《內生菌研究方法》是2019年化學工業出版社出版的圖書，作者是駱焱平、王蘭英。
基本介紹
- 書名：內生菌研究方法
- 作者：駱焱平，王蘭英
- ISBN：9787122346100
- 類別：圖書>農業/林業>農業基礎科學
- 定價：¥98.00
- 出版社：化學工業出版社
- 出版時間：2019年11月
- 裝幀：平裝
- 開本：16開
編輯推薦,內容簡介,作者簡介,目錄,
編輯推薦
1.我國首部系統介紹內生菌研究方法的學術專著。
2.本書內容豐富，內容囊括了內生菌研究的前期準備，內生菌的分離、鑑定、發酵、定殖，內生菌的活性評價、促生作用，內生菌的次生代謝產物，內生菌的套用及內生菌的保藏等。
2.本書內容豐富，內容囊括了內生菌研究的前期準備，內生菌的分離、鑑定、發酵、定殖，內生菌的活性評價、促生作用，內生菌的次生代謝產物，內生菌的套用及內生菌的保藏等。
內容簡介
本書首次系統地撰寫了內生菌研究方法，包括內生菌研究的前期準備，內生菌的分離、鑑定、發酵、定殖，內生菌的活性評價、促生作用，內生菌的次生代謝產物，內生菌的套用及內生菌的保藏等。
本書可供開展內生菌研究的研究生、研究者及相關專業的讀者參考使用。
本書可供開展內生菌研究的研究生、研究者及相關專業的讀者參考使用。
作者簡介
駱焱平，海南大學環境與植物保護學院，教授，博導，海南省“515人才工程”第二層次人選；2010年全國百優博士論文提名者。1997年6月畢業於湖北師範學院化學系，獲理學學士學位；2000年6月畢業於華中師範大學農藥研究所，獲理學碩士學位（農藥學專業）；2007年6月畢業於華中師範大學農藥與化學生物學教育部重點實驗室，獲理學博士學位（農藥學專業）。在農藥學、有機化學和化合物結構分析與鑑定方面具有紮實的基礎知識。
在教學上，刻苦鑽研教學方法，耐心細緻進行教學活動。承擔包括《化學製藥工程》、《農藥化學》、《農藥劑型與加工》在內的10 余門本科和研究生課程。
在科研上，主要從事新農藥仿生與精細有機合成，生物農藥、農藥劑型加工的研究工作。主持或參加了國家自然科學基金、科技支撐計畫、省基金等多個項目，迄今為止在《J. Agric. Food Chem.》、《Bioorganic & Medicinal Chem.》等國內外學術刊物上發表論文50 余篇，其中SCI 收錄論文18 篇；申請中國發明專利4項（授權2項），國際PCT 專利1項，美國專利3項。主編教材和教學參考書3 部，其中《農藥專業英語》為高等學校規劃教材，《農產品質量與安全專業英語》為十二五國家規劃教材。
在教學上，刻苦鑽研教學方法，耐心細緻進行教學活動。承擔包括《化學製藥工程》、《農藥化學》、《農藥劑型與加工》在內的10 余門本科和研究生課程。
在科研上，主要從事新農藥仿生與精細有機合成，生物農藥、農藥劑型加工的研究工作。主持或參加了國家自然科學基金、科技支撐計畫、省基金等多個項目，迄今為止在《J. Agric. Food Chem.》、《Bioorganic & Medicinal Chem.》等國內外學術刊物上發表論文50 余篇，其中SCI 收錄論文18 篇；申請中國發明專利4項（授權2項），國際PCT 專利1項，美國專利3項。主編教材和教學參考書3 部，其中《農藥專業英語》為高等學校規劃教材，《農產品質量與安全專業英語》為十二五國家規劃教材。
目錄
第一章內生菌的概述/1
第一節內生菌的定義與種類1
一、內生菌的定義1
二、內生菌的種類2
第二節內生菌的活性與套用4
一、內生菌的活性5
二、內生菌的套用8
