《中樞活性氧介導尾加壓素II心血管效應的機制研究》是依託復旦大學，由盧寧擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：中樞活性氧介導尾加壓素II心血管效應的機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：盧寧
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
尾加壓素Ⅱ的外周心血管效應可因種屬及解剖的差異而表現明顯不同，而UⅡ的中樞心血管效應卻相當一致而穩定。尾加壓素Ⅱ（UII）可能通過激活交感系統來影響心血管功能，但UⅡ的中樞機制尚知之甚少。近年研究顯示中樞活性氧可引起交感興奮，在已證實UII可促進中樞活性氧產生的前期工作基礎上，本課題提出活性氧可能中介了中樞UII的心血管效應，構想通過降低中樞活性氧水平以阻斷其對UII的介導作用，降低交感神經興奮效應，從而阻斷中樞UII的升壓作用。通過整體實驗明確中樞活性氧在介導UII心血管效應中的作用，分析活性氧介導UII激活交感的中樞作用途徑。在此基礎上通過神經細胞培養和腦片膜片鉗技術研究活性氧參與UII調節神經元活動的機制。本課題的意義在於從整體和細胞水平兩方面對中樞活性氧中介UII心血管效應的機製作較深入的探討，對於探索治療高血壓的新途徑具有潛在的套用價值。
結題摘要
UII可能通過激活交感神經系統影響心血管功能，但至今對於UII的中樞調節機制仍知之甚少。本課題提出活性氧（ROS）可能中介中樞UII的心血管效應的假設。 首先，採用免疫組化觀察自發性高血壓大鼠（SHR）和正常血壓大鼠（WKY）延髓UII受體（UT）的表達，發現在大鼠延髓頭端腹外側部（RVLM）和孤束核均有UT表達。其次，動物整體實驗研究：在SHR和WKY大鼠側腦室及RVLM微量注射均發現：UII可引起血壓升高，且在SHR大鼠更明顯；預先注射Urantide（UT抑制劑），發現Urantide可阻斷UII的升壓效應，提示中樞UII在SHR和WKY大鼠的效應的差異可能與兩種動物延髓中UT密度的不同相關，且RVLM是UII產生中樞心血管效應的重要核團，其他腦區微量注射UII產生的效應可能在RVLM進行整合。RVLM區注射Tempol（SOD類似物）或Apocynin（NADPH酶抑制劑），UII的升壓效應均可被阻斷，提示UII在RVLM區的升壓效應可能是由ROS介導的。第三，酶標法測定大鼠RVLM區NADPH氧化酶的活性，發現SHR大鼠的RVLM區NADPH氧化酶的活性比WKY大鼠的高，提示ROS介導了中樞UII的心血管效應。第四，免疫螢光結合雷射共聚焦研究發現：NADPH氧化酶胞膜亞單位gp91phox和p47phox與UT在RVLM區的神經元上均有共表達；Real-Time PCR和Western blot發現: UII可增加SHR大鼠RVLM區NADPH氧化酶亞單位gp91phox、P47phox mRNA及蛋白的表達水平，提示中樞UII可能作用於RVLM的UT，促使胞漿亞單位p47phox磷酸化，與胞膜亞單位gp91等形成有活性的氧化酶，催化超氧陰離子的生成。另外，近年來H2S作為調節血壓的研究熱點，我們進一步的研究發現：H2S抑制UII的升壓效應可能是通過抑制RVLM區NADPH氧化酶抑制ROS的生成而導致的。綜上所述，本課題研究發現UII在SHR大鼠的中樞心血管效應通過以下途徑介導：UII作用於RVLM的UII受體UT，激活NADPH氧化酶，引起超氧陰離子等活性氧水平增加，繼而介導交感興奮的心血管效應。本課題的研究結果對於探索治療高血壓的新途徑可能具有潛在的套用價值。
