《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》是廣東眾生藥業股份有限公司於2010年7月27日申請的發明專利，該專利的申請號為2010102375297，公布號為CN101904948A，公布日為2010年12月8日，發明人是龍超峰、謝稱石、陳木洲、趙希平。
《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》是將傳統眾生丸製劑經兩次提取、濃縮後製成浸膏，將物料溫度控制在40-80℃，採用真空帶式乾燥機將浸膏製成乾膏粉；將乾膏粉、膽南星粉、人工牛黃與輔料混合均勻後，採用壓製法工藝制丸，替代了傳統塑製法制丸的生產工藝。新眾生丸整個製備過程溫和，使得中藥製劑中的主要活性成分保留率提升30％-294％，生產過程能耗降低50-80％，生產周期縮短60％以上；該發明方法解決了傳統塑製法丸型大小不一的缺陷，活性成分顯著提高，溶散時限顯著縮短，使新眾生丸製劑的藥物療效顯著提高；新眾生丸的製備方法提高了勞動生產率、降低能耗、減少生產過程污染物排放，符合我國“節能減排增效”的政策。
2014年11月6日，《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》獲得第十六屆中國專利優秀獎。
基本介紹
- 中文名：一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法
- 公布號：CN101904948A
- 公布日：2010年12月8日
- 申請號：2010102375297
- 申請日：2010年7月27日
- 申請人：廣東眾生藥業股份有限公司
- 地址：廣東省東莞市石龍鎮西湖工業區信息產業園
- 發明人：龍超峰、謝稱石、陳木洲、趙希平
- 分類號：A61K36/86（2006.01）I、A61K9/28（2006.01）I、A61K47/38（2006.01）I、A61P11/00（2006.01）I、A61P11/04（2006.01）I等
- 類別：發明專利
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,改善效果,附圖說明,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
眾生丸是廣東眾生藥業股份有限公司的獨家品種之一，執行部頒標準眾生丸（WS3-B-2880-98），處方由板藍根、柴胡、赤芍、當歸、虎杖、黃芩、蒲公英、玄參、紫花地丁、防風、白芷、崗梅、膽南星、夏枯草、天花粉、人工牛黃、皂角刺等十七味藥材，功能主治為清熱解毒，活血涼血，消炎止痛。主要用於治療上呼吸道感染，急、慢性咽喉炎，急性扁桃腺炎，瘡毒等症。
上呼吸道感染是指自鼻腔至喉部之間的急性炎症的總稱，是最常見的感染性疾病。包括鼻、咽、喉的感染，臨床上一般稱為上感。上呼吸道不同部位的感染，臨床的表現並不盡相同，主要包括普通感冒，俗稱“傷風”，病毒性咽炎、喉炎、支氣管炎，皰疹性咽峽炎，咽結膜熱，細菌性咽-扁桃體炎等。90％左右的上呼吸道感染由病毒引起，細菌感染常繼發於病毒感染之後。該病四季、任何年齡均可發病，通過含有病毒的飛沫、霧滴，或經污染的用具進行傳播。常於機體抵抗力降低時，如受寒、勞累、淋雨等情況，原已存在或由外界侵入的病毒或/和細菌，迅速生長繁殖，導致感染。
上呼吸道感染的治療分為西醫療法和中醫療法，西醫療法需區分細菌性感染和病毒性感染，對症下藥，通常細菌性感染用青黴素或其它抗生素。但大多數急性上呼吸道感染為病毒感染，抗生素非但無效，還可引起機體菌群失調，有利於病毒繁殖，必須避免濫用。病毒性感染目前尚無特殊的抗病毒藥物，多需對症處理、休息、忌煙、多飲水、保持室內空氣流通、防止繼發細菌感染為主。對於發熱或病情較重的患者，可口服解熱鎮痛劑及減少鼻咽充血和分泌物的抗感冒複合劑或中成藥。中醫療法多採用辛涼解表，清熱解毒法。臨床上已有數十種治療上呼吸道感染的中成藥問世，如眾生丸、九味羌活丸、感冒清熱顆粒、柴胡注射液、銀翹解毒丸、雙黃連合劑、銀黃顆粒及板藍根顆粒等。
眾生丸藥效的發揮依賴於其處方中各藥材所含的活性成分及其傳統中醫理論的組方、先進的製備工藝及適宜的輔料加工製成製劑共同作用。處方中各藥材所含的活性成分及相關的藥理作用文獻資料如下：
板藍根含有生物鹼成分色胺酮對羊毛狀小孢子菌、斷髮癬菌、石膏樣小孢子菌、紫色癬菌、石膏樣癬菌、紅色癬菌、紫狀表皮癬菌等7種皮膚病真菌有較強的抑菌作用。板藍根中的4（3H）-喹唑酮具有抗病毒作用，能抑制流感病毒、柯薩奇病毒的活性，還可顯著促進脾細胞增殖及刀豆蛋白誘導的淋巴細胞增殖。板藍根中的大黃酚具有抗菌、瀉下等作用。另外，板藍根中的苯甲酸類物質如丁香酸等具有較強的抗內毒素活性。
柴胡具有顯著的抗炎作用，柴胡皂苷和揮髮油是其抗炎的有效成分。柴胡皂苷的抗炎作用最強，它對多種炎症過程包括炎性滲出、毛細血管通透性升高、炎症介質釋放、白細胞遊走、結締組織增生和多種變態反應炎症均有顯著抑制作用。柴胡皂苷還具有鎮痛作用，有報導其能抑制疼痛時磷酸組織胺5-羥色胺的釋放，明顯減少醋酸引起的小鼠扭體反應。另外，柴胡揮髮油還具有解熱作用。
芍藥苷是赤芍的活性成分，主要存在於赤芍的根皮部。芍藥苷具有顯著的鎮痛、鎮靜、抗驚厥作用。赤芍浸膏能拮抗士的寧所引起的驚厥。小鼠腹腔注射有顯著的鎮痛效果，鎮痛作用可能與嗎啡受體無關。能延長球已烯巴比妥鈉對小鼠的睡眠時間，對五甲烯四氮唑所致的驚厥有拮抗作用。芍藥苷對正常小鼠體溫有降低作用，對人工發熱的小鼠有導熱作用。芍藥苷對角叉菜膠和右旋糖酚所致的大鼠足踝腫有抑制作用，也可抑制醋酸扭體反應，對大鼠佐劑性關節炎有防治作用，對大鼠應激潰瘍有預防作用和抑制胃液分泌的作用。白芍煎劑對某些致病性細菌和真菌有抑制作用。
阿魏酸是當歸的有效成分之一。其對二甲苯所致的小鼠耳殼腫脹和醋酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性增高以及組胺引起的大鼠皮膚毛細血管通透性升高，對角叉菜膠、蛋清和甲醛所致的大鼠足跖腫脹均有明顯的抑制作用；摘除雙惻腎上腺後其抗炎作用仍然存在。阿魏酸能顯著抑制大鼠棉球肉芽組織增牛、降低炎性組織中PGE的釋放量，還能抑制角叉菜膠所致炎性滲出，但減少滲出液中白細胞數量。阿魏酸對細菌N-乙醯轉移酶有較強抑制作用，同時還可使干擾素-8含量降低，抑制黃嘌呤氧化酶活性，使得阿魏酸抗菌、抗病毒作用表現為廣譜。藁本內酯是當歸的另一有效成分之一，其對角叉菜和右旋糖苷誘導的足腫脹、棉球肉芽腫有明顯的抑制作用，並可降低啤酒酵母導致的高熱，藁本內酯的抗炎，解熱作用均具有劑量依耐性。
白藜蘆醇苷（又名虎杖苷）和大黃素是虎杖藥材中主要的活性成分，其含量高低是評價藥材質量的重要指標。其中的大黃素等醌類化合物具有抗菌活性，大黃素，大黃素葡萄糖甙及白藜蘆醇苷等對金黃色葡萄球菌，肝炎雙球菌有抑制作用。大黃素等蒽醌類物質具有抗病毒作用，可抑制B型肝炎抗原陽性，治療慢性肝炎，急性黃疸性肝炎。
黃芩苷是黃芩的活性成分，對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、流感桿菌、枯草桿菌、大腸桿菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎球菌等常見病原菌均有不同程度的抑菌和殺菌作用，且抗菌譜廣，抗菌作用強。研究表明黃芩苷對發熱大鼠有明顯的解熱作用，並具有一定的量效關係。黃芩苷有明顯的抑制內毒素性發熱的作用，還可通過抑制下丘腦中PGE和cAMP含量升高而發揮其解熱作用。
蒲公英含有的咖啡酸，具有良好的抗菌作用，特別能有效抑制金黃色葡萄球菌和皮膚真菌。並有輕瀉和健胃的功效。蒲公英煎劑對大腸桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、弗氏痢疾桿菌、副傷寒桿菌甲、白色念珠菌等均有一定抑制作用。