參考文獻9
第二章內生菌研究方法的前期準備/14
第一節顯微鏡基礎知識及使用14
一、普通光學顯微鏡14
二、相差顯微鏡16
三、螢光顯微鏡16
四、掃描電子顯微鏡20
五、透射電子顯微鏡21
六、原子力顯微鏡22
第二節常規器具和設備23
一、常用器皿23
二、接種工具24
三、常規儀器設備24
第三節常規器具的洗滌25
一、洗滌劑26
二、器皿的洗滌26
三、載玻片和蓋玻片的洗滌26
第四節器皿的包紮和棉塞的製作27
一、移液管的包紮27
二、培養皿的包紮27
三、錐形瓶的包紮27
四、棉塞的製作28
第五節常規滅菌方法28
一、加熱滅菌法28
二、過濾除菌法30
三、輻射滅菌法30
四、化學滅菌法31
第六節常規接種方法31
一、劃線接種法31
二、穿刺接種法32
三、點接種法32
第七節培養基及其配製32
一、培養基的成分32
二、培養基的種類33
三、培養基及其配製34
參考文獻36
第三章內生菌的分離/38
第一節樣品的收集與處理38
第二節樣品的表面消毒39
第三節內生菌分離培養基的選擇41
一、內生真菌分離培養基的選擇41
二、內生細菌分離培養基的選擇42
三、內生放線菌分離培養基的選擇43
第四節內生菌的分離方法44
一、植物樣品的分離方法44
二、海洋生物樣品的分離方法45
三、昆蟲等其他生物樣品的分離方法46
第五節內生菌的分離實例46
實例一三叉苦內生真菌的分離46
實例二砂仁內生細菌的分離47
實例三變葉木、陰香內生放線菌的分離47
實例四珊瑚內生菌的分離48
實例五白蟻成蟲內生菌的分離48
參考文獻48
第四章內生菌的鑑定/51
第一節內生細菌的鑑定51
一、細菌的特徵及分類依據51
二、細菌鑑定的一般程式51
三、內生細菌鑑定方法52
四、細菌常用分類系統簡介及檢索80
第二節內生放線菌的鑑定87
一、放線菌的分類研究87
二、內生放線菌鑑定方法91
三、內生鏈黴菌種群特徵99
四、放線菌分類系統99
第三節內生真菌的鑑定103
一、真菌的特徵及分類依據103
二、內生真菌的鑑定104
參考文獻113
第五章內生菌的培養與發酵/116
第一節內生菌的培養116
一、固體培養法116
二、液體培養法118
第二節連續培養技術119
第三節同步培養技術120
一、選擇法120
二、誘導法121
第四節高密度培養技術122
一、固定化培養122
二、補料分批培養123
三、膜過濾培養技術123
第五節固體發酵技術124
第六節內生菌的發酵實例125
實例一三椏苦內生真菌SCK-Y9同步生長技術125
實例二變葉木內生細菌BYG2-5膜過濾培養125
實例三鏈黴菌HN6固體發酵技術125
參考文獻127
第六章內生菌的定殖研究/128
第一節內生菌的侵染與定殖128
一、植物內生菌的侵染方式128
二、植物內生菌的定殖129
第二節內生菌的定殖檢測129
一、抗生素標記法130
二、免疫學方法131
三、基因標記法143
四、特異性寡核苷酸片段標記法146
五、基因晶片法146
六、螢光定量PCR檢測法147
第三節內生菌的定殖研究實例147
參考文獻149
第七章內生菌的活性評價方法/151
第一節內生菌殺蟲活性評價方法151
一、觸殺作用評價方法151
二、胃毒作用評價方法152
三、蟎類的評價方法154
四、酶活評價方法155
第二節內生菌抑菌活性評價方法166
一、內生菌離體活性評價方法166
二、內生菌組織活性評價方法171
三、內生菌盆栽活性評價方法174
第三節內生菌抗氧化活性評價方法176
