《一種納米炭混懸組合物的製備方法》是成都市藥友科技發展有限公司於2002年5月14日申請的專利，該專利的公布號為CN1458185，授權公布日為2003年11月26日，發明人是唐小海、邱宇。該發明屬於醫用診斷試劑領域，特別是屬於示蹤診斷試劑領域。
《一種納米炭混懸組合物的製備方法》公開了一種納米炭混懸組合物，其由納米炭顆粒、聚乙烯吡咯烷酮、生理鹽水和枸櫞酸鈉所組成；該發明還公開了納米炭混懸組合物的製備方法，其採用振動磨或者球磨對組合物進行分散，其分散效率大大提高，可在短時間內達到較高的分散效果。
2015年11月27日，《一種納米炭混懸組合物的製備方法》獲得第十七屆中國專利獎優秀獎。
基本介紹
- 中文名：一種納米炭混懸組合物的製備方法
- 申請人：成都市藥友科技發展有限公司
- 申請日：2002年5月14日
- 申請號：021137315
- 公布號：CN1458185
- 公布日：2003年11月26日
- 發明人：唐小海、邱宇
- 地址：四川省成都市高新區高新大道創業路8號
- Int.Cl.：C08L39/06、C08K3/04、C08K9/00
- 代理機構：成都信博專利代理有限責任公司
- 代理人：陶紅
- 類別：發明專利
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,附圖說明,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
實體癌，特別是子宮癌、胃癌、大腸癌和頭頸部癌，通過局部引流淋巴結轉移，是主要的轉移途徑之一。實體癌即使在發病早期，也有10％-25％的患者存在局部淋巴結轉移。Okamoto等對200例胃癌患者作胃廣泛切除術和淋巴結清掃術發現：沒有淋巴結轉移的患者5年生存率為93.1％，有1-3個淋巴結轉移的為71.9％，有4-9個淋巴結轉移的為36.1％，有9個以上淋巴結轉移的僅為19.2％。
2002年前癌症的外科治療的最佳方式是將癌原發灶和存在癌轉移的區域淋巴結完全切除。可是，淋巴結通常隱匿在脂肪組織中，與大血管伴行，在血染術野中徹底清除這些引流的淋巴結，常常是非常困難的。而且，器官的上部和下部的淋巴引流也不相同，因此，清掃淋巴結的範圍與癌灶的部位有關，如果為了徹底清除淋巴結，將不必要清掃的淋巴結也包括在內，導致手術創損過大，手術後患者生存質量明顯下降。而淋巴結清除範圍不徹底，甚至殘留直徑僅為0.3厘米的有癌轉移的淋巴結，都會大大增加癌症局部復發率。在手術操作過程中，即使是施術者特別謹慎小心，也可能造成腫瘤微塊脫落，進入局部淋巴組織。另外，手術時間延長，也可能增加手術中癌轉移的機率。而局部復發正是導致早、中期實體癌不良預後的最主要因素之一。因此，如能在手術中使用活體淋巴結染色示蹤，幫助醫生徹底清除淋巴結，是提高惡性腫瘤治療效果的關鍵。
二十世紀80年代初期，日本製備了粒徑40微米左右的活性炭混懸注射液，由於活性炭顆粒可被淋巴結吸收，在光學顯微鏡下可看到淋巴結中有吞噬了大量活性炭顆粒的吞噬細胞，從而間接使淋巴結染黑。由於活性炭粒徑較大，在淋巴指向性和示蹤速度方面不令人滿意需要改進。