玄參為常用中藥，具有涼血滋陰、瀉火解毒之功效，用於熱病傷陰、舌絳煩渴、溫毒發斑、津傷便秘、骨蒸勞嗽、目赤、咽痛、瘰癧、白喉、癰腫瘡毒等症。有文獻報導玄參中的哈巴俄苷具有抗慢性炎症、降壓、鎮痛、解痙、抗B肝病毒以及免疫促進作用。哈巴俄苷可促進陰虛小鼠脾淋巴細胞增殖，誘導脾淋巴細胞產生IL-2，能降低陰虛小鼠血漿中cAMP的含量，並能調整cAMP/cGMP比值至正常對照組水平，使抑制的免疫功能得以恢復。
有報導紫花地丁對金葡菌、表皮葡萄球菌、腐生菌、糞腸球菌、大腸埃希菌、變形桿菌等有較強的抑菌作用，並發現紫花地丁和蒲公英按質量比1:4配伍使用時體外抗菌活性較強，對4種革蘭氏陽性球菌和4種革蘭氏陰性桿菌均有較好的抑菌作用，且對大腸埃希氏菌和克雷伯氏菌表現出一定的殺菌作用。紫花地丁煎劑對二甲苯所致的小白鼠皮膚毛細血管通透性亢進有顯著的抑制作用，而且對小鼠棉球肉芽增生以及大白鼠甲醛性足蹠腫脹均有很強的抑制作用。體外試驗證明，紫花地丁提取液對細菌內毒素有拮抗作用。紫花地丁中的秦皮乙素對病原微生物具有抑制作用，對腸道中的O157大腸桿菌的繁殖具有明顯的抑制作用，對自由基清除作用明顯。腹腔注射秦皮乙素對對大鼠蛋清、右旋糖酐足腫脹有抑制作用。
防風味辛、甘，性溫，具有解表祛風、勝濕止痙的功能。有文獻報導防風中活性成分升麻苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷具有較好的解熱，鎮痛、抗炎等藥理活性。防風香豆素類成分如花椒毒素，東莨菪素，歐前胡素及香豆內酯等具有抗菌，抗炎，止痛和祛痰等活性。
東莨菪素為白芷的有效成分之一，具有抗炎、祛風、止痛和祛痰作用。白芷總揮髮油能通過對單胺類和肽類2種神經遞質的調節而發揮鎮痛作用。歐前胡素是白芷中主要的香豆素類生物活性物質，相關研究表明歐前胡素有抗痙攣、抗炎鎮痛、抗癌、抗HIV、增強免疫等作用。
崗梅為兩廣地區的藥材，有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功，民間多用於涼茶。現代藥理學研究表明：崗梅在體外試驗中對金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌有抑制作用；可增加豚鼠離體心臟冠脈流量和心收縮力；對垂體後葉素所致家兔急性心肌缺血T波改變有保護作用。崗梅水提取物能明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足跖腫脹及炎性組織中PGE的生成，減少大鼠棉球肉芽腫的形成，同時對醋酸所致小鼠毛細血管通透性增高具有顯著抑制作用。
夏枯草為唇形科多年生草本植物，夏枯草的果穗所含的化學成分主要有夏枯草甙、咖啡酸、生物鹼和水溶性鹽類，其中甙元為齊墩果酸及熊果酸等，性味苦辛而寒，具有清肝火，散鬱結之功效。體外抗結核分支桿菌的試驗顯示夏枯草有一定抗菌作用，其機制可能是夏枯草甙和揮髮油所起的抗菌活性。夏枯草的化學成分中，以熊果酸的抗炎活性最強。
天然的牛黃來源稀少，國內大部分廠家生產含有牛黃的製劑均採用人工牛黃替代。它由貝斯素、膽酸、豬去氧膽酸、膽紅素、膽固醇、無機鹽等配製而成。具有清熱、解毒、祛痰、定驚之功效，用於熱痰譫狂，神昏不語，小兒急熱驚風，咽喉腫痛；外用治療疔疽，口瘡等。人工牛黃中膽酸是一種具有類固醇結構的有機酸，能乳化脂肪，促進其消化作用，其具有解熱、抗炎、抗過敏、抗病毒等作用，此外還很強的溶血作用。膽紅素則具有中樞鎮靜、抗驚厥、解熱、降壓、抗病毒、抗癌和促紅細胞新生等作用，效果明顯。
由上述處方各藥材活性成分的綜述資料可見，眾生丸製劑中各活性成分含量的高低將直接影響到眾生丸的療效，最大限度上提高製劑中的活性成分極為重要。眾生丸的質量標準生產工藝將處方中的部分藥材採用傳統的多功能提取罐水煎煮，提取液用三效濃縮器濃縮成浸膏，浸膏用噴霧乾燥器噴霧乾燥成乾膏粉，乾膏粉與膽南星粉、人工牛黃混勻，傳統塑製法工藝制丸，該生產工藝存在明顯缺陷。眾生丸藥材的提取液濃縮成浸膏後，浸膏用噴霧乾燥器噴霧乾燥，噴霧乾燥器進風溫度達200-300℃，浸膏會因乾燥溫度過高，造成提取液中有效成分被破壞，極大的降低了乾膏粉中活性成分的含量，採用此乾膏粉製成的眾生丸製劑，在服用相同劑量眾生丸的前提下，眾生丸的治療效果將大打折扣。另外，採用傳統塑製法制丸的生產工藝需要經過物料混合、制丸塊、制丸條、分粒、搓圓、熱風乾燥等工序，製備工藝繁瑣、濕丸乾燥溫度高及時間長（將導致活性成分的損失、丸溶散時限的延長）、機器設備利用率低，勞動生產效率也低，生產過程粉塵易飛揚造成污染物排放增加，且傳統塑製法製備的眾生丸丸型大小不一，難以保證眾生丸療效的穩定性。
發明內容
專利目的
《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》的目的之一是提供一種新眾生丸中藥製劑的處方組成；
該發明的目的之二是提供一種新眾生丸的製備方法；
該發明的目的之三是提供一種新眾生丸的質量控制方法。
技術方案
新眾生丸由蒲公英、紫花地丁、黃芩、崗梅、赤芍、天花粉、玄參、當歸、防風、柴胡、皂角刺、人工牛黃、白芷、膽南星、虎杖、夏枯草、板藍根、羥丙纖維素、微晶纖維素、乳糖、二氧化矽、硬脂酸鎂、包衣材料等23個成分組成。
製備1000丸的新眾生丸，由蒲公英330克、紫花地丁330克、黃芩100克、崗梅130克、赤芍100克、天花粉100克、玄參100克、當歸100克、防風100克、柴胡100克、皂角刺130克、白芷30克、虎杖130克、夏枯草65克、板藍根130克等15味藥材，用多功能提取罐水煎煮二次，第一次加入3～10倍藥材量的水，控制微沸狀態，蒸汽壓力控制在0.04～0.1兆帕，溫度控制在98～101℃，提取2小時，第二次加入2～6倍藥材量的水，控制微沸狀態，蒸汽壓力控制在0.04～0.1兆帕，溫度控制在98～101℃，提取1小時，合併兩次提取液。將提取液過濾後，用三效濃縮器濃縮成浸膏；濃縮時溫度控制在60～85℃，蒸汽壓力控制在0.04～0.12兆帕，真空度控制在0.02～0.09兆帕，濃縮至相對密度為1.25～1.35的浸膏；將浸膏進行真空帶式乾燥成乾浸膏，乾燥時物料溫度控制在40-80℃，真空壓力控制在-0.07兆帕～-0.12兆帕，進料速度控制在10-20升/時，料帶傳送速度控制在20-30厘米/分鐘，優選物料溫度為45-55℃，真空壓力為-0.1MPa，進料速度為15升/時，料帶傳送速度為25厘米/分鐘；乾燥後將乾浸膏粉碎過40-80目，製備出眾生丸乾膏粉，綜合不同批次或產地的藥材重複實驗，眾生丸乾膏粉約160-200克；之後取眾生丸乾膏粉、膽南星粉、人工牛黃與輔料混合均勻後採用壓製法工藝製備新眾生丸：首先將膽南星藥材，粗碎過8～12毫米篩網成粗粒，進行滅菌，滅菌溫度110℃±5℃，滅菌時間40-60分鐘；在溫度70～80℃範圍內沸騰乾燥至水分≤8％，粉碎成細粉；取1/2膽南星粉與乳糖交叉用整粒機在50赫茲下過0.8毫米號篩，然後與剩餘的膽南星粉、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素一起上料至混合機中，預混合20分鐘後將物料放出；取眾生丸乾膏粉，膽南星粉與乳糖、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素的預混合料，二氧化矽、硬脂酸鎂交叉用整粒機在45赫茲下過2.5毫米號篩後一起上料至混合機中，總混30分鐘。之後用高速壓丸機制丸，沖模為球形沖，球形沖模大小為7.0-8.0毫米，素丸的丸重為0.26-0.35克/丸，調整壓力控制素丸的脆碎度在0.3-0.9％、崩解時限在24-34分鐘；所述的新眾生丸的配方為：眾生丸乾膏粉160-200克、膽南星粉30克、人工牛黃20克、羥丙纖維素12.5-50克、微晶纖維素10-37.5克、乳糖10-38.5克、硬脂酸鎂1.25-5克、二氧化矽2.5-5克，製成1000丸新眾生丸素丸，素丸包糖衣或包薄膜衣0.27-0.42克/丸。
