《hTSHR胞外區三個片段的原核表達產物免疫活性分析》是依託蘭州大學,由陳慧擔任項目負責人的專項基金項目。
基本介紹
- 中文名:hTSHR胞外區三個片段的原核表達產物免疫活性分析
- 依託單位:蘭州大學
- 項目負責人:陳慧
- 項目類別:專項基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
根據人促甲狀腺激素受體(hTSHR) 胞外區(ecd)的結構特點和TSAb或TSBAb的分布趨勢,將TSHR胞外區的編碼基因劃為三段,採用分子生物學技術在原核系統中分三段表達,這些重組蛋白片段分別與Graves'病和特發性粘液性水腫患者血清(即TSAb或TSBAb)反應,測定不同片段中TSAb和TSBAb水平差異,篩選對TSAb和/或TSBAb陽性血清呈現特異性結合的優勢片段,並將血藍蛋白與原核表達的hTSHRn、hTSHRm、hTSHRc融合蛋白耦聯,間隔15 d,注入BALB/c小鼠腹腔內共5次,對照組注射生理鹽水,比較各組間血清FT3、FT4、TSH、促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)、促甲狀腺激素受體刺激抗體(TSAb)、促甲狀腺激素受體阻滯抗體(TBAb)水平及甲狀腺組織病理變化進一步明確各片段的免疫原性,為探討AITD的發病機制和開發TSAb和TSBAb特異性檢測試劑盒奠定基礎。
結題摘要
根據人促甲狀腺激素受體(hTSHR) 胞外區(ecd)的結構特點和TSAb或TSBAb的分布趨勢,將TSHR胞外區的編碼基因劃為三段,採用分子生物學技術在原核系統中分三段表達,這些重組蛋白片段分別與Graves'病和特發性粘液性水腫患者血清(即TSAb或TSBAb)反應,測定不同片段中TSAb和TSBAb水平差異,篩選對TSAb和/或TSBAb陽性血清呈現特異性結合的優勢片段(已完成),並將血藍蛋白與原核表達的hTSHRc融合蛋白耦聯,間隔15 d,注入BALB/c小鼠腹腔內共5次,對照組注射生理鹽水,比較各組間血清T4、TSH、促甲狀腺激素受體抗體TRAb水平及甲狀腺組織病理變化,結果顯示:與對照組相比,實驗組大部分小鼠血清T4水平下降,TRAb呈陽性,甲狀腺組織病理無明顯變化,表明hTSHRc片段可以刺激小鼠產生TRAb,可能具有TSBAb抗原表位。hTSHRn片段的免疫原性研究正在進行中。