一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法:專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,

《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》是廣州白雲山星群（藥業）股份有限公司於2006年1月19日申請的專利，該專利申請號為2006100053822，公布號為CN1839942，公布日為2006年10月4日，發明人是詹華強、董婷霞。

《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》公開了一種抗流感病毒的中藥有效部位，其由夏枯草5~200份，桑葉5~100份，野菊花5~100份為原料，粉碎後，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力15~33兆帕；萃取溫度為30~50攝氏度，解析壓力5~9兆帕；解析溫度為30~55攝氏度，萃取1~4小時後，即可得到含脂溶性有效部位的提取物。該中藥有效部位可以製成片劑、膠囊、顆粒劑、口服液、注射液、吸入劑、噴霧劑或滴劑，套用於製備殺滅甲型流感病毒H3N2亞型、高致病性禽流感病毒H5N1亞型和乙型流感病毒株的藥物，其有效成分明確，藥效顯著，服用劑量小，劑型多樣，使用方便。還可用作製成人用或禽獸用抗流行性感冒病毒藥品，或消毒防疫品。

2021年6月24日，《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》獲得第二十二屆中國專利優秀獎。

基本介紹

中文名：一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法
公布號：CN1839942
申請人：廣州白雲山星群（藥業）股份有限公司
發明人：詹華強、董婷霞
申請號：2006100053822
申請日：2006年1月19日
公布日：2006年10月4日
地址：香港清水灣香港科技大學生物系
代理機構：廣州華進聯合專利商標代理有限公司
代理人：曾旻輝
Int. Cl.：A61K36/60(2006.01); A61K9/08(2006.01); A61K9/10(2006.01); A61K9/12(2006.01); A61K9/16(2006.01)等
類別：發明專利

專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,有益效果,技術領域,權利要求,實施方式,專利榮譽,

專利背景

中醫藥對流感的治療，具有獨特的療效。“夏桑菊”由夏枯草、桑葉、野菊花三味中藥組成，用水提製成的“夏桑菊顆粒劑”是中國的著名中成藥，常用於中醫熱症的治療，日常生活中常用作涼茶抗流行性感冒。但是由於通常用水提取原料藥，取得的僅為水溶性成分，影響了中藥的藥效發揮；在工藝上又存在著長時間的加熱，導致熱敏性有效成分被破壞，不能作為一線藥物用於抗流行性感冒；同時由於藥物生產工藝技術落後，科技含量不足，劑型粗糙，消費者難以接受。

發明內容

專利目的

《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》的目的在於克服相關技術的不足，提供一種將古方與現代製劑技術相結合，既美觀又方便，服用劑量小，可用於治療急性流行性感冒病毒的抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法。

技術方案

《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》的目的是這樣實現的，其由如下原料藥的脂溶性有效部位製成：夏枯草5~200份，桑葉5~100份，野菊花5~100份。

作為一種最佳化方案，其由如下原料藥的脂溶性有效部位製成：夏枯草50~150份，桑葉20~50份，野菊花15~100份。

最優選的方案是：其由如下原料藥的脂溶性有效部位製成：夏枯草100份，桑葉35份，野菊花16份。

該中藥有效部位可以製成片劑、膠囊、顆粒劑、口服液、注射液、吸入劑、噴霧劑或滴劑，可用作製成人用或禽獸用抗流行性感冒病毒藥品，或消毒防疫品。可以套用於製備殺滅甲型流感病毒H3N2亞型、高致病性禽流感病毒H5N1亞型和乙型流感病毒株的藥物。

該抗流感病毒的中藥有效部位的製備方法為：將前述夏枯草，桑葉，野菊花粉碎，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力15~33兆帕；萃取溫度為30~50攝氏度，解析壓力5~9兆帕；解析溫度為30~55攝氏度，萃取1~4小時後，即可得到含脂溶性有效部位的提取物。

最佳化的萃取條件是：萃取壓力20~22兆帕；萃取溫度為45~50攝氏度，解析壓力6~7兆帕；解析溫度為40~45攝氏度，萃取3小時後，得到含脂溶性有效部位的提取物（二氧化碳流量為25±3升/小時）。

