《ZBTB24基因在獲得性免疫應答中的作用及其機制研究》是依託蘇州大學，由王俊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ZBTB24基因在獲得性免疫應答中的作用及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王俊
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
ZBTB24屬於一個大的含有鋅指和BTB域的蛋白家族。我們最近的研究發現一部分先天性免疫缺陷綜合症(ICF)患者有ZBTB24基因突變。此類患者血液中T和B細胞計數正常，但血清免疫球蛋白水平極低，其T細胞體外增殖能力也大大減弱。這表明ZBTB24在細胞和體液免疫中都有著關鍵作用。已知某些鋅指和BTB蛋白家族的成員蛋白（如ZBTB27）可作為轉錄因子而影響B/T細胞發育和功能。前期研究顯示ICF病人體內沒有記憶性B細胞(Bm)和淋巴結生髮中心(GC)，但其B細胞經體外刺激後可釋放正常水平的IgM/G。由於Bm和抗體的產生主要依賴於GC中B和濾泡輔助性T（Tfh）細胞，本課題將探討ZBTB24在GC B和Th細胞的分化、存活和功能中的作用及分子機制，包括功能域解析、靶基因確認、相互作用蛋白鑑別等。此外還檢測類風濕關節炎患者中ZBTB24的表達水平以探討其在自身免疫性疾病病理過程中的可能作用。
結題摘要
ZBTB24是一部分常染色體隱性遺傳性免疫缺陷、著絲粒不穩定和面部異常綜合症ICF患者的致病基因。基因突變導致在這些ICF患者中ZBTB24蛋白表達的缺失，所導致的臨床表現主要是反覆的呼吸道和消化道感染，與之相對應的免疫學特徵是血清中沒有或僅有極低水平的免疫球蛋白。然而，外周血中T/B細胞的數量在絕大多數ICF患者中是正常的。這些數據提示，ZBTB24對淋巴細胞的發育無決定性影響，但在體內抗體的產生過程中不可或缺。在國家自然科學基金委的支持下，我們對ZBTB24在淋巴細胞內的表達情況及功能進行了研究。本研究的主要目的是檢測ZBTB24在淋巴細胞中的表達情況並探討其所參與調節的免疫學過程。我們首先利用流式分選結合定量PCR的方法系統的檢測了ZBTB24在T和B細胞中的表達情況，然後我們利用慢病毒系統來調控了ZBTB24在B細胞株中的表達水平，以觀察其對細胞功能的影響；我們還利用RNA-seq等檢測了ZBTB24作為轉錄因子在B細胞中的靶基因；最後我們還構建了ZBTB24的條件性敲除小鼠。重要研究結果如下：（1）ZBTB24在B細胞中的表達水平要高於CD4+ Th細胞; （2）在小鼠系統中，ZBTB24選擇性的高表達在生髮中性B 細胞上，而在外周其它各B細胞亞群及骨髓B細胞各發育階段中無顯著差異；（3）在體外誘導分化的Th1,Th2, Th17和Tfh細胞中，ZBTB24的表達水平無顯著差異，啟示其在此過程中無大的作用；（4）下調ZBTB24顯著抑制了人B淋巴細胞株Raji細胞的增殖，這主要是通過抑制細胞周期而實現的（G1期到S期的轉換），此效果可能是通過上調IRF-4 and Blimp-1的表達而實現的，但卻與BCL-6無關，因ZBTB24不影響BCL-6的表達水平和功能；（5）RNA-seq結果還提示ZBTB24調控了BCR的組分之一CD79a的表達水平。由於CD79a的基因突變也可導致外周循環系統中抗體水平的缺失，這些結果提示，ZBTB24可通過調控BCR信號通路及B細胞在生髮中心內的增殖過程而參與了抗體免疫應答的過程。這些結果不僅能增強我們對B細胞生物學功能及抗體免疫應答過程中分子調控機制的了解，而且在感染、腫瘤和自身免疫性疾病的預防及治療方面也具有潛在的套用價值。
