Vδ1 γδT細胞體外擴增及抗腫瘤的機制研究

《Vδ1 γδT細胞體外擴增及抗腫瘤的機制研究》是依託浙江大學，由武當擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Vδ1 γδT細胞體外擴增及抗腫瘤的機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：武當
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

惡性腫瘤高居我國居民死因之首，γδT細胞是腫瘤過繼免疫治療的關鍵細胞之一，然而外周血Vδ2主要亞群因激活誘導死亡和免疫抑制導致持續抗腫瘤效應欠佳。我們前期研究顯示，外周血Vδ1 γδT細胞的結腸癌殺傷能力強於Vδ2亞群，且能被有絲分裂原PHA和IL-7優勢擴增並顯著增強其細胞毒作用而不誘導免疫抑制。進一步研究顯示，培養體系中加入共刺激分子可提高Vδ1 γδT細胞體外擴增效率。據此我們假設，PHA、共刺激分子、細胞因子協同刺激可促進Vδ1 γδT細胞大量擴增，並提高其抗腫瘤及抗原提呈功能，逆轉其激活相關免疫抑制。本項目擬以完善的臨床免疫研究平台為依託，採用人生物樣本，以結腸癌為抗腫瘤研究模型，探索PHA、共刺激分子、細胞因子協同優勢擴增Vδ1 γδT細胞的最佳培養體系，闡明其體外擴增及抗腫瘤機制。該項目的完成將進一步豐富γδT細胞激活擴增免疫學理論，也能為臨床過繼免疫治療腫瘤提供新的思路。

結題摘要

γδT細胞是腫瘤過繼免疫治療的關鍵細胞之一，然而外周血Vδ2主要亞群因激活誘導死亡和免疫抑制導致持續抗腫瘤效應欠佳。我們前期研究證明激活的 Vδ1 γδT 細胞具有更強的腫瘤殺傷作用，是更有前景的腫瘤過繼免疫治療候選細胞，然而目前缺尚乏選擇性激活擴增 Vδ1 γδT 細胞至足夠數量用於臨床試驗的方法。在研究過程中，我們首先分析了人新鮮外周血 γδT 細胞亞群比例、特徵及抗腫瘤功能; 通過不同PHA、TLRs激動劑和細胞因子組合對Vδ1 γδT 細胞體外培養體系進行最佳化；最後明確了最佳化體系體外擴增後Vδ1 γδT 細胞的體內外抗腫瘤功能。通過本項目的研究，我們發現健康人、結腸癌病人新鮮外周血中以Vδ2 γδT細胞亞群為主，結腸癌組織中以Vδ1細胞亞群為主。新鮮外周血Vδ1細胞高表達細胞毒作用相關分子和共刺激分子，對結腸癌細胞的殺傷能力強於Vδ2細胞。對培養體系進一步最佳化發現，TLRs激活可能進一步促進Vδ1細胞體外擴增，然而並未明顯提高Vδ1細胞比例和數量。而在原有培養體系PHA+IL-7基礎上加入IL-4能明顯促進Vδ1細胞擴增。PHA+IL-7+IL-4體系擴增後Vδ1 細胞高表達細胞毒作用相關分子和抗原提呈相關分子。PHA+IL-7+IL-4體系擴增後Vδ1細胞對結腸癌細胞的殺傷能力顯著增強，並顯示出較強的體內抗腫瘤作用。 本項目研究為豐富 γδT 細胞激活擴增免疫學理論研究提供科學依據，也能為臨床過繼性細胞免疫治療腫瘤提供新的思路，具有重要的科學意義和潛在的臨床套用價值。