《“甘草-桔梗”藥對治療氣道炎症的協同作用機理研究》是依託南開大學，由侯媛媛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：“甘草-桔梗”藥對治療氣道炎症的協同作用機理研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：侯媛媛
- 依託單位：南開大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本課題以解讀呼吸系統疾病常用藥對甘草-桔梗的配伍機制為目標，重點圍繞抗炎藥效物質基礎及配伍協同的網路調控機制，桔梗引甘草上行的動態分布過程及分子機制等方面展開研究。運用生物活性指導的UPLC-Q/TOF 分析技術篩選 藥對中的抗炎成分，通過Pharm Mapper和KEGG構建抗炎網路，並採用分子生物學方法對關鍵靶點和通路進行驗證，從網路藥理學的角度闡釋甘草與桔梗協同抗炎的作用機制；採用正電子發射斷層顯像技術研究活性成分體內分布變化情況，利用磁性捕獲技術分離桔梗皂苷的作用靶點蛋白，運用分子生物學手段研究靶點蛋白的肺內分布特點和對P-糖蛋白外排功能的影響，闡釋桔梗引甘草入肺的引經的分子機制。將中藥引經理論與方劑配伍理論有機結合，多層次、多角度闡釋甘草-桔梗藥對治療肺部炎症的作用機制，為探索甘草-桔梗藥對配伍的科學內涵提供新的研究思路和方法。
結題摘要
甘草-桔梗藥對來源於漢代張仲景的名方桔梗湯，在治療呼吸系統疾病中套用廣泛。本課題以解讀甘草-桔梗藥對的配伍機制為目標，重點圍繞抗炎藥效物質基礎及配伍協同的網路調控機制，桔梗引甘草上行的動態分布過程及作用機制等方面展開研究。首先利用LPS誘導的小鼠急性肺損傷模型和TNF-α 誘導的細胞炎症模型從整體動物和細胞水平上證明了“甘草-桔梗”具有顯著的抗炎效果；結合NF-κB抑制活性相關的雙螢光素酶基因報告系統和液質聯用技術從“桔梗-甘草”藥對中共篩選出11個抗炎活性成分，其中8個來源於甘草，主要為多酚酸類和五環三萜類成分，3個來源於桔梗，主要為萜類化合物；通過同位素標記定量方法（iTRAQ）對藥物干預的小鼠急性肺損傷的肺組織進行分析，找出67個差異蛋白，主要與炎症和免疫功能、肌肉收縮功能以及染色體功能相關。利用生物信息學預測了藥對中活性成分的主要作用靶點和通路後發現：甘草主要調控MAPKs通路的表達，進而影響NF-κB通路的表達，桔梗主要通過調控PI3K/AKT通路和GSK3β 靶點發揮抗炎作用的，此部分結果初步闡釋了“甘草-桔梗”藥對治療肺部炎症的網路調控作用機制；將甘草次酸進行18F標記後靜注小鼠，利用PET技術觀察口服桔梗總皂苷後甘草次酸的體內分布情況，發現給藥後的2小時內肺部甘草次酸的濃度顯著升高，而其它器官沒有明顯的變化，證明了桔梗能夠引甘草上行的作用；對桔梗皂苷在體內的代謝過程進行研究，共鑑定出以桔梗次級皂苷3-O-β-D-glucopyranosylplatycodigenin（GP）和3-O-β-D-glucopyranosylplatyconic acid（GPA）為主的7種入血成分，藥代動力學研究表明，兩種主要入血皂苷成分的達峰時間在1小時左右，與桔梗引藥上行的短效性相吻合，同時利用核染料在細胞水平證明了此類皂苷成分能明顯增加細胞膜的通透性，導致進入細胞內的化合物量增加，初步闡明了桔梗“引藥上行”作用的體內物質基礎及作用途徑。
