在沸水浴的條件下，DNA與二苯胺反應呈現藍色。因此，二苯胺可以作為鑑定DNA的試劑。
基本介紹
- 中文名：二苯胺試劑
- 顏色：無色
- 使用方法：混勻
- 加熱：DNA在酸性條件
配製,使用方法,
配製
A液：1.5克二苯胺(C12H11N)溶於100ml冰醋酸(乙酸,C2H4O2)中，再加1.5ml濃硫酸，用棕色瓶保存（光下分解）。如冰醋酸呈結晶狀態,則需加溫後待其熔化,再使用。
B液：體積分數為0.2%的乙醛溶液(C2H4O)。
將0.1ml B液 加入10ml A液中，製成二苯胺試劑，現配現用。
使用方法
1、配製二苯胺試劑 取0.1mLB液，滴入到10mLA 液中，混勻。
2、鑑定：取4mLDNA提取液放入試管中，加入4mL二苯胺試劑，混勻後觀察溶液顏色（不變藍）。
用沸水浴加熱。在加熱過程中，隨時注意試管中溶液顏色的變化（逐漸出現淺藍色）。
3、加熱後冷卻觀察。
DNA在酸性條件下加熱，其嘌呤鹼與脫氧核糖間的糖苷鍵斷裂，生成嘌呤鹼、脫氧核糖和脫氧嘧啶核苷酸，而2-脫氧核糖在酸性環境中加熱脫水生成ω-羥基-γ-酮基戊醛，與二苯胺試劑反應生成藍色物質。