一、TLC法檢測自由基清除活性176
二、高價鐵離子還原作用176
三、DPPH自由基清除作用176
四、ABTS自由基清除作用177
五、超氧陰離子清除作用177
六、羥基自由基清除作用177
七、過氧化氫清除作用178
八、實例蜂巢珊瑚內生真菌的抗氧化活性研究178
第四節內生菌誘導靶標菌細胞凋亡評價方法181
一、對細胞內氧化應激的評價181
二、對線粒體膜電位的評價182
三、對靶標菌菌體內抗氧化酶系的評價182
四、對細胞內還原型谷胱甘肽含量的評價185
五、對小靶標菌細胞凋亡的誘導186
參考文獻187
第八章內生菌的促生作用/190
第一節直接促生作用190
一、生長素190
二、固氮作用192
三、解磷作用192
四、解鉀作用193
五、分泌鐵載體193
第二節間接促生作用194
一、拮抗作用194
二、誘導系統抗性194
第三節促生作用檢測198
一、形態指標檢測198
二、生理指標檢測199
第四節互作效應202
第五節內生菌促生作用研究實例203
實例一鏈黴菌HN6對香蕉的促生作用研究203
實例二放線菌HN20對黃瓜、生菜的促生作用研究205
實例三放線菌WZS1-1與WZS2-1菌株的促生作用測定208
參考文獻211
第九章內生菌代謝產物的研究/213
第一節內生菌代謝產物的分離213
一、小分子代謝產物的提取分離213
二、蛋白質的提取分離220
三、多糖的提取分離223
第二節內生菌代謝產物的鑑定225
一、定性鑑定225
二、紅外光譜分析法227
三、核磁共振波譜法228
四、質譜分析法231
五、圓二色光譜分析法232
第三節真菌Xylaria feejeenisis的代謝產物研究232
參考文獻236
第十章內生菌的套用研究/237
第一節內生菌可濕性粉劑的研製237
一、HN6可濕性粉劑的製備方法237
二、可濕性粉劑的製備方法最佳化239
三、HN6可濕性粉劑對香蕉枯萎病的盆栽防治效果240
四、HN6可濕性粉劑對香蕉枯萎病的田間防治效果241
第二節內生菌可溶性液劑的研製242
第三節內生菌微生物肥料的研製243
一、內生菌液體肥料的研製244
實例一枯草芽孢桿菌HBS-1和白刺鏈黴菌NLG-3的液體肥料244
實例二HN20的液體肥料244
實例三黃色鏈黴菌BYM-2的液體肥料244
實例四蜜糖草固氮螺菌SRJ2-4的液體肥料245
二、內生菌固體肥料的研製245
實例一含螢光假單胞桿菌YXG2-3的複合固體肥料245
實例二含芽孢桿菌HBS-1的複合固體肥料246
實例三含岸濱芽孢桿菌BYG2-5的複合固體肥料246
第四節內生菌保鮮劑的研製247
一、香蕉防腐保鮮劑的套用247
二、芒果防腐保鮮劑的套用248
第五節內生菌菌劑的檢測249
參考文獻252
第十一章內生菌菌種的保藏/253
第一節菌種保藏的基本原理253
第二節菌種保藏的基本方法253
一、斜面傳代保藏法253
二、礦物油保藏法254
三、麩皮保藏法254
四、沙土管保藏法255
五、土壤培養保藏法256
六、蒸餾水保藏法256
七、甘油懸液保藏法256
八、冷凍乾燥保藏法257
九、液氮超低溫保藏法257
十、素瓷珠保藏法258
十一、瓊脂穿刺保藏法258
十二、固定化保藏法258
十三、宿主保藏法259
第三節菌種保藏的注意事項259
參考文獻260
附錄262
附錄一培養基及配方262
附錄二常用酸鹼指示劑的配製270
附錄三常用消毒劑的配製271
第一節內生菌的定義與種類1
一、內生菌的定義1
二、內生菌的種類2