新眾生丸的製備方法中，浸膏用真空帶式乾燥機乾燥成乾膏粉，改變了原眾生丸一直採用的噴霧乾燥器噴霧乾燥工藝，使新眾生丸的主要活性成分比原眾生丸平均具有大幅度的提高：秦皮乙素提高178％，咖啡酸提高286％，阿魏酸提高186％，虎杖苷提高30％，黃芩苷提高166％，芍藥苷提高41％，哈巴俄苷提高294％。在生產產能上，真空帶式乾燥機乾膏粉為80～100千克/小時，噴霧乾燥器機乾膏粉為20～25千克/小時，生產能力提高了4倍，生產過程能耗降低50％以上。
新眾生丸的製備方法中，採用壓製法制丸的成型工藝替代傳統塑製法制丸工藝，解決了原制丸工藝存在的缺陷：如工藝步驟多，生產周期長，成本高，效率低；乾燥時間長，不利於中藥成分的穩定；溶散時限長，不利於溶散吸收；表面凹凸不平，丸重差異大，每次服用生藥量不穩定。而新的制丸方法具有以下優點：（1）工藝簡單。制丸過程只有混合、壓丸兩個工序，改變原來塑製法生產工藝需要混合、制丸塊、制丸條、分粒、搓圓、熱風乾燥工序，制丸時間從原來每批生產400萬丸的40小時減少到15小時，縮短生產周期，節能減排，降低成本，提高效率。（2）減少乾燥工序，可以降低能耗，提高生產效率，原塑製法工藝素丸大，需要長時間乾燥，每批乾燥時間達20小時以上。（3）縮短了溶散時限。採用壓製法生產工藝素丸溶散時限從原來塑製法生產工藝60-80分鐘左右縮短到約30分鐘，有利於產品溶散吸收。（4）減少了丸重差異，使眾生丸的質量更加可控，更好保證每次服用生藥量的穩定性。重量差異眾生丸每次的最大服用量1份進行稱重控制，壓製法制丸工藝生產的素丸大小均勻，改變了原來塑製法生產丸重差異較大的缺陷，這樣可使眾生丸的質量更加可控，更好保證每次服用生藥量的穩定性。
原眾生丸質量標準包括3個理化顯色反應和人工牛黃的薄層鑑別，未制訂含量測定項，在目前對藥品質量與安全要求越來越高的環境下，此質量標準已經不能滿足產品質量監控的要求。為此，新眾生丸質量標準刪除了不具有代表性的理化鑑別反應，採用薄層色譜方法鑑別人工牛黃、紫花地丁、赤芍、虎杖等藥材，增加了高效液相色譜法對黃芩中黃芩苷的含量測定，使標準更加完善，產品質量更加穩定可控。
鑒於眾生丸傳統生產工藝存在的明顯缺陷，該發明眾生丸採用真空帶式乾燥機進行浸膏乾燥，浸膏乾燥過程溫和（物料溫度在40-60℃）；加入最適合的輔料及用量與眾生丸的乾膏粉、膽南星粉、人工牛黃混合均勻後壓丸。明顯減少了生產過程物料的加熱時間及顯著降低生產過程加熱的溫度，新眾生丸可使主要成分保留率提升30％或以上，生產過程能耗降低50-80％，生產周期縮短60％以上，最大程度上保留了眾生丸製劑中的活性成分，顯著提高了眾生丸的療效；壓製法成型工藝顯著改善了丸劑傳統成型工藝的缺點，使製備的眾生丸丸型大小均勻，丸間重量差異小，降低了由於服藥丸重差異而引起的療效差異。採用壓製法生產工藝生產的新眾生丸溶散時限從原來60-80分鐘縮短到約30分鐘，縮短了溶散時限，有利於產品的溶散吸收。
噴霧乾燥器噴霧乾燥是用噴霧的方法，使物料成為霧滴分散在熱空氣中，物料與熱空氣呈並流、逆流或混流的方式互相接觸，使水分迅速蒸發，達到乾燥目的。但噴霧乾燥熱效率低（熱效率一般為30-50％）、體積龐大、生產能力低、投資高也是最大缺點。噴霧乾燥熱空氣進口溫度逆流操作時為200-300℃，在中藥浸膏的乾燥過程中易出現粘壁和結塊問題，造成粘壁的主要因素是壁溫高，粘壁的物料大幅度地降低了活性成分的含量。
真空帶式乾燥機是一種連續進料、連續出料形式的接觸式真空乾燥設備，由於物料直接進入高真空度下經過一段時間逐步乾燥（通常是30-60分鐘），乾燥後所得的顆粒有一定程度的結晶效應，同時從微觀結構上看內部有微孔。直接粉碎到所需要的粒徑後，顆粒的流動性很好，可以直接壓片或者灌膠囊，同時由於顆粒具有微觀的疏鬆結構，速溶性極好。而且顆粒的外觀好，對於速溶（沖劑）產品，可以大大提升產品的檔次。真空帶式乾燥機適用於粘性高、易結團、熱塑性、熱敏性的物料，不適於或者無法採用噴霧乾燥的物料採用帶式真空乾燥機是最佳選擇。而且，可以直接將濃縮浸膏送入帶式真空乾燥機進行乾燥無須添加任何輔料，這樣可以減少最終產品的服藥量，提高產品檔次。產品在整個乾燥過程中，處於真空、封閉環境，乾燥過程溫和（產品溫度40-60℃），可以最大限度的得到高質量的最終產品。
《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》新眾生丸（編號：R2）與原眾生丸（編號：R1）進行抗炎、鎮痛、抗菌等實驗比較，結果表明：在抗炎作用方面：R2各劑量組均較R1各劑量組明顯減輕二甲苯致炎小鼠的耳腫脹度，提示眾生丸對二甲苯引起小鼠耳腫脹的抗炎抑制作用，R2有優於R1的趨勢；對減少醋酸所致的小鼠腹腔內炎性物質的滲出，抑制毛細血管通透性增高的抗炎作用，R2有優於R1的趨勢。在鎮痛試驗方面：對延長醋酸致痛小鼠的潛伏期，減少其扭體次數的鎮痛作用，R2有優於R1的趨勢；對增加熱板致痛雌鼠的痛閾提高百分率的鎮痛作用，R2有優於R1的趨勢。在體外抑菌試驗方面：眾生丸對金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球桿菌、傷寒桿菌、綠膿桿菌等常見病原菌有明顯抑制作用，R2的抗菌效應優於R1。在抗炎、鎮痛、抗菌等試驗中，新眾生丸（R2）總體表現優於原眾生丸（R1）。另外，從眾生丸相關活性成分含量測定結果也證實，新眾生丸能更大程度上保留活性成分，對提高眾生丸療效具有積極的效果。
改善效果
《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》採用高效液相色譜法測定新舊兩種眾生丸中活性成分的含量，並結合藥效學試驗比較新舊兩種眾生丸的產品實驗結果，證明新眾生丸具有顯著的改變作用。
下面將通過試驗數據證明該發明具有的積極效果。
第一部分：新眾生丸與原眾生丸的製劑活性成分含量測定比較
採用高效液相色譜法對原眾生丸20批次樣品和新眾生丸14批次樣品進行檢驗，比較兩種眾生丸活性成分的含量。測定結果見表1、表2。
1.眾生丸中秦皮乙素、咖啡酸、阿魏酸、虎杖苷、黃芩苷的含量測定：
照高效液相色譜法（中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID）測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以0.5％甲酸為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為雙波長：在323納米處測定咖啡酸、阿魏酸、虎杖苷、黃芩苷；在353納米處測定秦皮乙素；理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低於5000。
時間（分鐘） | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0～8 | 5 | 95 |
8～11 | 5→12 | 95→88 |
11～30 | 12→24 | 88→76 |
30～75 | 24→49 | 76→51 |
對照品溶液的製備精密稱取黃芩苷、虎杖苷、秦皮乙素、咖啡酸、阿魏酸適量，加流動相使溶解並稀釋，製成以下濃度：黃芩苷、秦皮乙素分別為0.05毫克/毫升，虎杖苷為0.03毫克/毫升，咖啡酸、阿魏酸為0.01毫克/毫升混合對照品溶液。
供試品溶液製備取該品10丸，研細，精密稱取1.0克，精密加入70％乙醇25毫克，稱定重量，超聲處理30分鐘，冷卻，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精取續濾液10毫克，水浴蒸乾，加流動相溶解並稀釋至刻度，濾過，取續濾液，即得。
測定法精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10微升，注入液相色譜儀，測定，即得，見圖1、圖2。
2.眾生丸中芍藥苷、哈巴俄苷的含量測定：
