《一種新型鈣拮抗劑非鈣依賴性抗心肌損傷的新靶點》是依託汕頭大學，由石剛剛擔任項目負責人的聯合基金項目。
基本介紹
- 中文名：一種新型鈣拮抗劑非鈣依賴性抗心肌損傷的新靶點
- 項目類別：聯合基金項目
- 項目負責人：石剛剛
- 依託單位：汕頭大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
碘化N-正丁基氟哌啶醇（F2）是我實驗室合成的新化合物，通過阻斷心肌細胞膜鈣通道而拮抗心肌缺血再灌注（I/R）損傷。近來認為I/R損傷的核心病理變化是炎症過程；I/R作為刺激引起核轉錄因子的高表達，進而啟動炎症基因的表達。我們以核轉錄因子為I/R損傷的重要靶標，利用活性譜晶片篩選心肌I/R中活性明顯變化的及F2影響的轉錄因子，利用反義寡核苷酸技術確證這些轉錄因子高表達和心肌I/R損傷的因果關係，並詳盡研究F2對I/R心肌細胞轉錄因子表達變化的影響與心肌I/R損傷改善的關係。結合前期研究，認為F2對核轉錄因子的調控既可通過阻斷L-型鈣通道降低胞內[Ca2+]i實現，也可經非鈣依賴性的途徑實現；F2拮抗鈣超載和調控核轉錄因子以抑制炎症，是拮抗心肌I/R損傷中兩個相對獨立的機制；甚至可能是鈣拮抗劑在防治I/R損傷中所共有的兩個機制。為此我們在心肌細胞和無L-型鈣通道的內皮細胞上證實這種假設。
結題摘要
本項目在前期研究的基礎上，提出碘化N-正丁基氟哌啶醇（N-n-butyl haloperidol iodie，F2）拮抗心肌I/R損傷既可通過阻斷L-型鈣通道降低胞內[Ca2+]i實現，也可能有非阻斷L-型鈣通道途徑參與，是拮抗心肌I/R損傷中兩個相對獨立的機制，為此，我們在心肌細胞和無L-型鈣通道的內皮細胞上證實這種假說。結果是在沒有L-型鈣通道的心臟微血管內皮細胞上，鈣拮抗劑和F2可以提高細胞存活率，減輕細胞膜損傷導致的LDH漏出；保護超氧化物歧化酶SOD的活性，降低MDA的產生；抑制內皮細胞粘附因子的產生，減少中性粒細胞粘附內皮細胞，降低髓過氧化物酶MPO活性，還可抑制血小板粘附內皮細胞聚集。在心肌細胞上，採用細胞外液暫時無鈣條件和siRNA干擾抑制L型鈣通道的基因表達兩種心肌細胞分別造H/R模型，觀察到鈣拮抗劑及F2具有抑制炎症、細胞凋亡，拮抗氧自由基產生，改善能量代謝障礙，減少細胞破壞。初步得出上述作用與MIF，TNF-α-NF-κB環路和iPLA2 異常表達有關，鈣拮抗劑和F2通過對上述關鍵因子的和相關信號轉導通路的調控，起到拮抗心肌I/R或細胞H/R損傷的作用。 F2可以劑量依賴地抑制心肌細胞缺氧時靜息鈣水平升高，使降低的鈣瞬變幅度和延長的瞬變時程有所恢復；並通過加速缺氧時鈣瞬變移除速率及影響肌質網鈣儲量保護肌質網鈣泵（SERCA2a）。採用膜片鉗全細胞觀察到F2抑制正常和缺氧心肌細胞鈉鈣交換體（sodium-calcium exchanger, NCX）電流，並以抑制外向電流為主，發揮拮抗鈣超載作用。F2可濃度依賴地抑制H2O2誘導的鈉鈣交換體電流，以抑制外向電流為主，其作用環節包括直接對NCX的直接抑制，同時亦抑制MEK/ERK的磷酸化。總之，在確認F2顯著拮抗心肌I/R損傷來自於阻斷L-型鈣通道，保護胞內鈣穩態的作用外，F2和鈣通道拮抗劑在心肌細胞和內皮細胞具有非L型鈣通道阻斷作用，這些顯著且多方面的作用，可能具有和拮抗鈣超載相同的重要性，這是對鈣通道拮抗劑對於拮抗心肌I/R損傷作用機制的重要補充。
