不對稱PCR

不對稱PCR是利用 不等量的一對引物來產生大量單鏈DNA (ssDNA)的方法。不對稱PCR製備的單鏈 DNA在用於序列測定時不必在測序之前除 去剩餘引物，簡化操作、節約人力物力。另 外，用cDNA經不對稱PCR進行序列分析 或SSCP分析也是現在研究真核外顯子的常用方法。根據實驗設計的不同，不對稱 PCR又可分為引物濃度不對稱PCR和熱不對稱PCR。（侯一平）

基本介紹

• 中文名：不對稱PCR
• 外文名：asymmetric PCR
• 比例：50～100
• 分類：限制性引物與非限制性引物

這兩種引物分別稱為限制性引物與非限制性引物；其最佳比例一般為1：50～1：100，關鍵是限制引物的絕對量。限制性引物太多太少，均不利於製備ss-DNA。也可用普通PCR製備靶DNA雙鏈DNA（ds-DNA），再以ds-DNA為模板，只用其中一種過量引物進行單引物PCR製備ss-DNA。

產生的ds-DNA與ss-DNA由於分子量不同可以在電泳中分開，而得到純ss-DNA。

不對稱PCR主要為測序製備ss-DNA，尤為用c-DNA經不對稱PCR進行DNA序列分析是研究真核DNA外顯子的好方法。