《YAP/TAZ在小鼠胚胎著床過程中的作用及其機制》是依託吉林大學，由郭斌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：YAP/TAZ在小鼠胚胎著床過程中的作用及其機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：郭斌
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胚胎著床是哺乳動物妊娠建立過程中的一個關鍵環節，其機理十分複雜。YAP和TAZ是Hippo和Wnt信號通路中的主要效應因子，可調節細胞的增殖、分化以及凋亡等生理過程。我們前期基因晶片分析發現，與非著床位點相比，YAP和TAZ在小鼠子宮胚胎著床位點的表達顯著上調，提示YAP和TAZ可能與小鼠胚胎著床過程密切相關。關於YAP和TAZ在胚胎著床過程中的功能與調節目前尚未見報導。本項目擬利用早期妊娠、假孕、人工誘導蛻膜化、延遲著床等動物模型，採用免疫組織化學、基因過表達、RNAi等技術，研究YAP和TAZ在小鼠胚胎著床期子宮中的表達規律及其對小鼠子宮內膜細胞增殖、凋亡等的影響，探討YAP和TAZ與胚胎著床相關基因KLF5、BMP2、LIF、VEGF-A等的關係，揭示YAP和TAZ在小鼠胚胎著床過程中的作用及其機制，為進一步闡明胚胎著床的分子機理、動物繁殖率的提高及不孕症的治療等提供理論依據。
結題摘要
本研究利用原位雜交、RNA干擾、基因過表達、流式細胞術等技術，研究YAP/TAZ在小鼠圍著床期子宮中的表達及其對子宮基質細胞增殖、分化與凋亡的影響，探討YAP/TAZ與HB-EGF、Bmp2、Wnt4、Rrm2和Foxm1間的相互關係，闡明TAZ在過氧化氫誘導的子宮蛻膜化氧化損傷過程中的保護作用。結果發現，TAZ高表達於子宮蛻膜化細胞中，可促進子宮基質細胞的增殖活性，誘使S期細胞增多，增加Ccnd3和Cdk4的表達；TAZ可增強子宮蛻膜化標誌分子Prl8a2和Prl3c1的表達及ALP的活性，提示TAZ在子宮蛻膜化過程中起重要作用。沉默TAZ可減弱HB-EGF對子宮基質細胞增殖與分化的調節。在子宮基質細胞中轉染TAZ siRNA後，細胞凋亡率並不發生明顯改變。在子宮基質細胞氧化損傷模型中，HB-EGF可減少ROS、超氧陰離子和MDA含量，使mtDNA拷貝數、ATP和線粒體膜電位水平得到恢復，並促進TAZ的表達。進一步研究發現，過表達TAZ可增強SOD、CAT和GPX抗氧化酶及線粒體複合物I和III的活性，提高GSH在子宮基質細胞中的含量及GSH/GSSG比值，使mtDNA拷貝數和ATP水平得到恢復，進而減弱子宮基質細胞的氧化損傷，添加GPX、線粒體複合物I和III抑制劑可阻止TAZ過表達對子宮基質細胞氧化損傷的保護作用；沉默TAZ則呈現出相反的效應，並增強NOX酶活性，添加NOX抑制劑Apocynin後，子宮蛻膜化損傷可得到緩解。同時，YAP高表達於子宮蛻膜化細胞中，抑制YAP可減弱子宮基質細胞的增殖活性，導致S期細胞減少，但增加子宮基質細胞的分化。Bmp2和Wnt4可誘導YAP在子宮基質細胞中的表達，而添加YAP抑制劑Verteporfin或轉染YAP siRNA後，Rrm2和Foxm1的表達受到了明顯的抑制。研究結果可為進一步探明子宮蛻膜化的調控機理提供依據。