有益效果

《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》的藥物有效部位可以用於治療盒預防急性流行性感冒，有效成分明確，藥效顯著，服用劑量小，劑型多樣，使用方便。以下結合有關試驗進一步說明該發明的有益效果：

1、材料與儀器

1.1、試藥與儀器：夏枯草，桑葉，野菊花，購於廣州清平藥材市場，經鑑定均為中國藥典2005年版收載的品種。

1~5升超臨界二氧化碳萃取裝置，購於廣州市輕工業研究所；24，96孔細胞培養板和25立方厘米細胞培養瓶，購於德國Greiner bio-one公司。二氧化碳培養箱3210型，購於美國Forma公司。美國VARIAN-3900氣相色譜儀。

1.2、毒株與細胞：甲型流感病毒毒株（A/shenzhen/203/2001/H3N2，A/shenzhen/45/2001/H1N1H5N1）、乙型流感病毒毒株，細胞株MDCK，由深圳市疾病預防控制中心微生物檢驗科提供。

2、方法與結果

2.1、樣品的製備：將夏枯草100份，桑葉35份，野菊花16份，粉碎成粗粉，按水提液的製備方法和SFE-CO₂提取物的製備方法製備夏桑菊水提液、夏桑菊SFE-CO₂提取物。

水提液的製備方法：取夏枯草100份，桑葉35份，野菊花16份，藥材總重為151克，用1000毫升水加熱煎煮3次，每次1小時，過濾，合併提取液，濃縮至151毫升，濾過，置潔淨容器中備用。

SFE-CO₂提取物的製備方法：取夏枯草100份，桑葉35份，野菊花16份，藥材總重為453克，粉碎成10~30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力21兆帕；萃取溫度為50攝氏度，解析壓力6.5兆帕；解析溫度為45攝氏度，萃取3小時，得萃取物25克，置潔淨容器中備用。2.3、體外抑制甲型和乙型流感病毒的作用：採用微量培養法。

首先將三種病毒（H3N2、H5N1和乙型流感病毒）分別稀釋成測試濃度（100個TCID50）。將夏桑菊的水提液，不稀釋直接加入已長成單層的MDCK細胞（狗腎傳代細胞）中100微升/孔，再加入流感病毒液50微升/孔，再加100微升/孔的維持液。每個濃度4孔，同時設細胞對照孔，置35攝氏度，5％CO₂孵箱環境培養過夜，於每孔中加入0.2毫升1％紅細胞懸液，混合均勻後室溫放置30~60分鐘。觀察血凝結果。

將夏桑菊的SFE-CO₂提取物樣品，用DMSO製成100毫克/毫升的樣液後，用PBS作對倍稀釋（1:2，1:8，1:16，1:32，1:64，1:128）共6管，稀釋後加入已長成單層的MDCK細胞中50微升/孔，每孔再加流感病毒液50微升/孔，再加每孔100微升/孔的維持液。每個樣品濃度4孔，同時設DMSO孔和細胞對照孔，置35攝氏度，5％CO₂孵箱環境培養過夜，於每孔中加入0.2毫升1％紅細胞懸液，混合均勻後室溫放置30~60分鐘。觀察血凝結果。結果見表1。

表1 夏桑菊不同提取法提取物的抗流感病毒的最大稀釋度

樣品名稱	H3N2	H5N1	乙型流感病毒
夏桑菊水提液	-	-	-
夏桑菊SFE-CO₂提取物	1:320	1:320	1:320

結果顯示，夏桑菊SFE-CO₂提取物脂溶性成分對流感病毒甲型H3N2、流感病毒甲型H5N1（禽流感病毒）和乙型流感病毒均有滅毒作用，而夏桑菊水提液對流感病毒甲型H3N2、流感病毒甲型H5N1（禽流感病毒）和乙型流感病毒均無滅毒作用。

