幼孤家貧,少時讀書刻苦,20歲補
州學附生。1902年張謇為創辦通州師範學再謎局校(今
南通師範學校),準備其資助留學日本,學朽灶寒習
師範教育,他以照踏境侍奉家中老母為由辭謝。1903年通州師酷乘范學校建成,丁祖佑考入第一屆講習科,求兆記采後因家貧輟學。1905年,他與從日本留學回通的李元蘅一起在
通州城南創辦明義女校,並擔任通州商立國小校教習。1908年
張謇聘請他擔任師範附屬國小級任教員。1911年4月,應聘擔任師範學校國說酷兆背文教習。1912年5月因病去世。丁祖佑教學有師法,張謇尋項員稱讚之“真師範”。他離世後,
顧怡生為其撰寫《丁君啟之事略》。