《人腦膠質瘤Aurora A基因作用及其分子機制的研究》是依託中山大學，由夏之柏擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：人腦膠質瘤Aurora A基因作用及其分子機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：夏之柏
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
先前我們研究發現，與正常星形細胞相比，14個不同惡度膠質瘤細胞株的Aurora AmRNA和蛋白水平均有升高，導入siRNA Aurora A的人膠質瘤細胞(U87MG，U373MG)Aurora A蛋白表達和增殖活性均下降，導入siRNA Aurora A的U87MG細胞分別進行阿黴素和紫外線照射治療，更初步證實Aurora A基因沉默加強化療、放射治療膠質瘤的作用，提示相互間有協同作用的潛力。以此為基礎，進一步探討①不同級別人腦膠質瘤手術切除的新鮮標本及其自身配對的癌旁正常組織和大宗膠質瘤病例的Aurora A表達和擴增與腫瘤WHO分級及生存期之間的關係，②上調Aurora A基因的正常星形細胞表型變化，③Aurora A基因沉默聯合替莫唑胺和鈷60體內外協同抗膠質瘤作用及機制。為Aurora A基因作為膠質瘤新的分子診斷和生存預後指標及基因治療協同放化療治療膠質瘤提供可靠的理論依據。
結題摘要
AURKA kinase A (AURKA)，絲/蘇氨酸激酶家族的成員，在各級別膠質瘤中均有表達，隨著腫瘤惡性程度的升高，其表達水平上升，與膠質瘤WHO分級呈正相關，與患者生存期呈負相關，敲低膠質瘤細胞株和原生代培養的膠質瘤細胞AURKA表達，腫瘤細胞的增殖明顯減弱。結合其它相關研究，可認為AURKA是一種新的癌基因。進一步研究敲低AURKA聯合替莫唑胺治療惡性膠質瘤的效果，發現敲低AURKA表達的膠質瘤細胞對替莫唑胺的敏感性大大增加，二者具有協同性。 本研究更深入探討AURKA在膠質瘤發生髮展中可能的分子機制。從膠質瘤組織中分離並建立膠質瘤幹細胞株，檢測其誘導分化前後幹細胞標記物和AURKA的變化，發現AURKA為膠質瘤幹細胞重要標記物，再利用RNA干擾技術下調膠質瘤幹細胞AURKA表達，觀察到細胞神經球形成能力降低，幹細胞標記物Nestin、CD133和Sox-2降低，分化標記物GFAP和Tuj-1上升，裸鼠顱內成瘤能力消失，說明AURKA是維繫膠質瘤幹細胞功能的重要因素。利用基因晶片技術，揭示AURKA下調後膠質瘤幹細胞Wnt信號通路的下游基因成分AXIN2，LEF-1和TCF4均有降低，提示幹細胞成瘤能力的標記物BMP和SOX2明顯下降，Top/FopFlash luciferase 測定，顯示下調AURKA表達降低TopFlash活性，在穩定下調AURKA的腫瘤細胞中，轉染β-catenin S33Y突變可以逆轉TopFlash活性的降低，提示AURKA通過穩定β-catenin 來激活wnt/β-catenin 通路調節膠質瘤幹細胞的自我更新和成瘤能力。進一步的研究還發現在膠質瘤幹細胞中，AURKA能直接抑制β-catenin 降解複合體中的GSK3 β，同時也能與複合體中的AXIN競爭，從而穩定β-catenin並促進其核內聚集，其中與與AXIN競爭結合是其穩定β-catenin主要的機制。 本研究不但首次揭示了大樣本膠質瘤AURKA基因表達規律，以及其與腫瘤惡性程度及患者生存預後關係，還了解到AURKA表達降低的腫瘤細胞對化療的敏感性增加，而且更重要的是發現AURKA在膠質瘤中的作用是由膠質瘤幹細胞亞群來實現的，並主要通過AURKA和Wnt/β-catenin信號通路之間存在的聯繫完成，提示尋求調控這種聯繫對膠質瘤幹細胞進行干預可能是是未來研究方向。
