miR-205 在VEGF促卵巢癌細胞侵襲中的開關作用

《miR-205 在VEGF促卵巢癌細胞侵襲中的開關作用》是依託中南大學，由吳曉英擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：miR-205 在VEGF促卵巢癌細胞侵襲中的開關作用
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：吳曉英
• 依託單位：中南大學

項目摘要

卵巢癌是婦科最惡性的腫瘤，發病率和死亡率高、易轉移，目前仍缺乏有效篩查與早期診斷手段。項目分析前期篩選的miR-205及其候選靶蛋白Ezrin、Lamin A/C的表達及VEGFR 磷酸化與卵巢癌細胞侵襲性、卵巢癌臨床分級、病理分型及轉移的相關性。比較VEGF 誘導後細胞侵襲性的變化及與miR-205 表達水平的關係。miR-205沉默及過表達細胞系的功能研究、動物實驗及突變靶基因3′UTR螢光素酶報告基因研究miR-205對靶蛋白的調控。miR-205、VEGFR沉默及過表達載體雙重轉染卵巢癌細胞系，檢測miR-205表達、VEGFR 磷酸化及功能，進一步證實miR-205的開關導向、與VEGF調控卵巢癌細胞侵襲性的協同作用。首次從miR-205對靶蛋白調控功能的開啟及與VEGF協同作用的全新角度探討卵巢癌細胞侵襲性的調控機制，為發現卵巢癌早期篩查與診斷的標誌分子提供線索。

結題摘要

卵巢癌易侵襲生長及發生早期轉移，但其具體機制尚未明了。項目以兩組配對侵襲性不同的卵巢癌細胞系及臨床標本為研究對象，分析前期篩選的miR-205及其候選靶蛋白Ezrin、lamin A/C的表達及VEGFR 磷酸化、VEGF血清水平與卵巢癌細胞侵襲性、卵巢癌臨床分級、病理分型及轉移的相關性。miRNA 陣列分析、免疫染色、qPCR及WB等進一步證實了VEGF能顯著上調miR-205及下調Ezrin 、 lamin A/C的表達。侵襲實驗、Annexin V-FITC等顯示VEGF能促進卵巢癌細胞侵襲與抑制凋亡。對比研究了VEGF誘導前後miR-205及其靶蛋白對細胞生物學行為的差異影響。雙螢光素酶報告基因顯示miR-205能直接靶向 Ezrin 、 lamin A/C。體內外實驗進一步證實了沉默與過表達miR-205 能調控卵巢癌細胞侵襲、增殖及lamin A/C的表達。故項目研究結果提示VEGF 促卵巢癌細胞侵襲性的部分新機制是通過miR 205調控Ezrin 、lamin A/C差異表達實現的。且更有意義的是lamin A、C異構體在“VEGF- miR205-lamin”軸中存在差異表達，此為進一步研究卵巢癌侵襲轉移的分子機制提供了新的思路。