隨著技術進展，1985年日本推出了採用40號碳黑製備的碳黑混懸注射液（CH40），比初期活性炭混懸注射液試驗品粒徑減小，淋巴指向性和示蹤速度都明顯提高。加之使用了粒子分散穩定劑，使CH40的混懸性能更加穩定。手術中淋巴示蹤時間明顯加快，淋巴清掃時間明顯縮短，清除淋巴結數量明顯增加，減少了醫務人員的勞動強度和病人的痛苦，提高了癌腫淋巴結的清除率，增加了病人的生存質量和生存時間。使手術者在術中很容易用肉眼觀察到被示蹤劑間接染黑的引流淋巴結，即使是很小（1-3毫米直徑）的淋巴結，肉眼也容易判別，使淋巴結摘除的數量大為增加，而且可以縮短手術時間，降低復發率，提高生存率，是惡性腫瘤外科治療方法學上又一進步。
納米炭混懸注射液中的納米炭為粒徑在納米範圍內的超微炭顆粒，而淋巴系統具有吞噬微小異物的特性，將納米炭混懸注射液注射到局部組織後，巨噬細胞迅速吞噬這些超微炭顆粒，進入引流淋巴管和淋巴結，使其滯留大量的超微炭顆粒而染成黑色，從而實現了腫瘤區域淋巴結的活體染色，起到淋巴示蹤的作用。另外，納米炭有較強的吸附能力，能可逆吸附氨甲喋啉、絲裂黴素和平陽黴素等化療藥物，因此具有作為淋巴化療定向載體的潛能。日本使用吸附了絲裂黴素的炭黑混懸注射液治療胃癌淋巴結轉移，取得了提高生存率的療效。
截至2002年5月，在實體癌治療中使用炭黑混懸注射液指導淋巴清掃手術在日本得到廣泛套用，使用該藥接受淋巴結清掃手術的患者超過50000例；美國、義大利等國也發表了臨床套用的研究報告。國內李端武等報導了套用日本研製的炭黑混懸注射液（CH40）用於胃癌、口腔鱗癌淋巴清掃手術。別志強報導了B超引導下胃壁穿刺注墨指導胃癌清掃手術。結果顯示清除淋巴結顯著高於對照組（P＜0.05＝且無明顯不良反應）。
但日本用40號炭黑生產炭黑混懸注射液採用的分散技術——三輥碾磨技術研磨分散時間長達100小時，設備的生產效率低下。而且，長時間的對組合物成分進行研磨分散，有以下幾個內在的缺陷：
1、組合物中的PVP是一種線狀高分子，在混懸液中起分散穩定劑的重要作用，而三輥研磨是一種高剪下力的研磨分散設備，在長時間高剪下力的作用下，PVP分子斷裂增多，分子量減小；使其分散穩定劑的作用下降，對混懸液的長 期穩定性產生不良影響。
2、無論三輥研磨設備採用何種研磨分散介質，在長時間高剪下力研磨分散下均能使研磨分散介質磨蝕損耗，磨蝕掉的分散介質微粒混入混懸液中，使混懸液中其雜質含量超標，而且，也可能影響混懸液的長期穩定性。
發明內容
專利目的
《一種納米炭混懸組合物的製備方法》提供了一種納米炭混懸組合物，該納米炭混懸組合物含納米炭、聚乙烯吡咯烷酮、生理鹽水和pH調節劑。該發明進一步提供了製備納米炭的工藝技術。2002年前文獻報導的的活性炭顆粒混懸注射液（activated carbon particle suspension injection簡稱CH40）是採用日本三菱化學株式會社生產的精細化工產品40號炭黑製備的。該專利發明人考慮到炭黑為化工產品，所含的灰份和重金屬與注射劑的要求有一定差距。另外，炭黑由於生產原料和生產方法，殘留有微量脂溶性物質。為達到藥用要求，我們採用40號炭黑為化學原料，經過乙酸乙酯脫脂，酸洗鹼洗降低灰分和重金屬，然後大量水洗去酸、鹼，製成純化的納米炭，作為製造納米炭混懸注射液的原料藥。
技術方案
《一種納米炭混懸組合物的製備方法》更進一步提供了兩種將納米炭組合物研磨分散成混懸液的製備工藝方法，分別為振動磨研磨分散製備工藝技術和球磨研磨分散製備工藝技術。都能夠使該組合物分散成粒徑集中在50～100納米、平均粒徑小於200納米的混懸液。其中振動磨研磨分散技術，克服了2002年5月之前的技術所需研磨分散時間過長（80～100小時以上）的缺點，使分散時間大大縮短，在15分鐘內均勻分散，達到要求的粒徑。