照高效液相色譜法（中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID）測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以水為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為雙波長：在230納米處測定芍藥苷；在280納米處測定哈巴俄苷；理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低於5000。
時間（分鐘） | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0～5 | 15→17 | 85→83 |
5～30 | 17→45 | 83→55 |
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷、哈巴俄苷適量，加70％甲醇使溶解並稀釋，製成以下濃度：芍藥苷為0.02毫克/毫升，哈巴俄苷為0.01毫克/毫升的混合對照品溶液。
供試品溶液製備取該品10丸，研細，精密稱取1.0克，精密加入70％甲醇25毫克，稱定重量，超聲處理30分鐘，冷卻，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10微升，注入液相色譜儀，測定，即得，見圖3、圖4。
批號 | 秦皮乙素 | 咖啡酸 | 阿魏酸 | 虎杖苷 | 黃芩苷 | 芍藥苷 | 哈巴俄苷 |
R1-1 | 0.145 | 0.016 | 未檢出 | 0.114 | 0.895 | 0.435 | 0.019 |
R1-2 | 0.256 | 0.013 | 未檢出 | 0.243 | 0.71 | 0.42 | 0.014 |
R1-3 | 0.347 | 0.022 | 0.009 | 0.407 | 1.028 | 0.924 | 0.035 |
R1-4 | 0.141 | 0.009 | 未檢出 | 0.159 | 0.446 | 0.359 | 未檢出 |
R1-5 | 0.345 | 0.02 | 0.005 | 0.325 | 1.006 | 0.507 | 0.033 |
R1-6 | 0.219 | 0.011 | 未檢出 | 0.205 | 0.435 | 1.025 | 0.014 |
R1-7 | 0.366 | 0.027 | 0.012 | 0.261 | 1.368 | 0.806 | 0.033 |
R1-8 | 0.415 | 0.023 | 未檢出 | 0.204 | 1.193 | 0.995 | 0.025 |
R1-9 | 0.329 | 0.024 | 0.008 | 0.283 | 0.868 | 0.641 | 0.045 |
R1-10 | 0.419 | 0.024 | 0.01 | 0.212 | 1.176 | 0.614 | 0.041 |
R1-11 | 0.33 | 0.019 | 0.006 | 0.166 | 0.939 | 0.555 | 0.042 |
R1-12 | 0.255 | 0.019 | 0.013 | 0.287 | 0.707 | 0.479 | 0.005 |
R1-13 | 0.31 | 0.011 | 0.013 | 0.338 | 0.688 | 0.579 | 0.007 |
R1-14 | 0.245 | 0.019 | 0.012 | 0.346 | 0.59 | 0.588 | 0.011 |
R1-15 | 0.276 | 0.01 | 0.013 | 0.383 | 0.937 | 0.751 | 0.003 |
R1-16 | 0.275 | 0.022 | 0.012 | 0.307 | 0.938 | 0.735 | 0.013 |
R1-17 | 0.427 | 0.04 | 0.017 | 0.201 | 1.214 | 0.968 | 0.013 |
R1-18 | 0.131 | 0.019 | 未檢出 | 0.217 | 0.711 | 0.597 | 0.003 |
R1-19 | 0.13 | 0.044 | 0.008 | 0.211 | 0.665 | 0.921 | 0.007 |
R1-20 | 0.124 | 0.043 | 0.007 | 0.217 | 0.679 | 0.996 | 0.006 |
平均 | 0.274 | 0.022 | 0.007 | 0.254 | 0.860 | 0.695 | 0.018 |
批號 | 秦皮乙素 | 咖啡酸 | 阿魏酸 | 虎杖苷 | 黃芩苷 | 芍藥苷 | 哈巴俄苷 |
R2-1 | 0.9204 | 0.0728 | 0.0234 | 0.2002 | 1.7446 | 0.6578 | 0.091 |
R2-2 | 0.9126 | 0.0754 | 0.0338 | 0.3666 | 2.197 | 0.8242 | 0.104 |
R2-3 | 0.8996 | 0.0728 | 0.0286 | 0.4446 | 2.2282 | 0.7228 | 0.0936 |
R2-4 | 0.3406 | 0.0494 | 0.0156 | 0.2392 | 2.1658 | 1.2792 | 0.0312 |
R2-5 | 0.6344 | 0.0832 | 0.0182 | 0.2886 | 2.3738 | 1.0686 | 0.0234 |
R2-6 | 0.7436 | 0.0936 | 0.0156 | 0.3432 | 2.327 | 1.0894 | 0.039 |
R2-7 | 0.7514 | 0.0962 | 0.0156 | 0.3484 | 2.3686 | 1.0582 | 0.0806 |
R2-8 | 0.7358 | 0.0988 | 0.0156 | 0.3068 | 2.2386 | 0.9984 | 0.0832 |
R2-9 | 0.741 | 0.1014 | 0.0156 | 0.312 | 2.2828 | 0.988 | 0.091 |
R2-10 | 0.8502 | 0.0884 | 0.0182 | 0.429 | 2.3452 | 1.027 | 0.0754 |
R2-11 | 0.8424 | 0.0702 | 0.0182 | 0.2314 | 2.5116 | 0.897 | 0.0572 |
R2-12 | 0.8242 | 0.0884 | 0.0182 | 0.4784 | 2.6806 | 0.9152 | 0.065 |
R2-13 | 0.6734 | 0.0884 | 0.0182 | 0.3458 | 2.4856 | 1.1518 | 0.091 |
R2-14 | 0.8086 | 0.104 | 0.0208 | 0.299 | 2.0592 | 1.0504 | 0.0676 |
平均 | 0.763 | 0.085 | 0.020 | 0.331 | 2.286 | 0.981 | 0.071 |
實驗分析數據說明：新眾生丸製劑能更大程度上保留活性成分，對提高眾生丸療效具有積極的效果。新眾生丸比原眾生丸的主要活性成分提高幅度為：秦皮乙素178％，咖啡酸286％，阿魏酸186％，虎杖苷30％，黃芩苷166％，芍藥苷41％，哈巴俄苷294％。
第二部分：新眾生丸與原眾生丸的藥效學研究
試驗由廣州中醫藥大學中藥學院藥理教研室開展，樣品選擇原眾生丸（編號：R1）和新眾生丸（編號：R2）產品各1批，選擇2批產品丸重相同或相近，結果平均丸重0.36克/丸，將2批眾生丸分別粉碎成細粉，編號為：眾生丸藥粉R1和眾生丸藥粉R2。
1、抗炎作用
1.1試驗材料
1.1.1藥物與試劑
