《上皮間質轉化—-CCL5促進乳腺腫瘤進展的可能的新機制》是依託上海交通大學，由張岩擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：上皮間質轉化—-CCL5促進乳腺腫瘤進展的可能的新機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張岩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
CCL5是應急過程中細胞分泌的趨化因子，在腫瘤（尤其是乳腺腫瘤）中高表達，與腫瘤的惡性進展密切相關，是腫瘤細胞發生侵襲和轉移的主要原因。然而其促進腫瘤進展的機制仍不明確。EMT是上皮細胞腫瘤獲得遷移和侵襲能力的重要生物學過程。但目前關於EMT介導CCL5促進乳腺腫瘤轉移的機制卻未見報導。我們前期研究發現CCL5缺失小鼠乳腺癌組織中EMT顯著低於對照組，提示EMT可能參與CCL5介導的乳腺腫瘤的侵襲和轉移。本課題擬採用4T1小鼠乳腺癌模型，探討在乳腺腫瘤進展中CCL5對EMT的影響；並以CCL5蛋白誘導的人乳腺癌細胞MDA-MB-231為模型，體外探討EMT在CCL5誘導的乳腺癌細胞侵襲過程中的必要性及CCL5調節TGF-β依賴的EMT的可能分子機制。本項目將為闡明CCL5促進乳腺腫瘤進展提供新的分子機制並為乳腺腫瘤的治療提供新的靶標。
結題摘要
CCL5是CC趨化因子家族的重要成員分子之一，又被稱為RANTES。CCL5首先在活化的T細胞中發現，後續的研究證明CCL5在多種細胞中都有表達，在自身免疫疾病和腫瘤等疾病中發揮重要作用。乳腺癌是女性最常見的癌症，雖然近年來乳腺癌的診斷和治療取得了很大進步，但仍有許多患者最終因腫瘤遠處轉移病情進展而喪失生命。CCL5表達與乳腺癌的轉移和預後也密切相關，研究證實伴有腋窩淋巴結轉移的乳腺癌患者CCL5含量明顯高於未轉移的患者，此外回顧型研究發現CCL5的表達量與患者的預後性呈負相關。因此本課題的主要研究CCL5在乳腺腫瘤遠處轉移的作用及其機制研究。首先，我們選用自髮乳腺癌模型MMTV-PyMT轉基因小鼠，此動物模型模擬臨床上管腔型（Luminal）乳腺癌，這一類型的乳腺癌占全部乳腺癌的70%，從而我們的研究成果使更多人受益。然後，我們將CCL5敲除小鼠與MMTV-PyMT雜交，得到CCL5-/- PyMT小鼠。相比於正常的CCL5+/+ PyMT小鼠，CCL5敲除後腫瘤發生時間明顯延後，特別是肺部的遠處轉移明顯減少，結果證實CCL5敲除顯著降低lumianl型乳腺腫瘤的肺轉移。由於體外實驗中CCL5對腫瘤細胞沒有直接作用，且CCL5與機體的免疫系統關係密切，所以我們選擇從腫瘤免疫的角度尋找作用機制。通過流式細胞檢測腫瘤部位及全身各淋巴器官中腫瘤相關免疫細胞亞群及其相關的細胞因子的含量，發現在CCL5-/- PyMT中Th2 CD4+ T細胞數量有明顯的減少，RT-PCR和ELISA檢測也得到了相似的結果。為了進一步證實Th2型細胞在介導CCL5促進乳腺癌肺轉移中的必要性，我們通過CD4中和抗體阻斷CD4+ T細胞的功能，兩組小鼠之間肺轉移的差異消失，確定了CD4+ T細胞極化的改變在CCL5促腫瘤轉移中的重要性。最後，我們探討了CCL5誘導的Th2型細胞如何增強乳腺癌細胞的侵襲。我們建立了乳腺腫瘤上皮細胞的體外3-D類器官培養體系，實驗結果表明在腫瘤相關巨噬細胞（TAM）共同存在下，來源於CCL5+/+ PyMT 的CD4+ T細胞顯著提高乳腺腫瘤上皮細胞的EMT，增強其侵襲能力。綜上所述，本課題探討了CCL5調控Luminal型乳腺癌發生和肺轉移的分子機制，提示CCL5可能作為新的分子靶標套用於Luminal型乳腺癌的臨床診斷和治療。
