和富集——TAP標記的蛋白質複合物的鈣調蛋白親和色譜40

操作程式25與磁珠的結合42

操作程式26蛋白質複合物的親和純化45實驗3用MALDI TOF/TOF串聯質譜進行肽的定性和定量分析49

操作程式31實驗描述50實驗4蛋白質複合物分析——高靈敏液相色譜與串聯質譜聯用60

操作程式41HPLC柱毛細管的製作61

操作程式42填裝微毛細管FSC柱64

操作程式43微毛細管RPHPLC與ESI質譜聯用67實驗5用IMAC和質譜分析磷酸化肽72

操作程式51製備IMAC樣品73

操作程式52製備IMAC柱和反相捕獲柱（前柱）75

操作程式53製備IMAC柱76

操作程式54樣品處理77實驗6全細胞裂解物的多維蛋白質鑑定技術分析81

操作程式61使用多維蛋白質鑑定技術分析全細胞裂解物83實驗7全細胞提取物的定量質譜檢測技術(iTRAQ)88

操作程式71從酵母細胞製備肽91

操作程式72以iTRAQ試劑標記肽93

操作程式73套用反向色譜柱提純肽94

冷泉港蛋白質組學實驗手冊

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