眾生丸藥粉（R1、R2兩種樣品），吲哚美辛腸溶片：廣東華南藥業集團有限公司，批號070807。冰醋酸：廣州化學試劑廠，批號20080702-2。
1.1.2試驗劑量
眾生丸藥粉（每0.36克粉相當於1丸），成人臨床每日3次，一次6丸，即每天最大用量為6.48克藥粉/天，以成人體重60千克計，平均用藥劑量為0.108克藥粉/千克/天。該試驗小鼠低、中、高三個劑量組，分別設為1.08、2.16、4.32克藥粉/千克，上述劑量為臨床用藥劑量的10、20、40倍（按體重計算）。吲哚美辛腸溶片，成人臨床一次25～50毫克，一日2～3次，即每天最大用量為150毫克，以成人體重60千克計，平均用藥劑量為2.5毫克/千克/天。該試驗小鼠設25毫克/千克劑量組，上述劑量為臨床用藥劑量的20倍（按體重計算）。
1.1.3動物
SPF級KM小鼠，18-22克，雌雄各半，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供。合格證號；0062582
1.1.4儀器
SHIMADZU分析天平，廣州湘儀機電設備有限公司，型號AUY120。分光光度計：尤尼柯（上海）儀器有限公司，型號UNIC07200。
1.2方法與結果
1.2.1對二甲苯所致耳腫脹的抗炎作用
取KM小鼠80隻，雌雄各半，隨機分為8組，空白組，陽性對照組，眾生丸R1樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組；眾生丸R2樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組。陽性對照組按吲哚美辛（25毫克/千克）灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，每天給藥1次，連續5天。於末次給藥後30分鐘將二甲苯0.02毫克滴於小鼠右耳，左耳不塗作對照，20分鐘後將小鼠頸部脫臼處死，用打孔器分別在左右耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左右耳片重量之差作為腫脹度，進行t檢驗，比較組間差異。結果見表3。
組別 | N | 兩耳重量差（克）[U1] |
空白組 | 10 | 12.040±3.535 |
吲哚美辛組 | 10 | 7.270±2.739** |
眾生丸R1樣品高劑量組 | 10 | 11.640±2.266 |
眾生丸R1樣品中劑量組 | 10 | 9.360±4.731 |
眾生丸R1樣品低劑量組 | 10 | 10.140±5.114 |
眾生丸R2樣品高劑量組 | 10 | 7.900±1.534** |
眾生丸R2樣品中劑量組 | 10 | 7.870±2.506** |
眾生丸R2樣品低劑量組 | 10 | 7.690±3.345* |
註：與空白組比較*p＜0.05，**p＜0.01 | ||
表3結果表明：與空白組相比，眾生丸R2樣品各劑量組均可明顯減輕二甲苯致炎小鼠的耳腫脹度，與空白組相比均具有統計學意義（P＜0.05或P＜0.01），雖無明顯作用，但具有減輕耳腫脹度的趨勢（P＞0.05）。提示眾生丸兩種受試物均具有抑制二甲苯引起耳重增加的抗炎消腫作用。
同時對兩種受試藥物實驗結果進行比較發現，與眾生丸R1樣品中劑量組相比，R2樣品中劑量組雖無明顯作用，但具有減輕耳腫脹度的趨勢（P＞0.05）。且R2樣品各劑量組均較R1樣品各劑量組明顯減輕二甲苯致炎小鼠的耳腫脹度。提示對二甲苯引起小鼠耳腫脹的抗炎抑制作用，眾生丸R2樣品有優於R1樣品的趨勢。
1.2.2對毛細血管通透性的抗炎作用
取KM小鼠80隻，雌雄各半，隨機分為8組，空白組，陽性對照組，眾生丸R1樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組；眾生丸R2樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組。陽性對照組按吲哚美辛（25毫克/千克）灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，每天給藥1次，連續5天。末次給藥後30分鐘尾靜脈注射1％伊文思蘭生理鹽水液10毫克.千克，立即腹腔注射0.6％醋酸0.2毫克/只，20分鐘後處死小鼠，剪開腹腔，用5毫克生理鹽水沖洗腹腔數次收集洗滌液，1000轉/分鐘，離心5分鐘，用720分光光度計在590納米處比色測OD值，進行t檢驗，比較組間差異。結果見表4。
組別 | N | 腹腔清洗液OD值[U2] |
空白組 | 10 | 0.733+0.186 |
吲哚美辛組 | 10 | 0.422±0.148** |
眾生丸R1樣品高劑量組 | 10 | 0.555±0.123* |
眾生丸R1樣品中劑量組 | 10 | 0.655±0.146 |
眾生丸R1樣品低劑量組 | 10 | 0.535±0.147* |
眾生丸R2樣品高劑量組 | 10 | 0.524±0.152* |
眾生丸R2樣品中劑量組 | 10 | 0.546±0.176* |
眾生丸R2樣品低劑量組 | 10 | 0.451±0.140** |
註：與空白組比較*p＜0.05，**p＜0.01 | ||
表4結果表明：與空白組相比，眾生丸R1樣品的高、低劑量組及R2樣品各劑量組活肺通片高劑量組能顯著減少小鼠腹腔清洗液OD值（P＜0.01），中劑量組均能明顯減少小鼠腹腔清洗液OD值，即均可明顯減少醋酸所致的小鼠腹腔內炎性物質的滲出，抑制毛細血管通透性的增高，與空白組相比有統計學差異（P＜0.05或0.01），R1樣品中劑量組雖無明顯差異性，但具有減少小鼠腹腔清洗液OD值趨勢（P＞0.05）。吲哚美辛亦可顯著減少小鼠腹腔清洗液OD值（P＜0.01）。提示眾生丸兩種樣品均具有抑制醋酸引起小鼠腹腔毛細血管通透性的抗炎消腫作用。
同時對兩種受試藥物實驗結果進行比較發現，與眾生丸R1樣品中劑量組相比，R2樣品中劑量組雖無明顯作用，但具有抑制毛細血管通透性的增高的趨勢（P＞0.05），且R2樣品各劑量組均較R1樣品各劑量組明顯降低腹腔清洗液OD值。提示對減少醋酸所致的小鼠腹腔內炎性物質的滲出，抑制毛細血管通透性增高的抗炎作用，眾生丸R2樣品有優於R1樣品的趨勢。
2、鎮痛試驗
2.1試驗材料
2.1.1藥物與試劑
眾生丸藥粉（R1、R2兩種樣品），羅通定片：四川康福來藥業集團有限公司，批號：090602，冰醋酸：廣州化學試劑廠，批號20080702-2。
2.1.2試驗劑量
眾生丸藥粉（每0.36克粉相當於1丸），成人臨床每日3次，一次6丸，即每天最大用量為6.48克藥粉/天，以成人體重60千克計，平均用藥劑量為0.108克藥粉/千克/天。該試驗小鼠低、中、高三個劑量組，分別設為1.08、2.16、4.32克藥粉/千克，上述劑量為臨床用藥劑量的10、20、40倍（按體重計算）。羅通定片，成人臨床一次60～90毫克，一日2～3次，即每天最大用量為180毫克，以成人體重60千克計，平均用藥劑量為3毫克/千克/天。該試驗小鼠設60毫克/千克劑量組，上述劑量為臨床用藥劑量的20倍（按體重計算）。
2.1.3動物
SPF級KM小鼠，18～22克，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供。合格證號；0062582。
1.1.4儀器
SHIMADZU分析天平，廣州湘儀機電設備有限公司，型號AUY120。熱板儀。
1.2方法與結果
1.2.1對醋酸致痛小鼠扭體反應的影響
取KM小鼠80隻，雌雄各半，隨機分為8組，空白組，陽性對照組，眾生丸R1樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組；眾生丸R2樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組。陽性對照組按羅通定（60毫克/千克）灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，每天給藥1次，連續5天。末次給藥30分鐘後，各鼠均腹腔注射0.6％醋酸0.2毫克/只，觀察各組小鼠出現扭體反應的時間及25分鐘內出現扭體反應的次數，進行t檢驗，比較各組間差異，結果見表5。