該專利發明人採用正交試驗的方法，對研磨時間、物料裝量和介質填充量進行多因素考察，找出最佳工藝條件。該專利發明人根據實驗結果確定每1000毫升納米炭混懸組合物中含納米炭為2.5-200克，最佳為50克；聚乙烯吡咯烷酮為2-200克，最佳為20克；枸櫞酸鈉溶液pH值為6.0-8.0，最佳為6.8-7.4；生理鹽水加足至1000毫升。聚乙烯吡咯烷酮的K值可以是K15、K20、K50或其它K值，最好是K30。水可以是水或水溶液，最好是生理鹽水。
納米炭組合物是一種局部注射用混懸液，注射到局部後，其酸鹼度將明顯 影響與局部組織的相容性。pH過高或過低，都會對組織產生明顯的刺激性，引起注射局部劇烈疼痛、酸灼傷或鹼蝕傷。更嚴重的是不適宜的pH將影響淋巴管內皮細胞的功能，例如低pH可以使淋巴管內皮收縮，阻礙納米炭顆粒進入淋巴管，達不到淋巴示蹤的效果。低pH還影響淋巴管內巨噬細胞的生理功能，使其不能吞噬納米炭顆粒，也延緩了納米炭組合物的示蹤速度。因此，為了減小局部注射的刺激性，不影響局部毛細淋巴管和巨噬細胞的生理功能，儘量使pH值接近人體組織間液的pH值，才能使該納米炭組合物達到最適宜的淋巴示蹤性能。pH調節劑可以是任何可以調節pH的化學物質，最好是枸櫞酸鈉。
納米炭混懸組合物的製備方法，首先稱取聚乙烯吡咯烷酮K3050克，溶解於300毫升生理鹽水中；再稱取納米炭20克，攪拌下加入聚乙烯吡咯烷酮溶液中，再繼續加入生理鹽水至1000毫升；加入裝有振動研磨分散介質的振動磨中；室溫下振動分散15分鐘；用1摩爾/升枸櫞酸鈉調節pH至6.0～8.0。
該專利發明人在納米炭混懸組合物製備工藝中創造性地採用振動磨分散方法，振動磨和三輥研磨兩種方法相比較，由於振動磨中磨輥數目數倍於三輥研磨，且振動磨輥間的間距可以根據物料自適應調整，剪下力適中，適合於該發明中納米炭混懸組合物的分散，可在較短的時間內達到所需的分散程度。正是其分散效率高，達到同樣要求的分散過程的時間可以非常短，這樣自然減少了分散過程對PVP的破壞，PVP的斷裂減少；同樣的原因也相應減少了研磨分散介質的磨蝕損耗和磨蝕掉的分散介質微粒混入混懸液中而降低混懸液的質量。
而球磨和三輥研磨兩種方法相比較，由於球磨是靠磨中球形介質互相碰撞和打擊對物料產生分散作用，由於其接觸時間短剪下力小，在同樣的分散時間下，球磨分散對PVP的破壞和磨蝕掉的分散介質和三輥研磨要低。
附圖說明
圖1納米炭純化工藝流程圖；
圖2納米炭混懸組合物的製備工藝流程圖。
權利要求
1、一種納米炭混懸組合物，該組合物含納米炭、聚乙烯吡咯烷酮、水和pH調節劑。
2、根據權利要求1所述的納米炭混懸組合物，該組合物的組成為每1000毫升納米炭混懸組合物中含納米炭為2.5-200克，最佳為50克；聚乙烯吡咯烷酮為2-200克，最佳為20克；枸櫞酸鈉溶液調節pH值為6.5-8.0，最佳為7.0；生理鹽水加足至1000毫升。
3、根據權利要求1或2所述的納米炭混懸組合物，其中的納米碳是由碳黑經過有機溶劑除去脂溶性雜質，乾燥除去有機物殘留；酸洗、鹼洗除去無機雜質；水洗除去酸、鹼和無機物殘留乾燥獲得。
4、根據權利要求1或2所述的納米炭混懸組合物，其中的pH調節劑可以是任何可以調節pH的化學物質，包括枸櫞酸鈉、枸櫞酸、氫氧化鈉、鹽酸、醋酸、酒石酸、乳酸。最適宜的pH調節劑是枸櫞酸鈉。
