《以四肽為配基的仿生層析方法與蛋白質藥物的分離純化》是依託浙江大學，由姚善涇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：以四肽為配基的仿生層析方法與蛋白質藥物的分離純化
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：姚善涇
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
研究以四肽為配基的仿生層析方法，並將其用於蛋白質藥物的分離純化，首先通過分子對接和分子動力學模擬的手段分析四肽配基與蛋白質分子的相互作用關係，包括胺基酸種類和排序，作為四肽配基篩選和配基設計的主要參考數據；研究層析基質的活化和四肽偶聯方法，將初選的四肽配基偶聯到層析基質上成為層析介質，並且最佳化偶聯方法，確保有較高的配基密度，研究含有四肽的仿生層析介質的性能，包括介質的空間結構、介質的表面結構、靜態吸附性能，動態吸附性能，最後把其用於報告抗體、人血清白蛋白、乳鐵蛋白等蛋白質藥物的分離純化，形成完整的從介質設計到蛋白質分離的研究路線。
結題摘要
抗體藥物是目前世界被最為關注也是發展最快的生物醫藥領域，而對藥物的純度要求非常高，因此抗體的分離純化受到高度關注。但是目前在抗體分離中除了ProteinA親和層析是規定和常用的分離手段以外，缺少其它有效的分離純化方法。本項目研製的四肽仿生層析就是在分析ProteinA親和作用力基礎上發展起來的一種行之有效的方法，以簡單的四肽分子作為配基，以替代大分子ProteinA，在作用關係和功能上都起到仿生作用，實現高效分離抗體的目的。通過4年的研究，對四肽仿生層析進行了深入的研究，從四肽的設計到四肽層析的實際套用，建立了一套比較完整的篩選、製備、性能測試和評價、機理探討和實際套用的技術路線，主要體現在：形成了一套篩選四肽作為抗體分離配基的辦法，建立了由480個四肽構成的配基庫，建立了分子動力學模擬分析四肽和蛋白質相互作用機理的方法，形成了連線四肽為配基製備仿生四肽介質的方法，最佳化了製備條件，製備了20多個的以四肽為配基的新介質，包括不同的配基和不同的配基密度，研究了新型四肽仿生介質的靜態和動態吸附蛋白質和抗體的性能，研究了葡聚糖和PEI兩種空間臂連線四肽的方法並製備了相應的介質，研究了這些接枝聚合物的靜態和動態吸附性能，進行了與不接枝的介質的性能比較，開展了新介質分離模擬體系和實際體系的實驗，得到了很好的結果。很多內容都是國際上首次開展，創新性明顯。在項目執行期間，在期刊上發表了24篇學術論文，其中20篇被SCI收錄，4篇被EI收錄，獲得了中國授權發明專利6項。同時培養了一批人才，有3位博士後出站，4位學生獲得博士學位，12位學生獲得碩士學位。
