《mRNA調控蛋白ZBP1抑制乳腺腫瘤轉移的機制研究》是依託汕頭大學，由顧巍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：mRNA調控蛋白ZBP1抑制乳腺腫瘤轉移的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：顧巍
- 依託單位：汕頭大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
前期的研究表明ZBP1能抑制乳腺腫瘤細胞的遷移和侵襲。我們推斷，ZBP1擁有這種抑制能力的一個重要分子機制就是通過對其目標mRNA的有效調控。為了證明ZBP1對mRNA的調控與抑制腫瘤細胞轉移的相關聯繫，我們將闡明ZBP1對影響細胞間粘聯和細胞遷移的5個目標mRNA在定位，翻譯和穩定性方面的調控作用，以及這種調控對乳腺癌細胞極性，細胞間粘連和細胞侵襲行為的影響；其次探討ZBP1和mRNA的作用機制，從分子水平上鑑定目標mRNA同ZBP1結合的順式調控元件（cis-elements），並且在細胞內明確ZBP1-mRNA相互作用對抑制細胞侵襲行為的重要性；最終分別套用人乳腺癌細胞株和人新鮮乳腺腫瘤組織構建人異種移植瘤（xenograft）的小鼠模型，進一步研究ZBP1對抑制人乳腺腫瘤擴散轉移的作用，為揭示ZBP1抑制乳腺腫瘤細胞侵襲的機制提供科學和實驗依據。
結題摘要
本課題的總體目標是探討ZBP1對其目標mRNA的調控機制及該機制對乳腺腫瘤生長轉移的影響。 我們首先在乳腺癌細胞中研究ZBP1對細胞侵襲、遷移等行為的影響。在前期的研究中，我們發現ZBP1能選擇性的與細胞粘連，細胞極性和細胞遷移相關的mRNA結合併影響它們在細胞內的定位和翻譯。這些mRNA包括E-cadherin mRNA，β-actin mRNA等。我們主要研究了ZBP1對上述mRNA在細胞內的定位表達和翻譯的作用機制。結果表明ZBP1對其目標mRNA的調控改變了細胞的極性和運動能力，從而抑制了乳腺癌細胞移動侵襲。該研究成果已在2012年發表在“J. Cell Science” 上（IF 6.25）。 在上述實驗的同時，我們發現了和ZBP1相互作用的微管驅動蛋白KIF11。細胞內KIF11和ZBP1的相互作用能有效的運輸受ZBP1調控的mRNA，從而保證了它們的定位和在細胞特定區間的翻譯。阻斷KIF11和ZBP1的相互作用影響了這些mRNA 的運輸，對細胞極性形成和移動產生影響。該論文已選寫完成並投稿。 我們然後開展了ZBP1抑制人乳腺腫瘤轉移的體內研究。我們將人MDA231/ZBP1-GFP和MDA231/GFP兩個細胞株分別注射到Scid/Scid免疫缺陷型小鼠乳房組織的脂肪墊部位使其產生移植廇並進行了ZBP1抑制腫瘤生長和轉移的研究。實驗結果顯示，ZBP1無論在體內或體外都能抑制腫瘤細胞的生長。更有意思的是，ZBP1的表達明顯的抑制了乳腺腫瘤對肺的轉移和極大的減低了轉移的嚴重程度。我們分別從兩組移植廇中提取了總RNA並利用mRNA晶片技術分析了它們各自的基因表達。我們發現許多和腫瘤生長，腫瘤轉移有關的基因的表達在兩組腫瘤中產生明顯的差異。進一步的研究發現ZBP1能相當廣泛的抑制那些與腫瘤生長和轉移相關的基因的表達。這些結果顯示，ZBP1之所以具有抑制乳腺腫瘤生長和轉移的能力可能是通過對其目標基因的調控。有關數據正在整理，論文也在選寫之中。 為了更好的從臨床角度探討ZBP1對人乳腺腫瘤的作用機制，我們將人乳腺腫瘤新鮮組織移植到鼠乳房組織，開始建立人乳腺移植瘤動物模型。實驗結果與預期相符，相關方法和數據在整理之中。該模型的建立不但能用於進一步研究ZBP1抑制乳腺腫瘤生長和轉移的機制，也為今後其它科研和臨床治療乳腺腫瘤提供了一個平台，有助於發現抑制腫瘤轉移的新手段