5、根據權利要求1或2所述的納米炭混懸組合物的製備方法，稱取聚乙烯吡咯烷酮K3050克，溶解於300毫升生理鹽水中；再稱取納米炭20克，攪拌下加入聚乙烯吡咯烷酮溶液中，再繼續加入生理鹽水至1000毫升；加入振動磨中；室溫下振動分散5分鐘；用1摩爾/升枸櫞酸鈉調節pH至6.5～8.0。
6、根據權利要求1或2所述的納米炭混懸組合物的製備方法，稱取聚乙烯吡咯烷酮K3050克，溶解於300毫升生理鹽水中；再稱取納米炭20克，攪拌下加入聚乙烯吡咯烷酮溶液中，再繼續加入生理鹽水至1000毫升；加進球磨中；室溫下球磨分散96小時；用1摩爾/升枸櫞酸鈉調節pH至6.5～8.0。
實施方式
實驗例1
納米炭的純化製備：採用40號炭黑為化學原料，經過乙酸乙酯脫脂，酸洗鹼洗降低灰分和 重金屬，然後大量水洗去酸、鹼，製成純化的納米炭，作為製造納米炭混懸注射液的原料藥。對980101批號樣品純化前後的檢測結果見表1。表明用乙酸乙酯脫酯及酸洗鹼洗可明顯降低炭黑的脂溶性物質、灰分和重金屬的含量，純化前後該品粒徑未發生變化，形態呈細粒狀，見較細的顆粒呈圓狀，較粗的顆粒呈現出由細小顆粒粘附形成。細小顆粒約30納米至70納米，較粗顆粒可達100納米左右。該製備工藝方法簡單易行，收率高，質量穩定。
檢測項目 | 洗脫前 | 洗脫後 |
粒徑 甲苯抽提透光率（%） | <100納米 99.37 | <100納米 100.04 |
灰分（％） | 2.0 | 0.4 |
重金屬（ppm） | 30 | <10 |
納米炭純化工藝流程圖參見說明書附圖1
納米炭純化工藝操作步驟：
1、乙酸乙酯脫脂
稱取40號炭黑80克置於燒瓶中，加300毫升乙酸乙酯。加熱回流1小時，過濾，濾渣重複處理1次，真空乾燥2小時，得粗品73.00克，收率為91.02％，甲苯抽提物透光率為100.04％。
批號 | 投料量（克） | 得量（克） | 收率（%） | 透光率（%） |
980101 | 80.0 | 73.0 | 91.02 | 100.04 |
980102 | 80.0 | 78.9 | 96.81 | 100.03 |
980103 | 80.0 | 79.0 | 96.33 | 100.04 |
2、酸洗鹼洗
將上述粗品73克置於燒瓶中，加10％硝酸300毫升，室溫攪拌2小時，過濾，濾後用去離子水洗至中性。加0.1摩爾/升氫氧化鈉300毫升，室溫攪拌1小時，過濾，濾後用去離子水洗滌至中性，120℃乾燥5小時，得納米炭樣品69.10克，收率94.66％，全檢合格。
批號 | 投料量（克） | 得量（克） | 收率（％） | 質量 |
980101 | 73.0 | 69.1 | 94.66 | 全檢合格 |
980102 | 78.9 | 75.3 | 95.46 | 全檢合格 |
980103 | 79.0 | 76.3 | 96.54 | 全檢合格 |
結論：40號炭黑國內有大量進口，原料易得，從試生產三批樣品的結果得知，該純化工藝收率平穩，質量穩定，操作簡單易行，可用於生產。
實驗例2
納米炭混懸組合物中納米炭含量的確定：將納米炭混懸注射液注射到腫瘤局部後，對區域引流淋巴結的染色示蹤能力，在一定範圍內與納米炭的含量正相關。為了考察混懸液納米炭含量對其示蹤作用的影響，特配製不同濃度的納米炭混懸液，用小白鼠作淋巴染色試驗。
試驗方法：