2.4、夏桑菊SFE-CO₂提取物對細胞毒性的測定：採用微量培養法。預先將MDCK細胞培養於96孔培養板內，置35攝氏度，5％CO₂孵箱環境中培養，約24小時細胞成層後，棄去孔內培養液，再將遞倍稀釋（1:20，1:40，1:80，1:160，1:320，1:640，1:1280）的100微升脂溶性成分樣品液，分別加入已長成單層的MDCK細胞中，每孔再加100微升/孔的維持液。每個濃度4孔，同時設細胞對照孔，置35攝氏度，5％CO₂孵箱環境培養，每天記錄細胞病變結果，直至藥物對細胞的毒性不再繼續進展時判結果。以不出現細胞病變的藥物最小稀釋倍數為無限毒量。

結果顯示，夏桑菊SFE-CO₂提取物無限毒量為1:16，是抗流感病毒作用的最大稀釋度1:320的20倍。

3、小結與討論

夏桑菊SFE-CO₂提取物對流感病毒三種類型均有滅毒作用；而水提液對流感病毒三種類型均無滅毒作用。夏桑菊SFE-CO₂提取物無限毒量為1:16，是抗流感病毒作用的最大稀釋度1:320的20倍。由此可確認夏桑菊採用SFE-CO₂提取才具有抗流感的藥效。

流感病毒株選用甲型的H3N2、H5N1株和乙型流感病毒株，其中甲型的H3N2是近期在亞洲流行的流感發病病毒，而H5N1是人感染高致病性禽流感病毒，曾引發1997年和2003年香港禽流感，是亞洲流行的高致病性禽流感的病毒株。夏桑菊脂溶性成分能滅殺H3N2、H5N1甲型流感病毒和乙型流感病毒，提示夏桑菊SFE-CO₂提取物脂溶性成分可用於人的甲型流感和乙型流感的防治，也可用於禽流感。

技術領域

《一種抗流感病毒的中藥有效部位及其製備方法》涉及複方製劑藥物，特別是一種治療流感病毒的中藥製劑及其製備方法。

權利要求

1、一種抗流感病毒的中藥有效部位，其特徵在於：其由如下原料藥經不加夾帶劑的二氧化碳超臨界萃取的脂溶性有效部位製成：夏枯草5~200份，桑葉5~100份，野菊花5~100份。

2、根據權利要求1所述的一種抗流感病毒的中藥有效部位，其特徵在於：其由如下原料藥經不加夾帶劑的二氧化碳超臨界萃取的脂溶性有效部位製成：夏枯草50~150份，桑葉20~50份，野菊花15~100份。

3、根據權利要求2所述的一種抗流感病毒的中藥有效部位，其特徵在於：其由如下原料藥經不加夾帶劑的二氧化碳超臨界萃取的脂溶性有效部位製成：夏枯草100份，桑葉35份，野菊花16份。

4、一種如權利要求1、2或3所述的抗流感病毒的中藥有效部位在製備殺滅甲型流感病毒H3N2亞型、高致病性禽流感病毒H5N1亞型和乙型流感病毒株的藥物中的套用。

5、根據權利要求1、2或3所述的一種抗流感病毒的中藥有效部位，其製成片劑、膠囊、顆粒劑、口服液、注射液、吸入劑、噴霧劑或滴劑。

6、根據權利要求1、2或3所述的一種抗流感病毒的中藥有效部位，其製成人用或禽獸用抗流行性感冒病毒藥品，或消毒防疫品。

7、一種製備權利要求1所述的抗流感病毒的中藥有效部位的方法，其特徵在於：將前述夏枯草，桑葉，野菊花粉碎，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：不加夾帶劑，萃取壓力15~33兆帕；萃取溫度為30~50攝氏度，解析壓力5~9兆帕；解析溫度為30~55攝氏度，萃取1~4小時後，得到含脂溶性有效部位的提取物。

8、根據權利要求7所述的製備方法，其特徵在於：將前述夏枯草，桑葉，野菊花粉碎，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：不加夾帶劑，萃取壓力20~22兆帕；萃取溫度為45~50攝氏度，解析壓力6~7兆帕；解析溫度為40~45攝氏度，萃取3小時後，得到含脂溶性有效部位的提取物。

