《五氯酚和全氟辛酸的聯合肝毒性效應及分子機制研究》是依託南開大學，由單國強擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：五氯酚和全氟辛酸的聯合肝毒性效應及分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：單國強
- 依託單位：南開大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
五氯酚（PCP）和全氟辛酸（PFOA）都是環境中廣泛存在的有機污染物，目前對二者單一毒性效應和機制的認識較為深入。通過對二者製毒機制的分析，我們推測PCP和PFOA都可能在肝臟中富集並發生聯合毒性效應。本項目擬以人肝癌Hep2細胞為受體模型，分別研究PCP與PFOA在單一和共存時對Hep2細胞產生的毒性效應，判斷二者之間的聯合毒性效應，並通過研究PCP和PFOA在細胞器的吸收和分布、細胞內各種生化指標及活性氧（ROS）水平的變化等，揭示聯合毒性的分子機制。本項目的完成將有助於認識鹵代酚及全氟化合物污染物共存所造成的聯合毒性效應，並將對今後兩類污染物的環境基準制定和環境評估工作提供一定的科學依據。
結題摘要
本研究圍繞氯酚類化合物及其肝代謝產物氯代醌、全氟化合物的細胞毒性展開研究，共取得如下的進展： 1全氟化合物可顯著提高五氯酚的細胞毒性：結果表明低濃度不呈現明顯毒旋備立性的全氟化合物可以墓章提端提高PCP的細胞毒性，聯合組細胞存活率下降並不是由於氧化脅迫加強或者促進PCP轉化為毒性更強的代謝產物造成的，而是由於PFOA/PFOS擾亂細胞膜性質，改變了細胞膜的通透性，使得更多的PCP進入細胞，通過加強的PCP的氧化磷酸化解偶聯作用，導致細胞毒性增強。 2氯代醌代謝物在氧化脅迫下的DNA毒性及作檔熱榜用機制：選擇氯酚類化合物的代謝產物二氯苯醌（DCBQ）為模型化合物，以質粒pBR322 DNA為受體，建立了氯代醌在氧化應激因子H2O2存在下的體外氧化性損傷模型，為研究PCP在（PFOA造成的）氧化脅迫時的細胞聯合毒性奠定了基礎。同時，我們還發現苯甲異羥肟酸（BHA）對該損傷具有非常好的保護作用。 利用•OH 能促使水楊充欠棗酸羥基化的性質，通過高效液相色譜-電化學法，實現了對鹵代醌/H2O2體系產生•OH的定量檢測，為研究細胞體系氧化脅迫下醌類化合物產生•OH的能力研究，提供了有效的檢測方法。 利用HPLC/MS等技術分離純化了DCBQ/H2O2體系產生的碳中心自由基中間體，為此前我們提出的鹵代醌不依賴金屬離子產生•OH的機制，提供了實驗證據。 3 發現了兩類解除氯代醌生物毒性的化合物 前期研究曾表明BHA通過一種新型的親核取代-Lossen 重排反應達到四氯苯醌（TCBQ）脫毒效應，然而，在該體系中沒有分離到關鍵的親核取代中間體。本研究發現當TCBQ換成DCBQ時，穩定的親核取代加合物得到了分離鑑定。BHA和DCBQ反應機制的提出，為BHA保護DCBQ/H2O2導致的DNA損傷闡明了機理，也為此前疊阿閥提出的氯代醌活化的Lossen 重排反應提供了實驗證據。 利用人肝癌細胞系HepG2細胞及細胞存活率MTT毒性實驗，研究並發現茶多酚中的主要活性物質EGCG對仔探TCBQ細胞毒性有一定的緩解作用，這與EGCG能促使TCBQ還原為四氯氫醌，並延緩後者的自氧化毒性過程有關。 4 初步建立了兩種用於全氟化合物簡捷測定的方法 本研究從免疫分析法和衍生化HPLC方法兩個角度進行了取代HPLC/MS方法學探討。 以上研究成果，頸棗重埋共發表文章5篇，其中SCI收錄4，待發表文章3篇。
