《個體促超排卵結局的遺傳機制研究》是依託北京大學，由胡永芳擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：個體促超排卵結局的遺傳機制研究
- 項目負責人：胡永芳
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
FSH和GnRH是廣泛用於不孕症促超排卵（COH）的外源性促性腺激素。臨床發現COH結局差異較大，可能是FSH和GnRH作用相關基因變異所致。故本課題擬採用Pyrosequencing技術，分析中國人群FSHR SNPs的分布特點，用PHASE Version 2.0和DnaSP Version 3.51構建Haplotype，繪製中國人群FSHR HPMap 圖譜；通過病例對照研究FSHR、ESR1和ESR2的基因變異，研究遺傳與非遺傳因素相互對COH結局的影響。體外，利用定點突變和轉基因技術，構建FSHR 1~3 個轉染細胞模型，研究新發現與表型相關SNP的功能意義。體內、體外研究相結合闡明個體COH結局差異的遺傳機制，確定預測COH結局的分子標記物，建立定量模型為臨床依據基因特徵、年齡等非遺傳因素擬定不孕症患者最佳外源性促性腺激素劑量，提高妊娠率、降低OHSS發生率提供理論依據。
結題摘要
本項目納入了行IVF/ICSI、年齡為18-40歲中國婦女626例，採集廢棄血標本，依據自行改良方法提取DNA。用Sanger法對FSHR基因全部10個外顯子、啟動子和ESR1的全部8個外顯子、啟動子進行測序。Lasergene 7.0 軟體對測序的結果進行分析。對基因頻率大於5%的SNPs則進行連鎖平衡分析、單倍型域和單倍型構建。首次在中國人群中大樣本篩選FHSR基因SNPs並確定其頻率，共發現7個SNPs，包括3個新的位點（-1821GA，ss475871789 PKUTDMCT|NM_000145.3:c.-1821GA；-1468GA，ss475871788，PKUTDMCT|NM_000145.3:c.-1468GA 和 *211 TC，ss475871790 PKUTDMCT|NM_000145.3:c.*111TC）；突變等位基因發生頻率分別為：-1821GA 76.3%，-1468GA 48.7%，-29GA 51.2%, 24GT 0.5% , 919GA 28.8%, 2039GA 25.4% 和*111 TC 4.6%；連鎖不平衡分析顯示rs6165與rs6166兩位點存在強的連鎖不平衡（|D’|=0.924; r2=0.72）。AA單倍型占絕大部分，頻率為69.8%。100例ESR1全基因組測序共確定了14個SNPs（ -215 CG 50.5%，-264 TC 35.50%，-671 CA 4.59%，-229 GA 24.50%等） 本項目研究了FSHR基因變異與IVF/ICSI結局相關性部分，共納入546名接受體外受精的婦女，通過單因素方差分析，以年齡、BMI為協變數，以FSHR SNPs為變數，我們的研究發現BMI，exon 182、promoter 533 以及 exon 182 * 1345 TC in exon10、1345 TC in exon10 * promoter 533 對患者基礎FSH水平有顯著性影響（P=0.03、0.034、0.018、0.018、0.028）。採用有序多分類的LOGISTIC回歸對患者發生卵巢過度刺激綜合症（OHSS）的風險進行分析，發現919GA位點與OHSS發生率顯著相關，P=0.027。
