人不同體液特異circRNAs的鑑定、甄選及法醫學意義研究

《人不同體液特異circRNAs的鑑定、甄選及法醫學意義研究》是依託復旦大學,由謝建輝擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:人不同體液特異circRNAs的鑑定、甄選及法醫學意義研究
  • 依託單位:復旦大學
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:謝建輝
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

鑑定生物性檢材的組織來源在犯罪現場重建等中具有重要意義。複雜生物檢材,如降解檢材等,對組織來源鑑定方法提出了更高要求。外顯子來源的環形RNA(circRNA)是最近被廣泛報導的一類RNA,具有細胞表達特異性,穩定性好且表達豐富,是理想的體液鑑定候選生物標記。本項目擬通過轉錄組測序(RNA-seq)鑑定外周血、精液、唾液、尿液、月經血和陰道液共6種體液的circRNA表達譜。通過考察評估各體液特異circRNAs在體液鑑定中的特異性、穩定性、檢測敏感性等,分別獲得2-3個適合各體液鑑定的候選circRNAs。通過調整最佳化候選circRNAs的擴增條件,建立一個能鑑定6種體液的複合檢測體系,並通過大樣本量常規檢材以及不同體液的混合檢材、陳舊檢材對其特異性、穩定性等進行全面評估。該研究的開展,將為體液鑑定提供新的候選標記和檢測策略,提高體液鑑定的效率。

結題摘要

鑑定生物性檢材的組織來源在犯罪現場重建等中具有重要意義。複雜生物檢材,如降解檢材等,對組織來源鑑定方法提出了更高要求。本項目首先通過鑑定ALAS2和MMP7兩個生物標記的circRNA,發展mRNA和circRNA共檢測策略,評估包含circRNA檢測在體液鑑定中的效能;結果表明mRNA和circRNA共檢測策略提高了生物標記的檢測敏感性和生物標記的穩定性。進一步通過篩選獲得了6種體液45個生物標記,鑑定其中有14個生物標記含有circRNA表達,並獲得了其結構,評估了circRNA表達水平以及包含circRNA檢測對生物標記特異性的影響,結果表明包含circRNA檢測並不影響生物標記的特異性。最後建立了一個可以同時檢測18個生物標記、判別6種體液類型的複合擴增檢測體系,研究結構表明該體系具有良好的檢測特異性、較高的檢測敏感性,對於降解檢材和混合檢材具有很好的檢測效果。總之,本項目為法醫體液鑑定提供了一種新的檢測方法。

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