組別 | N | 扭體潛伏期（S） | 25分鐘內扭體數[U3] |
空白組 | 10 | 435.500+67.589 | 33.000±17.845 |
羅通定組 | 10 | 1296.400+263.135** | 1.000±1.700** |
眾生丸R1樣品高劑量組 | 10 | 441.900+123.242 | 17.800+13.863* |
眾生丸R1樣品中劑量組 | 10 | 533.100+224.664 | 13.700+5.677** |
眾生丸R1樣品低劑量組 | 10 | 458.300±117.007 | 20.100±10.482 |
眾生丸R2樣品高劑量組 | 10 | 852.300±560.634* | 9.000+11.652** |
眾生丸R2樣品中劑量組 | 10 | 707.800±464，450 | 11.500±9，710** |
眾生丸R2樣品低劑量組 | 10 | 569.400±176.620* | 17.100±15.059* |
註：與空白組比較*p＜0.05，**p＜0.01 | |||
表5結果表明，與空白對照組比較，羅通定組、眾生丸R2樣品高、低劑量組均能顯著延長醋酸致痛小鼠的潛伏期（P＜0.05或0.01）；羅通定組、眾生丸R1樣品高、中劑量組、R2樣品各劑量組均能顯著減少25分鐘內扭體次數（P＜0.05或0.01）；其餘給藥組雖無明顯差異，但具有延長醋酸致痛小鼠的潛伏期，減少25分鐘內扭體次數的趨勢（P＞0.05）。提示各實驗組均有較好的鎮痛作用。
同時對兩種受試藥物實驗結果進行比較發現，與眾生丸R1樣品中劑量組相比，R2樣品中劑量組雖無明顯作用，但具有延長醋酸致痛小鼠的潛伏期，減少25分鐘內扭體次數的趨勢（P＞0.05），且R2樣品各劑量組對醋酸致痛的鎮痛效果均較R1樣品各劑量組好。提示對延長醋酸致痛小鼠的潛伏期，減少其扭體次數的鎮痛作用，眾生丸R2樣品有優於R1樣品的趨勢。
1.2.2對小鼠熱板法痛閾值的影響
調節恆溫裝置使其溫度控制在（55±0.5）℃，熱板預熱30分鐘。測小鼠正常痛閾值：取18～22克雌性小鼠數隻，每次一隻放在熱板上，記錄其開始舔後足所需時間（秒）為此鼠的正常痛閾值（小於5秒或大於60秒或中跳躍者不用）。測量其痛閾值為其給藥前痛閾值。將合格雌鼠隨機分為8組，空白組，陽性對照組，眾生丸R1樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組；眾生丸R2樣品低（1.08克藥粉/千克）、中（2.16克藥粉/千克）、高（4.32克藥粉/千克）劑量組。陽性對照組按羅通定（60毫克/千克）灌胃給藥，空白組給予等容積蒸餾水，每天給藥1次，連續5天。末次給藥30分鐘後，分別測量小鼠痛閾值。若60秒無反應，其痛閾值按60秒計算，按下式計算痛閾提高百分率。實驗數據採用單因素方差分析比較各組間差異，結果見表6。
痛閾提高百分率（％）＝（藥後痛閾-藥前痛閾）÷藥前痛閾×100％
組別 | N | 痛閾提高百分率（%）；[U4] |
空白組 | 10 | 26.052±12.137 |
羅通定組 | 10 | 272.641±166.449** |
眾生丸R1樣品高劑量組 | 10 | 47.577±31.290 |
眾生丸R1樣品中劑量組 | 10 | 44.144±29.992* |
眾生丸R1樣品低劑量組 | 10 | 41.089±26.512 |
眾生丸R2樣品高劑量組 | 10 | 58.006±36.173* |
眾生丸R2樣品中劑量組 | 10 | 65.036+51.434* |
眾生丸R2樣品低劑量組 | 10 | 42.362+28.715 |
註：與空白組比較*p＜0.05，**p＜0.01 | ||
表6結果表明，與空白對照組比較，羅通定組、眾生丸R1樣品高劑量組、R2樣品高、中劑量組均能顯著抑制熱板所致小鼠的疼痛，提示各實驗組均有較好的鎮痛作用（P＜0.05或0.01）。其餘給藥組雖無明顯差異，但均具有增加其痛閾提高百分率的趨勢（P＞0.05），提示各實驗組均對熱板致痛雌鼠有較好的鎮痛作用。
同時對兩種受試藥物實驗結果進行比較發現，與眾生丸R1樣品中劑量組相比，R2樣品中劑量組雖無明顯作用，但具有具有增加其痛閾提高百分率的趨勢（P＞0.05），且R2樣品各劑量組對熱板致痛雌鼠的鎮痛效果均較R1樣品各劑量組好。提示對增加熱板致痛雌鼠的痛閾提高百分率的鎮痛作用，眾生丸R2樣品有優於R1樣品的趨勢。
從上述抗炎、鎮痛實驗結果表明：總體表現為眾生丸R2優於眾生丸R1。
3、眾生丸抗菌作用實驗（體外抑菌試驗）
該實驗菌種選用九種有代表性的，主要是呼吸道道感染的常見病原菌和條件致病菌，包括金黃色葡萄球菌（26112-5）、乙型溶血性鏈球菌（32210）、大腸埃希氏菌（44113-5）、綠膿假單胞菌（10211）、白色念珠菌（98001）、甲型溶血性鏈球菌（32209）、白喉棒狀桿菌（38101）、肺炎鏈球菌（31001）、卡他球菌。卡他球菌由細菌檢驗室從咽喉標本分離，白色念珠菌為廣州市藥品檢定所惠贈，其餘菌種均來自北京中國藥品生物製品檢定所。實驗時，用肉膏湯將眾生丸R1和R2配製成每5.5毫克含生藥量5.5克，即1克/毫克，流通蒸氣滅菌。對鏈球菌的試驗尚需在滅菌藥液中添加1％葡萄糖，對肺炎球菌和白喉桿菌則另加10％兔血清，對白色念珠菌的試驗套用沙氏培養液稀釋藥液。空白對照為不含藥物的培養基。每排藥液的各個濃度管及空白對照管分別加入1:2000的試驗菌液（8小時培養物）0.1毫克，37℃培養24小時觀察結果。判定最小抑菌濃度（MIC），MIC是指完全抑制試驗菌種生長所含的最小藥物濃度。結果見表7。
藥物 | 金黃色葡萄球菌 | 乙型溶血性鏈球菌 | 大腸桿菌 | 甲鏈 | 肺鏈 | 綠膿 | 卡他 | 白念 | 白喉 |
眾生丸R1 | 0.05 | 0.05 | - | 0.2 | 0.2 | - | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
眾生丸R2 | 0.025 | 0.025 | - | 0.05 | 0.1 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.2 |
註：空白對照管的試驗菌種生長正常。 | |||||||||
表7結果表明，眾生丸對所試菌種，主要引起呼吸道感染的常見致病菌和條件致病菌均有一定的抗菌作用，對各菌的最小抑菌濃度（MIC）介於0.025克/毫克～0.4克/毫克之間，其中對大腸桿菌沒有抑制作用。該次實驗結果表明，眾生丸R2的抗菌效應優於眾生丸R1。
附圖說明
圖1為323納米測定黃芩苷（65.9分鐘）、虎杖苷（41.1）、咖啡酸（26.6）、阿魏酸（40.2）；
圖2為353納米測定秦皮乙素（25.2分鐘）；
圖3為230納米測定芍藥苷（5.9分鐘）；
圖4為280納米測定哈巴俄苷（20.4分鐘）。
權利要求
1.一種中藥丸劑的製備方法，包括如下步驟：
（1）一種中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的中藥丸劑由蒲公英、紫花地丁、黃芩、崗梅、赤芍、天花粉、玄參、當歸、防風、柴胡、皂角刺、白芷、虎杖、夏枯草、板藍根膽南星、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素、二氧化矽和硬脂酸鎂組成；其中15味中藥材提取製成乾膏粉，配方為：蒲公英330克、紫花地丁330克、黃芩100克、崗梅130克、赤芍100克、天花粉100克、玄參100克、當歸100克、防風100克、柴胡100克、皂角刺130克、白芷30克、虎杖130克、夏枯草65克、板藍根130克；上述15味中藥材提取製成1000丸乾膏粉；