第二節內生菌的活性與套用4
一、內生菌的活性5
二、內生菌的套用8
參考文獻9
第二章內生菌研究方法的前期準備/14
第一節顯微鏡基礎知識及使用14
一、普通光學顯微鏡14
二、相差顯微鏡16
三、螢光顯微鏡16
四、掃描電子顯微鏡20
五、透射電子顯微鏡21
六、原子力顯微鏡22
第二節常規器具和設備23
一、常用器皿23
二、接種工具24
三、常規儀器設備24
第三節常規器具的洗滌25
一、洗滌劑26
二、器皿的洗滌26
三、載玻片和蓋玻片的洗滌26
第四節器皿的包紮和棉塞的製作27
一、移液管的包紮27
二、培養皿的包紮27
三、錐形瓶的包紮27
四、棉塞的製作28
第五節常規滅菌方法28
一、加熱滅菌法28
二、過濾除菌法30
三、輻射滅菌法30
四、化學滅菌法31
第六節常規接種方法31
一、劃線接種法31
二、穿刺接種法32
三、點接種法32
第七節培養基及其配製32
一、培養基的成分32
二、培養基的種類33
三、培養基及其配製34
參考文獻36
第三章內生菌的分離/38
第一節樣品的收集與處理38
第二節樣品的表面消毒39
第三節內生菌分離培養基的選擇41
一、內生真菌分離培養基的選擇41
二、內生細菌分離培養基的選擇42
三、內生放線菌分離培養基的選擇43
第四節內生菌的分離方法44
一、植物樣品的分離方法44
二、海洋生物樣品的分離方法45
三、昆蟲等其他生物樣品的分離方法46
第五節內生菌的分離實例46
實例一三叉苦內生真菌的分離46
實例二砂仁內生細菌的分離47
實例三變葉木、陰香內生放線菌的分離47
實例四珊瑚內生菌的分離48
實例五白蟻成蟲內生菌的分離48
參考文獻48
第四章內生菌的鑑定/51
第一節內生細菌的鑑定51
一、細菌的特徵及分類依據51
二、細菌鑑定的一般程式51
三、內生細菌鑑定方法52
四、細菌常用分類系統簡介及檢索80
第二節內生放線菌的鑑定87
一、放線菌的分類研究87
二、內生放線菌鑑定方法91
三、內生鏈黴菌種群特徵99
四、放線菌分類系統99
第三節內生真菌的鑑定103
一、真菌的特徵及分類依據103
二、內生真菌的鑑定104
參考文獻113
第五章內生菌的培養與發酵/116
第一節內生菌的培養116
一、固體培養法116
二、液體培養法118
第二節連續培養技術119
第三節同步培養技術120
一、選擇法120
二、誘導法121
第四節高密度培養技術122
一、固定化培養122
二、補料分批培養123
三、膜過濾培養技術123
第五節固體發酵技術124
第六節內生菌的發酵實例125
實例一三椏苦內生真菌SCK-Y9同步生長技術125
實例二變葉木內生細菌BYG2-5膜過濾培養125
實例三鏈黴菌HN6固體發酵技術125
參考文獻127
第六章內生菌的定殖研究/128
第一節內生菌的侵染與定殖128
一、植物內生菌的侵染方式128
二、植物內生菌的定殖129
第二節內生菌的定殖檢測129
一、抗生素標記法130
二、免疫學方法131
三、基因標記法143
四、特異性寡核苷酸片段標記法146
五、基因晶片法146
六、螢光定量PCR檢測法147
第三節內生菌的定殖研究實例147
參考文獻149
第七章內生菌的活性評價方法/151
第一節內生菌殺蟲活性評價方法151
一、觸殺作用評價方法151
二、胃毒作用評價方法152
三、蟎類的評價方法154
四、酶活評價方法155
第二節內生菌抑菌活性評價方法166
一、內生菌離體活性評價方法166
二、內生菌組織活性評價方法171
