《余甘子多糖抗腫瘤活性及其構效關係研究》是依託華南理工大學，由羅維擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：余甘子多糖抗腫瘤活性及其構效關係研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：羅維
- 依託單位：華南理工大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
余甘子富含多種生物活性物質，具有重要的生理活性和保健功能，近年研究發現余甘子粗多糖具有一定的抗腫瘤活性。本項目擬從余甘子中提取、分離和純化得到不同組分余甘子多糖（PEPS），採用裸小鼠移植瘤模型、MTT比色法和酶聯免疫吸附(ELISA)等方法研究各組分PEPS多糖在體內和體外的抗腫瘤免疫活性，闡明PEPS多糖可能的抗腫瘤作用機制。同時，採用多維核磁共振、質譜等先進手段研究各組分PEPS多糖的一級結構，並運用高分子溶液理論，探討各組分PEPS多糖的分子量、在溶液中的鏈構象以及立體三維結構形貌等結構特徵，揭示PEPS多糖的化學結構與抗腫瘤活性之間的構效關係。本項目不僅為PEPS多糖作為天然藥物成分用於醫藥行業提供理論和實驗依據，也對高效利用我國豐富的余甘子資源和促進山區經濟發展具有重要意義。
結題摘要
本研究在最佳工藝參數下超音波強化提取PEPS粗多糖，運用Sephadex G-75 、DEAE-Sepharose以及Diol-120等各種柱層析與其他方法相結合對PEPS粗多糖進行了有效的分級和純化，得到了三種具有相對均一組分的PEPS多糖PEPS-1-2、PEPS-2-3和PEPS-3-2, 分子量分別為10557、56378 and 71789Da。結合GC-MS、HPLC、NMR和IR等方法鑑定了其中兩種相對均一組分多糖的一級結構; 其中，PEPS-2-3多糖為半乳甘露聚糖結構，主要包括兩個部分，呋喃半乳聚糖部分和吡喃半乳甘露聚糖部分，呋喃半乳糖部分以直鏈連線→5-β-Galf（1→6）-β-Galf→1的結構為主，存在多個的分支。吡喃半乳甘露聚糖部分以直鏈連線（→4）-β-Galp（1→2）-β- Manp-（1→的結構為主, 糖殘基1→3-β- Manp形成支鏈。而PEPS-3-2多糖則是一種典型的果膠多糖，主鏈由是1, 4-D-GalpA 通過 O-4 位與 1, 5-α-L-Araf 的 O-5 位交替連線形成含有較多分支的阿拉伯半乳糖醛酸聚糖。同時，本研究採用MTT法測定了七種不同組分PEPS多糖對的人肝癌細胞（HepG-2）、人肺癌細胞（A549）等癌細胞的增殖抑制作用；採用ELASA比色法檢測了余甘子多糖對體外培養的小鼠巨噬細胞(Mφ)分泌TNF-α和IL-6細胞因子的促進作用，研究了不同組分多糖對DPPH、超氧陰離子自由基的清除能力和抗脂質過氧化作用。結果表明：七種不同組分PEPS多糖對細胞HepG-2、A549都有較好的增殖抑制作用，且多糖樣品中糖醛酸含量的多少與其抗腫瘤活性的高低順序相同。ELASA實驗中，余甘子多糖各組分可明顯促進體外培養的小鼠巨噬細胞中IL-6和TNF-α的水平。此外，不同餘甘子多糖抗氧化活性由小到大的順序是 PEPS ＜ PEPS-1-2 ＜ PEPS-2-3 ＜ PEPS-2-3，與它們的抑制腫瘤生長作用大小是一致的。因此，推斷余甘子多糖的抗腫瘤作用主要在三個方面：一、余甘子多糖通過增強機體細胞免疫功能，達到抗腫瘤目的；二、余甘子多糖的抗腫瘤活性與其抗氧化活性密切相關，抗氧化能力越抗腫瘤活性就越好。三、余甘子多糖樣品的糖醛酸含量越高，抗腫瘤活性越好，表明余甘子多糖中較高的糖醛酸含量可能是其抑制腫瘤細胞生長的主要原因