得到乾膏粉160-200克、和膽南星粉30克、人工牛黃20克、羥丙纖維素12.5-50克、微晶纖維素10-37.5克、乳糖10-38.5克、硬脂酸鎂1.25-5克、二氧化矽2.5-5克，製成1000丸中藥丸劑素丸；
（2）乾膏粉的製備方法：①將中藥丸劑中15味中藥材用多功能提取罐水煎煮二次，第一次加入3~10倍藥材量的水，提取2小時，第二次加入2~6倍藥材量的水，提取1小時，兩次提取均控制微沸狀態，蒸汽壓力控制在0.04~0.1兆帕，溫度控制在98~101°C，之後，合併兩次提取液；②將提取液過濾後，在溫度為60~85°C，蒸汽壓力為0.04~0.12兆帕，真空度為0.02~0.09兆帕的條件下，將提取液濃縮成相對密度為1.25~1.35的浸膏；③將浸膏進行真空帶式乾燥成乾浸膏；④將乾浸膏粉碎過40-80目，製備出乾膏粉；
（3）取膽南星藥材，在溫度為110°C士5°C時，滅菌時間40-60分鐘；在溫度為70~80°C範圍內乾燥至水分≤8%，之後粉碎成細粉；
（4）取1/2膽南星細粉與乳糖交叉過篩，然後與剩餘的膽南星粉以及人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素一起上料至混合機中，預混合20分鐘；然後取乾膏粉與上述混合物以及二氧化矽、硬脂酸鎂交叉過篩後一起上料至混合機中，總混30分鐘；
（5）用高速壓丸機在10-15KN條件下制丸；
（6）中藥丸劑質量標準採用薄層色譜方法鑑別人工牛黃、紫花地丁、赤芍、虎杖等藥材，增加了高效液相色譜法對黃芩苷的含量測定。
2.如權利要求1所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的真空帶式乾燥是在壓力為-0.07兆帕~-0.12兆帕，物料溫度為40-80°C，進料速度為10-20升/時，料帶傳送速度為20-30厘米/分鐘的條件下進行的。
3.如權利要求2所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的真空乾燥是在壓力為-0.1兆帕，物料溫度為45-55C，進料速度為15升/時，料帶傳送速度為25厘米/分鐘的條件下進行的。
4.如權利要求1所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的中藥丸劑配方為：乾膏粉160克膽南星粉30克人工牛黃20克羥丙纖維素14.5克微晶纖維素18.5克乳糖18.5克硬脂酸鎂1.25克二氧化矽2.5克，製成1000丸中藥丸劑素丸。
5.如權利要求1所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的膽南星藥材是經粗碎後過8-12毫米篩網的粗粒。
6.如權利要求1所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的膽南星粉與乳糖交叉用整粒機在50赫茲^下過0.8毫米號篩；乾膏粉與膽南星粉、乳糖、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素的預混合物料，二氧化矽及硬脂酸鎂交叉用整粒機在45赫茲下過2.5毫米號篩。
7.如權利要求1所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於在壓丸時沖模為球形沖，大小為7.0-8.0毫米，素丸重為0.26-0.35克/丸，控制素丸的脆碎度在0.3-0.9%、崩解時限在24-34分鐘。
8.如權利要求1.7所述的中藥丸劑的製備方法，其特徵在於所述的丸重為0.27-0.42克/丸，素丸包糖衣或包薄膜衣。
實施方式
實施例1（新眾生丸的製備）：
眾生丸乾膏粉160克、膽南星粉30克、人工牛黃20克、羥丙纖維素50克、微晶纖維素37.5克、乳糖38.5克、二氧化矽4克、硬脂酸鎂5克，製成1000丸。
取1/2膽南星粉與乳糖交叉用整粒機過0.8毫米號篩（50赫茲），然後與剩餘的膽南星粉、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素一起上料至混合機中，預混合20分鐘後將物料放出，[U6]取眾生丸乾膏粉，膽南星粉與乳糖、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素的預混合料，二氧化矽、硬脂酸鎂交叉用整粒機過2.5毫米號篩（45赫茲）後一起上料至混合機中，總混30分鐘。用高速壓丸機制丸，球形沖模大小為7.9毫米，素丸的丸重為0.345克/丸，素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料為胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.36克/丸。
實施例2（新眾生丸的製備）：
眾生丸乾膏粉200克、膽南星30克、人工牛黃20克、羥丙纖維素40克、微晶纖維素25克、乳糖25克、二氧化矽5克、硬脂酸鎂5克，製成1000丸。
取1/2膽南星粉與乳糖交叉用整粒機過0.8毫米號篩（50赫茲），然後與剩餘的膽南星粉、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素一起上料至混合機中，預混合20分鐘後將物料放出，取眾生丸乾膏粉，膽南星粉與乳糖、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素的預混合料，二氧化矽、硬脂酸鎂交叉用整粒機過2.5毫米號篩（45赫茲）後一起上料至混合機中，總混30分鐘。用高速壓丸機制丸，球形沖模大小為7.9毫米，素丸的丸重為0.35克/丸，素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料為胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.36克/丸。
實施例3（新眾生丸的製備）：
眾生丸乾膏粉160克、膽南星粉30克、人工牛黃20克、羥丙纖維素14.5克、微晶纖維素18.5克、乳糖18.5克、硬脂酸鎂1.25克、二氧化矽2.5克，製成1000丸。
取1/2膽南星粉與乳糖交叉用整粒機過0.8毫米號篩（50赫茲），然後與剩餘的膽南星粉、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素一起上料至混合機中，預混合20分鐘後將物料放出，取眾生丸乾膏粉，膽南星粉與乳糖、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素的預混合料，二氧化矽、硬脂酸鎂交叉用整粒機過2.5毫米號篩（45赫茲）後一起上料至混合機中，總混30分鐘。用高速壓丸機制丸，球形沖模大小為7.2毫米，素丸的丸重為0.265克/丸，素丸包糖衣，包糖衣的材料由蔗糖、明膠、滑石粉、檸檬黃、亮藍等組成，糖衣丸重0.36-0.42克/丸；素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料為胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.27-0.28克/丸。
實施例4（新眾生丸的製備）：
眾生丸乾膏粉180克、膽南星粉30克、人工牛黃20克、羥丙纖維素12.5克、微晶纖維素10克、乳糖10克、硬脂酸鎂1.5克、二氧化矽3克，製成1000丸。