1、將納米炭混懸液中納米炭含量分別配製為不同濃度，即2.5毫克/毫升、12.5毫克/毫升、50毫克/毫升和75毫克/毫升備用。
2、取健康ICR小鼠160隻，雌雄各半，均分16組，每組10隻。用50微升微量注射器，從小鼠右後腳墊皮下注射不同劑量的納米炭組合物混懸液，在給藥後1、2、4、8分鐘，分別將各組10隻小白鼠斷頸處死，肉眼觀察後腿彎部淋巴結、髂淋巴結和腹主動脈旁淋巴結的染黑程度。黑染程度記分標準是：0分為淋巴結顏色無改變，0.5分為淋巴結竇部染成灰色，或者部分黑染，1.0分為整個淋巴結黑染或邊緣竇部染黑。
3、比較得分，確定最佳染色的納米炭濃度。
給藥後不同部位淋巴結染黑程度（分值）* | ||||||||||||||
組別 | 劑量 （毫克/千克） | 動物數 （只） | 後腿彎淋巴結骼淋巴結 腹主動脈旁淋巴結 注射後（分鐘） | |||||||||||
/ | / | / | 1 | 2 | 4 | 8 | 1 | 2 | 4 | 8 | 1 | 2 | 4 | 8 |
納米炭混懸組合物 | 25 | 40 | 3 | 45 | 6 | 7 | 20 | 3 | 4 | 4 | 0 | 0 | 2 | 3 |
125 | 40 | 10 | 10 | 10 | 10 | 15 | 10 | 10 | 10 | 5 | 65 | 7 | 75 | |
50 | 40 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | |
75 | 40 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | |
小鼠皮下注射試驗發現，當注射劑量為0.02毫升/只的情況下，使用濃度為2.5毫克/毫升納米炭的炭懸液時，對第一級的區域淋巴結開始染色，呈現淡灰色，隨著納米炭劑量增加，染色範圍和程度開始增加，當使用濃度為50毫克/毫升納米炭的炭懸液，可以很好染色腫瘤區域引流淋巴結，再增大劑量時，染色程度無明顯增加。因此，確定該品的規格為每支1毫升，含納米炭50毫克，劑量適中，合理，便於臨床使用。
實驗例3
納米炭混懸組合物中PVP含量的確定：在納米炭混懸組合物中，PVP作為納米炭的分散穩定劑，對混懸液的穩定性起著關鍵作用。PVP含量過小，混懸液的穩定性不好，PVP含量過大，雖然對人體無害，但導致混懸液粘度增加，影響混懸液的淋巴示蹤性能。因此，對納米炭組合物混懸液中的PVP含量作了研究。
實驗方法：納米炭5克，PVP5～40毫克，生理鹽水適量，組合見表5。
組合 | 納米炭（克） | PVP（克） | 生理鹽水（毫升） | 研磨分散時間（分鐘） | 平均粒徑（納米） |
1 | 5 | 0.5 | 100 | 5 | 590 |
2 | 5 | 1 | 100 | 5 | 270 |
3 | 5 | 2 | 100 | 5 | 157 |
4 | 5 | 4 | 100 | 5 | 162 |
使用BFM-6振動磨（濟南倍力粉技術工程有限公司），納米炭和水的量不 變，研磨分散時間也不改變，只改變PVP的含量，使用Mastersizer-2000型雷射粒度儀測量粒徑，結果發現在納米炭濃度為50毫克/毫升時，PVP濃度為20毫克/毫升的納米炭組合物混懸液的納米炭的平均粒徑為最小。因此，當納米炭濃度為50毫克/毫升時，確定PVP濃度為20毫克/毫升。
實驗例4
