以“病毒進入細胞”為靶的五環三萜抗HCV病毒藥物研究

《以“病毒進入細胞”為靶的五環三萜抗HCV病毒藥物研究》是依託北京大學，由肖蘇龍擔任負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：以“病毒進入細胞”為靶的五環三萜抗HCV病毒藥物研究
• 項目負責人：肖蘇龍
• 依託單位：北京大學
• 項目類別：面上項目

項目摘要

以HCV為代表的RNA病毒因其基因複製的高突變率，使以病毒複製為靶的抗病毒藥物較易失去活性；而病毒複製的上、下游過程 -病毒進入細胞和新生病毒從感染細胞中釋放，涉及與宿主細胞（突變率低）的相互作用，構成了抗病毒藥物研發的新契機。本課題基於前期建立的螢光標記HCV病毒感染Huh7細胞的可視化模型，以板藍根和川續斷中發現的活性五環三萜為起始物質,研究三萜天然物抑制HCV病毒進入細胞的構效關係和藥效團，發現活性好、溶血副作用低的先導化合物；進而通過生物素標記的光交聯分子探針、唾液酸/維生素C等參與病毒識別的功能分子修飾的三萜衍生物、光交聯免疫共沉澱以及蛋白質組學質譜分析技術等，尋找五環三萜以病毒進入細胞為靶的作用蛋白和其調控病毒與宿主細胞識別的分子機制，開發治療和預防功能兼具的新型抗病毒藥物，降低因突變帶來的耐藥性對抗病毒藥物的衝擊，並探索板藍根等傳統中藥現代化的可行性。

結題摘要

由於HCV基因複製的高突變率，使得以病毒進入細胞為靶的新型抗HCV藥物的研發受到了國內外學者的廣泛關注。本項目建立了安全、快速、可靠的螢光標記HCV感染Huh7細胞的篩選平台以及從中藥皂莢大量製備刺囊酸的工藝流程，合成了一系列刺囊酸等五環三萜小分子化合物庫並進行了抗HCV活性評價，總結了五環三萜類天然物抗HCV進入的構效關係及藥效團，即五環三萜的A環、B環及E環是其抗HCV的保守基團，而D環及17位羧基是可修飾位點。在此基礎上進一步針對五環三萜的可修飾位點17位羧基開展了糖基化、維生素C及唾液酸等功能分子的修飾，並綜合運用加藥時間點、免疫共沉澱、表面等離子共振、蛋白質譜及Autodocking等實驗，對五環三萜類化合物抗HCV的作用機制進行了深入的實驗研究，發現了五環三萜抗HCV進入活性的作用靶點為HCV E2蛋白。本研究不僅發現了數個活性好而毒性低的具有抗HCV進入活性的抑制劑，為進一步研發具有新作用機制的抗HCV藥物的提供了候選先導化合物，而且為“五環三萜天然物是自然界調控病毒與宿主識別的生物進化產物”的學說提供了重要的理論依據。本項目相關研究發表了SCI論文15篇，總影響因子58.97，其中在本領域權威刊物Biomaterials, J. Med. Chem及Eur. J. Med. Chem發表論文7篇，在Tetrahedron刊物發表封面論文一篇，獲中國藥學會優秀論文二等獎一次，培養博士生2名，碩士生6名（含3名在讀）。