三、內生菌盆栽活性評價方法174
第三節內生菌抗氧化活性評價方法176
一、TLC法檢測自由基清除活性176
二、高價鐵離子還原作用176
三、DPPH自由基清除作用176
四、ABTS自由基清除作用177
五、超氧陰離子清除作用177
六、羥基自由基清除作用177
七、過氧化氫清除作用178
八、實例蜂巢珊瑚內生真菌的抗氧化活性研究178
第四節內生菌誘導靶標菌細胞凋亡評價方法181
一、對細胞內氧化應激的評價181
二、對線粒體膜電位的評價182
三、對靶標菌菌體內抗氧化酶系的評價182
四、對細胞內還原型谷胱甘肽含量的評價185
五、對小靶標菌細胞凋亡的誘導186
參考文獻187
第八章內生菌的促生作用/190
第一節直接促生作用190
一、生長素190
二、固氮作用192
三、解磷作用192
四、解鉀作用193
五、分泌鐵載體193
第二節間接促生作用194
一、拮抗作用194
二、誘導系統抗性194
第三節促生作用檢測198
一、形態指標檢測198
二、生理指標檢測199
第四節互作效應202
第五節內生菌促生作用研究實例203
實例一鏈黴菌HN6對香蕉的促生作用研究203
實例二放線菌HN20對黃瓜、生菜的促生作用研究205
實例三放線菌WZS1-1與WZS2-1菌株的促生作用測定208
參考文獻211
第九章內生菌代謝產物的研究/213
第一節內生菌代謝產物的分離213
一、小分子代謝產物的提取分離213
二、蛋白質的提取分離220
三、多糖的提取分離223
第二節內生菌代謝產物的鑑定225
一、定性鑑定225
二、紅外光譜分析法227
三、核磁共振波譜法228
四、質譜分析法231
五、圓二色光譜分析法232
第三節真菌Xylaria feejeenisis的代謝產物研究232
參考文獻236
第十章內生菌的套用研究/237
第一節內生菌可濕性粉劑的研製237
一、HN6可濕性粉劑的製備方法237
二、可濕性粉劑的製備方法最佳化239
三、HN6可濕性粉劑對香蕉枯萎病的盆栽防治效果240
四、HN6可濕性粉劑對香蕉枯萎病的田間防治效果241
第二節內生菌可溶性液劑的研製242
第三節內生菌微生物肥料的研製243
一、內生菌液體肥料的研製244
實例一枯草芽孢桿菌HBS-1和白刺鏈黴菌NLG-3的液體肥料244
實例二HN20的液體肥料244
實例三黃色鏈黴菌BYM-2的液體肥料244
實例四蜜糖草固氮螺菌SRJ2-4的液體肥料245
二、內生菌固體肥料的研製245
實例一含螢光假單胞桿菌YXG2-3的複合固體肥料245
實例二含芽孢桿菌HBS-1的複合固體肥料246
實例三含岸濱芽孢桿菌BYG2-5的複合固體肥料246
第四節內生菌保鮮劑的研製247
一、香蕉防腐保鮮劑的套用247
二、芒果防腐保鮮劑的套用248
第五節內生菌菌劑的檢測249
參考文獻252
第十一章內生菌菌種的保藏/253
第一節菌種保藏的基本原理253
第二節菌種保藏的基本方法253
一、斜面傳代保藏法253
二、礦物油保藏法254
三、麩皮保藏法254
四、沙土管保藏法255
五、土壤培養保藏法256
六、蒸餾水保藏法256
七、甘油懸液保藏法256
八、冷凍乾燥保藏法257
九、液氮超低溫保藏法257
十、素瓷珠保藏法258
十一、瓊脂穿刺保藏法258
十二、固定化保藏法258
十三、宿主保藏法259
第三節菌種保藏的注意事項259
參考文獻260
附錄262
附錄一培養基及配方262
附錄二常用酸鹼指示劑的配製270
附錄三常用消毒劑的配製271