取1/2膽南星粉與乳糖交叉用整粒機過0.8毫米號篩（50赫茲），然後與剩餘的膽南星粉、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素一起上料至混合機中，預混合20分鐘後將物料放出，取眾生丸乾膏粉，膽南星粉與乳糖、人工牛黃、羥丙纖維素、微晶纖維素的預混合料，二氧化矽、硬脂酸鎂交叉用整粒機過2.5毫米號篩（45赫茲）後一起上料至混合機中，總混30分鐘。用高速壓丸機制丸，球形沖模大小為7.2毫米，素丸的丸重為0.267克/丸，素丸包糖衣，包糖衣的材料由蔗糖、明膠、滑石粉、檸檬黃、亮藍等組成，糖衣丸重0.36-0.42克/丸；素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料為胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.27-0.28克/丸。
實施例5（新眾生丸的乾膏粉製備）：
製備1000丸的新眾生丸，由蒲公英330克、紫花地丁330克、黃芩100克、崗梅130克、赤芍100克、天花粉100克、玄參100克、當歸100克、防風100克、柴胡100克、皂角刺130克、白芷30克、虎杖130克、夏枯草65克、板藍根130克等15味藥材，採用傳統的多功能提取罐水煎煮2次，第一次加入5倍藥材量的水煮沸提取2小時（控制微沸狀態，蒸汽壓力控制在0.04～0.1兆帕，溫度控制在98～101℃），第二次加入4倍藥材量的煮沸提取1小時（控制微沸狀態，蒸汽壓力控制在0.04～0.1兆帕，溫度控制在98～101℃），合併兩次提取液。將兩次提取液過濾後，用三效濃縮器濃縮成浸膏，濃縮時溫度控制在60～85℃，蒸汽壓力控制在0.04～0.12兆帕，真空度控制在0.02～0.09兆帕，濃縮至相對密度為1.25～1.35（60～70℃測）的浸膏。將浸膏用真空帶式乾燥機乾燥成乾膏粉，加熱控制物料溫度在45～55℃，真空壓力-0.1MPa，進料速度為15升/時，料帶傳送速度為25厘米/分鐘，乾膏粉碎過60目，製備得眾生丸乾膏粉。
通過不同批次或產地的藥材重複實驗，製備1000丸的新眾生丸，眾生丸乾膏粉在160～200克範圍內。
實施例6
新眾生丸膽南星粉的製備方法為：取膽南星藥材，粗碎過10毫米篩網成粗粒，用中成藥滅菌櫃進行滅菌，滅菌溫度110℃±5℃，滅菌時間60分鐘；在溫度70～80℃範圍內沸騰乾燥至水分≤8％，粉碎成細粉。
實施例7（新眾生丸的質量控制方法）：
【性狀】該品為糖衣濃縮丸或薄膜衣濃縮丸，除去包衣後，顯棕色至棕黑色；味苦、微辛。
【鑑別】（1）取該品3丸，研碎，加甲醇20毫克，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加熱水20毫克使溶解，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20毫克，合併乙酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇2毫克使溶解，作為供試品溶液。另取紫花地丁對照藥材0.5克，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005年版一部附錄VIB）試驗，吸取上述兩種溶液各2微升，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（5:3:1）為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈（365納米）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
（2）取該品20丸，研碎，加甲醇50毫克，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水20毫克使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20毫克，合併正丁醇提取液，蒸乾，殘渣加甲醇5毫克使溶解，加在中性氧化鋁柱（100～200目，4克，內徑為10毫米）上，以甲醇40毫克洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2毫克使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加甲醇製成每1毫克含4毫克的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005年版一部附錄VIB）試驗，吸取上述兩種溶液各10微升，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
（3）取該品10丸，研碎，加甲醇20毫克，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加硫酸溶液（15→100）10毫克，水浴加熱30分鐘，放冷，用三氯甲烷振搖提取2次，每次10毫克，合併三氯甲烷液，蒸乾，殘渣加三氯甲烷1毫克使溶解，作為供試品溶液。另取虎杖對照藥材0.3克，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005年版一部附錄VIB）試驗，吸取供試品溶液4微升、對照藥材溶液2微升，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈（365納米）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
（4）取該品20丸，研碎，加三氯甲烷25毫克，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇1毫克使溶解，作為供試品溶液。另取膽酸對照品、豬去氧膽酸對照品，分別加乙醇製成每1毫克含2毫克的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005年版一部附錄VIB）試驗，吸取上述三種溶液各5微升，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20:25:2:3）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘約10分鐘，置紫外光燈（365納米）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的兩個螢光斑點。
【檢查】應符合丸劑項下有關的各項規定（中國藥典2005年版一部附錄IA）。
【含量測定】照高效液相色譜法（中國藥典2005年版一部附錄VID）測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水-磷酸（43:57:0.2）為流動相；檢測波長為280納米。理論板數按黃芩苷峰計算應不低於3000。
對照品溶液的製備取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加流動相製成每1毫克含50微克的溶液，即得。
供試品溶液的製備取該品10丸，糖衣丸除去糖衣，精密稱定，研細，取約0.5克，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇25毫克，稱定重量，超聲處理（功率250瓦，頻率40千赫）30分鐘，放冷，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，離心（轉速為每分鐘5000轉）10分鐘，精密量取上清液10毫克，水浴蒸乾，殘渣加流動相溶解並轉移至10毫克量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10微升，注入液相色譜儀，測定，即得。
該品含黃芩以黃芩苷（C21H18O11）計，每丸不得少於1.0毫克。
榮譽表彰
2014年11月6日，《一種新眾生丸的中藥製劑及其製備方法》獲得第十六屆中國專利優秀獎。
