候選抑癌基因Ovol2調控鼻咽癌幹細胞乾性及EMT的作用機制

《候選抑癌基因Ovol2調控鼻咽癌幹細胞乾性及EMT的作用機制》是依託中山大學，由徐淼擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：候選抑癌基因Ovol2調控鼻咽癌幹細胞乾性及EMT的作用機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：徐淼
• 依託單位：中山大學

中文摘要

鼻咽癌是高發於中國華南地區的惡性腫瘤，復發和轉移是限制預後和治療失敗的首要因素，而腫瘤幹細胞被認為是惡性腫瘤復發和轉移的根源。我們通過基因差異表達晶片篩選出和鼻咽癌幹細胞、EMT相關的候選抑癌基因Ovol2。有研究表明該基因參與表皮細胞增殖和分化調節，但其和腫瘤關係未見報導。由於90%以上鼻咽癌是未分化型上皮細胞癌。因此我們推測Ovol2通過調節鼻咽癌幹細胞以及EMT影響腫瘤發生髮展。細胞和腫瘤組織預實驗進一步表明Ovol2低表達和鼻咽癌進展相關；而其過表達則降低鼻咽癌細胞自我更新能力和β-Catenin表達。我們下一步擬檢測該基因對腫瘤幹細胞乾性、分化及EMT的影響；並利用動物模型檢測其對成瘤效率和腫瘤轉移的影響；分析其參與乾性調控和EMT的相關通路；同時在大量臨床標本中驗證其和腫瘤分期、復發、轉移等相關性，闡明臨床意義。該研究將揭示Ovol2參與鼻咽癌發生髮展的分子機理和臨床意義。

結題摘要

鼻咽癌是起源於鼻咽上皮的一種惡性腫瘤，高發於我國華南地區以及東南亞，發病具有明顯的家族聚集性。由於90%以上屬於未分化非角化型鼻咽癌，誘導鼻咽癌細胞分化是潛在的鼻咽癌治療手段。在本項目資助下，我們探討了轉錄因子Ovol2在鼻咽癌分化中的功能以及其相關的下游通路。首先，我們發現鼻咽癌腫瘤組織中Ovol2顯著下調，並且在腫瘤組織和鼻咽癌細胞系中存在啟動子區域的DNA甲基化。Ovol2過表達抑制鼻咽癌細胞在裸鼠體內的成瘤效率和生長速度；在體外抑制腫瘤細胞克隆形成；而Ovol2敲除的細胞克隆在裸鼠和體外均具有更強的克隆形成能力。進而，我們發現Ovol2的過表達和敲除分別伴隨上皮細胞分化標誌物deltaNP63以及deltaNP63靶基因的上調和下調。在Ovol2敲除細胞中恢復deltaNP63的表達，可以回復deltaNP63靶基因的表達，但是並不能完全恢復細胞分化，提示Ovol2促鼻咽癌分化的功能僅部分通過deltaNP63實現。最後，我們使用分化誘導劑全反式維甲酸（RA）誘導鼻咽癌細胞分化，可以觀察到Ovol2表達增加；在Ovol2敲除細胞中，RA誘導分化效果下降；提示RA誘導分化部分通過增強Ovol2表達實現。並且在鼻咽癌細胞中使用DNA甲基化抑制劑5-Aza，能夠促進Ovol2表達和分化。本課題首次揭示了Ovol2在鼻咽癌中誘導分化的重要作用，其下調能夠促進鼻咽癌發生。我們的研究有助於理解鼻咽癌發生，特別是其未分化特性，提示了Ovol2可作為鼻咽癌標記物和潛在的治療靶點。