《兩類多DNA病毒對寄主免疫細胞差異作用的機理研究》是依託浙江大學，由時敏擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：兩類多DNA病毒對寄主免疫細胞差異作用的機理研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：時敏
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
以攜帶不同類型PDV的兩種內寄生蜂（菜蛾盤絨繭蜂和半閉彎尾姬蜂）寄生同一寄主（小菜蛾）的體系為研究切入點，系統比較菜蛾盤絨繭蜂多DNA病毒（CvBV）和半閉彎尾姬蜂多DNA病毒（DsIV）在競爭條件下對寄主小菜蛾體內免疫細胞的侵染和轉錄的差異，並比較同一個PDV（CvBV或DsIV）在適應和非適應寄主體內免疫細胞上轉錄、表達和胞外存活的差異，尋找與寄生蜂成功寄生和抑制寄主免疫細胞功能密切相關的PDV基因並明確這些基因的實際生物功能，爭取在揭示PDV作用方式的某些機制方面取得一定的突破。本項研究不僅可為最終揭示寄生蜂利用PDV調控寄主的分子機理提供基礎資料，深化對天敵昆蟲如何成功控制寄主和種間競爭取勝的理解，而且可為獲得具有提高寄生蜂控制能力和種間競爭能力的特定基因和相關生物分子提供了前所未有的機遇，為其他寄生蜂控害作用和寄主範圍的研究提供借鑑經驗。
結題摘要
本項目首先補充、完善了兩種不同類型PDV（菜蛾盤絨繭蜂PDV（CvBV）和半閉彎尾姬蜂PDV（DsIV））的全基因組數據，最終兩者基因組分別由35和47個閉合雙鏈DNA環組成，預測分別編碼157個和109個ORF。由此通過定量PCR的方法檢測了CvBV和DsIV不同基因組片段在適應性和非適應性寄主血細胞內的侵染程度，發現CvBV或DsIV對同一寄主血細胞、基因組內不同片段之間的侵染程度都具有顯著差異，其中CvBV侵染程度最高和最低的分別是片段C12和C34，而DsIV侵染程度最高和最低的分別是片段C28和C13；但是CvBV或DsIV基因組內同一片段對於來源於適應性寄主或非適應性寄主血細胞的侵染程度卻相類似，表現為對非適應性寄主的侵染程度略低於適應性寄主的。通過對構建、篩選和分析CvBV或DsIV在不同適應程度寄主血細胞內的表達文庫，發現CvBV在適應性和非適應性寄主血細胞內基因的表達差異表現在2個Ankyrin、7個PTP、2個EP和7新基因上，而DsIV表現在1個Ankyrin、8個Repeat Element、4個Cyst-rich、5個Innexin和2個新基因上。由此，通過獲得基因序列全長，以及原核表達、製備抗體、基因定位、RNAi干擾等功能性研究，解析了部分功能，揭示了兩類PDV抑制寄主血細胞免疫作用的作用途徑，初步明確不同類型PDV調控寄主免疫的機制。
