《siRNA靶向下調14-3-3基因對房水流出通道的影響及其作用機制》是依託中山大學，由余敏斌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：siRNA靶向下調14-3-3基因對房水流出通道的影響及其作用機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：余敏斌
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
青光眼是中樞神經系統疾病在眼部的表現。小梁細胞凋亡和細胞骨架改變是原發性開角型青光眼主要細胞和分子變化。研究表明14-3-3蛋白是調控細胞骨架和凋亡的重要蛋白，與神經系統疾病艾爾茲海默症發病密切相關。我們前期蛋白質組學研究首次發現人眼小梁網高表達14-3-3蛋白，地塞米松作用能引起14-3-3蛋白表達減少及亞細胞定位變化。我們推測14-3-3蛋白可能也直接調控小梁細胞凋亡和細胞骨架，在青光眼發病機制中起重要作用。本課題分別在地塞米松和H2O2誘導的小梁細胞骨架變化和凋亡模型，研究14-3-3及其下游信號通路（cofilin和ASK1）的表達變化，探討14-3-3蛋白調控小梁細胞骨架和凋亡的機制；同時在動物體內利用RNA干擾技術下調14-3-3表達，觀察14-3-3蛋白對房水引流的影響。結果有望進一步闡明青光眼發病機制，為青光眼基因治療奠定基礎。
結題摘要
小梁細胞在小梁網房水流出途徑中扮演著最為關鍵的角色，小梁細胞功能和性狀的改變是原發性開角型青光眼重要發病機制之一。小梁細胞的收縮和與細胞外基質的粘附等功能依賴於肌動蛋白纖維和細胞骨架的調控。小梁細胞的內質網應激與其凋亡密切相關。近年國內外文獻報導，14-3-3蛋白與多種細胞骨架調控蛋白和內質網應激相關蛋白結合，參與細胞骨架重塑和內質網應激通路的調控。但其在小梁細胞的功能未見報導。本研究在執行先前的的計畫要點的同時，其研究結果主要分為以下三方面：（1）觀察14-3-3蛋白不同亞型在小梁細胞和正常人眼小梁網組織中的表達和分布；（2）通過siRNA下調小梁細胞14-3-3zeta蛋白表達量，觀察正常培養狀態和TGF-beta1誘導的RhoA信號通路激活時，14-3-3zeta蛋白對小梁細胞骨架形態和相關信號通路的影響；（3）通過改變14-3-3zeta蛋白表達，研究該蛋白在衣黴素誘導的小梁細胞內質網應激模型中對內質網反應標記物GRP78表達的影響；旨在進一步闡明原發性開角型青光眼小梁細胞骨架變化的具體機制，為尋找可能的藥物治療靶點提供新方向。研究成果發表SCI論文 篇，3次在國內外眼科學術會議上進行交流，培養畢業博士研究生兩名，在讀博士研究生一名。
