《中國女性高危HPV58病毒基因的致癌特點及其機制研究》是依託浙江大學，由李陽擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：中國女性高危HPV58病毒基因的致癌特點及其機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：李陽
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
高危HPV 感染是宮頸癌發生的必需因素，其中HPV16,18是全球最常見的型別，但在中國等東亞地區HPV58呈較高流行頻率。HPV58特殊的地理分布及區域致癌高危性正在受到密切關注。申請人已通過高通量技術及全基因組和轉錄組分析，完成對HPV58全長基因克隆測序，並通過預實驗發現HPV58可能存在與HPV16不同的致癌機制，miR-99a可能參與HPV58 E6/E7的致癌過程。本項目擬在前期研究的基礎上，進一步通過功能實驗明確HPV58 E6/E7在調控細胞生物學行為煉料汽中的作用及其與HPV16 E6/E7間的差異；再藉助角化上皮細胞的三維器官筏式培養在體外真實再現HPV58的感染過程，並結合宮頸病變組織中遙府甩病毒癌基因與各種相關分子表達的相關性分析，揭示HPV58致妹潤汗癌作用及特點和miRNA在其中的作鞏櫃用及調控機制，旨在探尋阻遏HPV58致癌的有效靶點和研發適合東亞地區新一代HPV疫苗提供科學依據。
結題摘要
本項目通過設計HPV58 E6和達多謎喇E7特異性多肽片斷，將多肽交聯至三種不同載體蛋白，免疫兔子，獲得免疫血清，取血清做ELISA 確定滴度，分離脾細胞、融合，取細胞上清檢測，篩選出陽性克隆，將陽性克隆製備重組抗體並進行測序分析，從而獲得特異性HPV58 E6和E7兔單克隆抗體。此外，通過構建pFLAG-CMV5.1-HPV58E6/E7和pFLAG-CMV5.1-HPV16E6/E7真核生物表達質粒，轉染293T和U2OS細胞，觀察HPV58E6/E7和HPV16E6/E7基因對細胞的周期、凋亡、侵襲能力的差異及下游分子的表達差異，比較兩者致癌能力的差異。從我們的結果可以看出，相比於HPV58E6/E7，HPV16E6/E7具有更強的促細胞周期進程、抑制細胞凋亡、促進細胞侵襲的能力，為進一步揭示HPV致癌過程中的重要分子所起的關鍵作用，且初步院姜采闡述了HPV在自然界的分布規律和不同病變中分布特徵。為更好的了解HPV的致癌過程和致癌的關鍵環節，有針對性的提供治療方案和戀習汗全預防措施打下了基礎，也為探索阻斷宮頸癌發生的新靶點提供了科學證據，豐富了宮頸癌病因學理論。