實施方式

實施例1

取夏枯草100份，桑葉35份，野菊花16份，藥材總重為453克，粉碎成10~30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力21兆帕；萃取溫度為50攝氏度，解析壓力6.5兆帕；解析溫度為45攝氏度，萃取3小時，得含脂溶性有效部位的提取物25克，加入適量輔料，製成含0.1克/粒超臨界提取物的軟膠囊，用於預防禽流感，每日3次，一次一粒，連續服用3天。

實施例2

取夏枯草5份，桑葉20份，野菊花100份，藥材總重為250克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力16兆帕；萃取溫度為35攝氏度，解析壓力5兆帕；解析溫度為30攝氏度，萃取2小時，得含脂溶性有效部位的提取物14克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的滴劑，用於家禽預防禽流感。

實施例3

取夏枯草200份，桑葉100份，野菊花10份，藥材總重為620克，粉碎成20目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力33兆帕；萃取溫度為50攝氏度，解析壓力9兆帕；解析溫度為55攝氏度，萃取4小時，得含脂溶性有效部位的提取物35克，加入適量輔料，製成含2％超臨界提取物的乳劑，用於禽流感疫情期間，噴射消毒防疫。

實施例4

取夏枯草150份，桑葉50份，野菊花100份，藥材總重為300克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力25兆帕；萃取溫度為48攝氏度，解析壓力8兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取3小時，得含脂溶性有效部位的提取物17克，加入適量輔料，製成含0.1克/粒超臨界提取物的片劑，用於預防禽流感，每日3次，一次一粒，連續服用3天。

實施例5

取夏枯草180份，桑葉75份，野菊花80份，藥材總重為670克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力28兆帕；萃取溫度為40攝氏度，解析壓力9兆帕；解析溫度為50攝氏度，萃取4小時，得含脂溶性有效部位的提取物40克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的顆粒劑，用於預防禽流感，連續服用3天。

實施例6

取夏枯草20份，桑葉100份，野菊花5份，藥材總重為500克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力30兆帕；萃取溫度為45攝氏度，解析壓力7兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取4小時，得含脂溶性有效部位的提取物27克，加入適量輔料，製成含2％超臨界提取物的乳劑，在流感疫情期間，用於噴射消毒防疫。

實施例7

取夏枯草100份，桑葉50份，野菊花10份，藥材總重為480克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力22兆帕；萃取溫度為50攝氏度，解析壓力6.5兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取3小時，得含脂溶性有效部位的提取物27克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的口服液，在流感疫情期間，用於治療流感。

實施例8

取夏枯草50份，桑葉50份，野菊花50份，藥材總重為450克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力21兆帕；萃取溫度為45攝氏度，解析壓力7兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取3小時，得含脂溶性有效部位的提取物25克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的注射液，在流感疫情期間，用於治療流感。

實施例9

取夏枯草40份，桑葉80份，野菊花20份，藥材總重為420克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力22兆帕；萃取溫度為50攝氏度，解析壓力6.5兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取3小時，得含脂溶性有效部位的提取物23克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的吸入劑，在流感疫情期間，用於治療流感。

實施例10

取夏枯草120份，桑葉75份，野菊花65份，藥材總重為260克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力20兆帕；萃取溫度為40攝氏度，解析壓力5兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取2小時，得含脂溶性有效部位的提取物14克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的噴霧劑，在流感疫情期間，用於噴霧防疫。

實施例11

取夏枯草75份，桑葉20份，野菊花80份，藥材總重為350克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力22兆帕；萃取溫度為50攝氏度，解析壓力6.5兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取3小時，得含脂溶性有效部位的提取物20克，加入適量輔料，製成含超臨界提取物的滴劑，在流感疫情期間，用於治療流感。

實施例12

取夏枯草175份，桑葉10份，野菊花40份，藥材總重為550克，粉碎成30目粉，置超臨界提取裝置中，用CO₂進行超臨界萃取，萃取條件是：萃取壓力20兆帕；萃取溫度為35攝氏度，解析壓力5兆帕；解析溫度為40攝氏度，萃取2小時，得含脂溶性有效部位的提取物30克，加入適量輔料，製成含0.1克/粒超臨界提取物的片劑，用於預防流感，連續服用3天。

專利榮譽