納米炭混懸液pH值的確定：為了考察混懸液pH值對其示蹤作用的影響，特配製不同pH值的納米炭混懸液，用小白鼠作淋巴染色試驗。
試驗方法：
1、pH調節劑：1摩爾/升枸櫞酸鈉、1摩爾/升枸櫞酸、1摩爾/升氫氧化鈉溶液、0.5摩爾/升鹽酸、1摩爾/升醋酸、1摩爾/升酒石酸、1摩爾/升乳酸。將納米炭混懸液（調節前pH值為4.6～5.4，呈酸性）分別調節為不同pH值備用。結果發現採用1摩爾/升枸櫞酸鈉調節pH值最佳。
2、取健康ICR小鼠70隻，雌雄各半，均分7組，每組10隻。用50微升微量注射器，從小鼠右後腳墊皮下注射，劑量為50毫克/千克，在給藥後8分鐘，將各組小白鼠斷頸處死，肉眼觀察腹主動脈旁淋巴結的染黑程度。黑染程度記分標準是：0分為淋巴結顏色無改變，0.5分為淋巴結竇部染成灰色，或者部分黑染，1.0分為整個淋巴結黑染或邊緣竇部染黑。3、比較得分，確定最佳染色的pH值。
pH分組 | 3.0 | 5.0 | 6.0 | 6.5 | 7.0 | 75 | 8.0 | 9.0 | 10.0 |
總分 | 1.0 | 4.5 | 7.0 | 9.0 | 10.0 | 9.5 | 9.0 | 3.0 | 1.0 |
從以上結果可以看出，當混懸液pH在6.5～8.0時，其示蹤性能好，其中最好為pH7.0。因此確定最佳pH值為6.5-8.0。
實驗例5
使用振動磨研磨分散製備工藝技術製備納米炭組合物混懸液：為了考察研磨工藝對納米炭粒度及分散的影響，選定研磨時間（A），物料裝量（B）和介質填充量（C）為影響因素，研磨後的平均粒度為評價指標，作正交試驗。
實驗方法：按照擬訂的處方配製納米炭溶液，根據正交試驗設計的條件，放入振動磨中濕法研磨。 正交試驗表頭及試驗結果分別見表7-1和表7-2
水平 | 因素 | |||
A（分鐘） | B | C | D（空白） | |
1 | 3 | 1/6 | 80% | / |
2 | 5 | 1/8 | 70% | / |
3 | 10 | 1/10 | 60% | / |
註：A為研磨時間、B為物料占整個磨粉機容積的比例、C為研磨介質占整個磨粉機容積的百分比。
試驗號 | A | B | C | D | 平均粒徑 （納米） |
1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 220 |
2 | 2 | 2 | 2 | 1 | 238 |
3 | 3 | 3 | 3 | 1 | 234 |
4 | 1 | 3 | 2 | 2 | 269 |
5 | 2 | 1 | 3 | 2 | 235 |
6 | 3 | 2 | 1 | 2 | 308 |
7 | 1 | 2 | 3 | 3 | 310 |
8 | 2 | 3 | 1 | 3 | 169 |
9 | 3 | 1 | 2 | 3 | 151 |
I | 799 | 606 | 697 | 692 | / |
II | 642 | 856 | 658 | 812 | / |
III | 693 | 672 | 779 | 630 | / |
R | 157 | 250 | 121 | 182 | / |
從以上結果可以看出，影響研磨效果的因素大小分別為B（物料裝量）、A（研磨時間）、C（介質填充量）。最佳研磨分散條件為B1A2C2，即振動磨內物料裝量為磨容量的1/6，介質填充量為70％，研磨分散時間為5分鐘。
實驗例6
