lncRNA參與miR-181調控重症肌無力免疫細胞分化的機制研究

《lncRNA參與miR-181調控重症肌無力免疫細胞分化的機制研究》是依託中南大學，由羅朝輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：lncRNA參與miR-181調控重症肌無力免疫細胞分化的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：羅朝輝
• 依託單位：中南大學

項目摘要

文獻研究顯示microRNA（miRNA）和lncRNA(long non-coding RNA)在調控免疫細胞（T細胞和B細胞）的分化及疾病的發生髮展研究中發揮重要作用。我們前期研究結果顯示miR-181在重症肌無力中表達下調。本項目通過lncRNA晶片結果，結合lncRNA可以調控基因轉錄水平表達理論，同時將lncRNA的ceRNA的概念引入到miR-181在重症肌無力調控機制中，明確miR-181 在重症肌無力中對淋巴細胞的分化的調控作用；揭示lncRNA的異常表達是miR-181在重症肌無力達下調的原因之一。進一步闡明lncRNA既可調控miR-181 的前體的表達，同時也作為ceRNA競爭性結合miR-181，通過miR-181影響免疫細胞的分化機制研究。為重症肌無力的發生髮展機制、診斷分子標誌物的篩選以及臨床治療提供理論基礎和實驗依據。

結題摘要

重症肌無力是神經肌肉接頭相關疾病中最常見的自身免疫性疾病。但是非編RNA的研究甚少，因此我們通過目通過結合前期lncRNA晶片結果，採用螢光素酶報告載體系統、流式細胞分析等技術進行系統研究。 研究發現，MG患者lnc-CXCL1及IFNG-AS表達明顯下降；激素治療有效組中，lnc-CXCL1及IFNG-AS的表達治療後明顯比治療前升高；lnc-CXCL1的表達與MG患者臨床症狀QMG評分呈負相關，而與AchR-Ab濃度之間卻不存在明顯的相關性。IFNG-AS具有相類似的結果。 通過螢光素酶報告基因實驗證實Lnc-CXCL1和IFNG-AS與miR-181a存在結合位點，其表達受其調控。在Jurkat T細胞中，miR-181a能夠下調lnc-CXCL1、IFNG-AS的表達，干擾miR-181a後則上調lnc-CXCL1、IFNG-AS的表達。同時miR-181a對IL-2的表達存在類似表達調控；lnc-CXCL1上調IL-2的表達，同時干擾miR-181a後，lnc-CXCL1對IL-2的表達調控作用消失、IFNG-AS存在相類似的結果。與對照組相比，lnc-CXCL1和miR-181a組可以降低CD4+T的活性，同時lnc-CXCL1、miR-181a組均可降低th1相關轉錄因子T-bet以及CD4+T細胞分泌的IFN-γ的表達。 Lnc-CXCL1、IFNG-AS和miR-181a治療能夠減輕EAMG的臨床症狀評分。miR-181a能降低了th1和th17的比例，上升treg比例；Lnc-CXCL1能降低了th1和th17比例；IFNG-AS能降低th1的比例，上調treg比例，同時他們分別對其相應的細胞轉錄因子具有調控作用。Lnc-CXCL1、IFNG-AS及miR-181a治療組治療後抗T-AchR抗體IgG較對照組明顯下降，其亞型IgGb2的水平亦較對照組明顯下降。 該項目研究明確lnc-CXCL1等在重症肌無力中對淋巴細胞的分化的調控作用；揭示lnc-CXCL1、IFNG-AS的異常表達是miR-181在重症肌無力達下調的原因之一。進一步闡明lnc-CXCL1、IFNG-AS作為ceRNA競爭性結合miR-181，影響免疫細胞的分化機制研究。為重症肌無力的發生髮展機制、診斷分子標誌物的篩選以及臨床治療提供理論基礎和實驗依據。