《丙泊酚引起血管舒張的PKCs-eNOS-N0信號通路機制》是依託上海交通大學，由王莉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：丙泊酚引起血管舒張的PKCs-eNOS-N0信號通路機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王莉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
丙泊酚麻醉復甦迅速的特點優於現有的其它麻醉技術，但在其誘導和麻醉維持過程中，導致系統血壓普遍、顯著降低。因此對心臟儲備低下的患者，丙泊酚麻醉的安全性一直倍受關注。丙泊酚的血管效應複雜，在體實驗顯示，丙泊酚對動、靜脈循環都有影響。丙泊酚似乎影響血管系統的許多細胞過程，其確切機制有待闡明。.本項目，旨在探討丙泊酚引起低血壓的血管內皮機制。首先，在體外培養的HUVECs模型，觀察藥物對血管內皮細胞eNOS-NO的激活效應，特別關注PKCs亞型如PKCδ、PKCα、PKCθ、PKCε和PKCζ是否、以及怎樣介導丙泊酚引起血管內皮細胞eNOS-NO通路激活；然後，在Powerlab組織器官水浴系統，觀察丙泊酚對內皮完整或者去內皮的SD大鼠主動脈降段血管環的舒張效應，以進一步證實藥物內皮依賴性血管舒張和PKC-eNOS-NO信號傳導機制。研究結果將為深入闡述丙泊酚導致低血壓機制提供有力的實驗室證據。
結題摘要
背景：丙泊酚麻醉復甦迅速的特點優於現有的其它麻醉技術，但在其誘導和麻醉維持過程中，導致系統血壓普遍、顯著降低。因此對心臟儲備低下的患者，丙泊酚麻醉的安全性一直備受關注。目的：探討丙泊酚引起低血壓的血管內皮機制。方法：用Western Blot法在體外培養的人臍靜脈內皮細胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）檢測丙泊酚影響eNOS表達和活性的機制，分別用PKCs特異亞型抑制劑、siRNA、Adv-wtPKC分析PKCs在丙泊酚激活eNOS中所扮演的角色。用ADInstruments Power Lab組織器官水浴系統在內皮完整或去內皮的SD大鼠胸主動脈環檢測丙泊酚的血管舒張作用與血管內皮的關係，用PKCs特異亞型抑制劑分析PKCs在丙泊酚血管舒張效應中所扮演的角色。結果：丙泊酚呈劑量、時間依賴性升高P-Ser1177-eNOS的表達。PKC抑制劑bisindolylmaleimide I（Bis I, 0.1-1μmol/l）能有效阻止丙泊酚誘導的eNOS活化。PKC激動劑PMA（1μmol/L）處理細胞1和24小時能顯著升高eNOS磷酸化。對PKC亞型進一步的分析顯示，用PKCs（PKC-α、-δ、-ε、-θ及-ζ）特異亞型抑制劑、siRNA和Adv-wtPKC選擇性抑制或過表達PKC各亞型發現，PKC-α、-θ和-ε對丙泊酚（5和50μmol/l）誘導eNOS激活有顯著增強效應； PKC-δ表現為抑制。離體的SD大鼠胸主動脈環分為內皮完整組和去內皮組。在內皮完整組，丙泊酚誘導的血管舒張較去內皮組明顯，且這種舒張效應被eNOS抑制劑L-NAME(1×10-4mol/L)明顯抑制。PKCs（PKC-α、-δ、-ε、-θ及-ζ）特異亞型抑制劑在內皮完整組減小丙泊酚引起的血管舒張；但在去內皮組PKCs（PKC-α、-δ、-ε和-θ）特異亞型抑制劑加強丙泊酚的血管舒張。結論：丙泊酚劑量、時間依賴性誘導eNOS激活。PKC-α、-θ和-ε對丙泊酚誘導HUVECs的eNOS激活有顯著增強效應，而PKC-δ表現為顯著抑制。內皮依賴和獨立於內皮的機制共同介導了丙泊酚的血管舒張效應，PKC均參與其中。PKC-α、-δ、-ε和-θ分別在內皮完整組促進、在去內皮組抑制丙泊酚的血管舒張效應。