使用球磨研磨分散製備工藝技術製備納米炭組合物混懸液：以研磨時間A、磨介填充率B、轉速率C為影響因素，每個因素各取3個水平，以研磨後的平均粒度為評價指標，作正交試驗。方法：按處方配製納米碳混懸液，照正交設計中的條件分別加進球磨機中濕法研磨，進行試驗。正交試驗表頭及結果分見表8-1和表8-2
水平 | 因素 | |||
A（hr） | B | C | D（空白） | |
1 | 48 | 35% | 70% | / |
2 | 72 | 40% | 75% | / |
3 | 96 | 45% | 80% | / |
試驗號 | A | B | C | D | 平均粒徑 （納米） |
1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 634 |
2 | 2 | 2 | 2 | 1 | 284 |
3 | 3 | 3 | 3 | 1 | 241 |
4 | 1 | 3 | 2 | 2 | 435 |
5 | 2 | 1 | 3 | 2 | 357 |
6 | 3 | 2 | 1 | 2 | 342 |
7 | 1 | 2 | 3 | 3 | 468 |
8 | 2 | 3 | 1 | 3 | 343 |
9 | 3 | 1 | 2 | 3 | 315 |
I | 1537 | 1306 | 1319 | 1159 | / |
II | 984 | 1094 | 1034 | 1134 | / |
III | 898 | 1019 | 1066 | 1126 | / |
R | 639 | 287 | 285 | 33 | / |
從以上結果可以看出，影響研磨效果的因素大小分別為A（研磨時間）、B（磨介填充量）、C（轉速率）。最佳研磨條件為A3B3C2，即球磨內磨介填充量為磨容量的45％，轉速率75％，研磨分散時間為96小時。
製備實施例納米炭混懸組合物的製備
1、工藝流程參見說明書附圖2
2、生產工藝
研磨分散設備採用BFM-6振動磨（濟南倍力粉技術工程有限公司）。所用的西林瓶、研磨材料等滅菌處理後備用。根據上述實驗例6的結果選定研磨分散時間為5分鐘。稱取處方量的PVPK30，溶解於300毫升生理鹽水中；又稱取處方量的納米炭，攪拌下加入PVP溶液中，再繼續加入生理鹽水至1000毫升，備用。將振動磨內磨粉介質填充量定70％，取配置好的納米炭混懸液（體積為振動磨容積的1/6，約800毫升）加入磨內，研磨5分鐘。
用1摩爾/升枸櫞酸鈉調節pH至6.0～8.0；分裝：1毫升/瓶。加塞，壓鋁蓋，滅菌，檢漏，質檢，包裝。連續製備3批納米炭混懸注射液980601，980602，980603，各批投料量，外觀性狀，平均粒徑，pH值，衛生學檢驗，收率和結論等檢查項目，均符合制定的質量標準。見表9。
投料量 （克） | 外觀性狀 | 平均粒徑（納米） | pH值 | 無菌 | 收率 | 結論 | |
980601 | 32.08 | 黑色混懸液 | 150 | 7.4 | 合格 | 60.94% | 合格 |
980602 | 32.10 | 黑色混懸液 | 160 | 7.5 | 合格 | 62.50% | 合格 |
980603 | 32.08 | 黑色混懸液 | 160 | 7.5 | 合格 | 62.81% | 合格 |
榮譽表彰
2015年11月27日，《一種納米炭混懸組合物的製備方法》獲得第十七屆中國專利獎優秀獎。
