《UbcM2/Nrf2途徑在視網膜光氧化應激損傷中的作用及意義》是依託上海交通大學，由宮媛媛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：UbcM2/Nrf2途徑在視網膜光氧化應激損傷中的作用及意義
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：宮媛媛
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
光致視網膜氧化應激損傷導致視網膜色素上皮（RPE）及光感受器細胞凋亡，最近課題組發現泛素結合酶UbcM2在光感受器細胞以及RPE細胞上高表達，光損傷後UbcM2表達減少，給予外源性UbcM2可促進Nrf2表達，其機制及意義尚不清楚。Nrf2是細胞內主要的抗氧化應激轉錄因子，其穩態與特異的泛素-蛋白酶體系統(UPS)泛素化降解有關，UbcM2是UPS-E2中重要的結合酶之一。由此推測，UbcM2對Nrf2有調控作用，特別對於視網膜外層細胞有重要意義。為此，本研究將通過基因轉染調節UbcM2水平，體外體內實驗觀察形態功能及活性氧(ROS)變化；利用雙螢光素酶報告基因等技術，探討UbcM2對Keap-1/Nrf2/ARE活性及下游靶基因的影響，闡明其分子機制；套用抑制劑MG132阻斷UPS，檢測Nrf2表達，發掘新的調控分子，為光損傷相關性視網膜變性類疾病提供新的防治靶點。
結題摘要
本課題旨在研究槲皮素對人視網膜色素上皮細胞的保護作用。300 μM的過氧化氫處理後，在色素上皮細胞培養液中加入不同濃度的槲皮素作用。經細胞活力實驗和活性氧的測定選出槲皮素的最佳作用濃度。利用免疫蛋白印跡和免疫螢光實驗，檢測細胞中Nrf2信號通路的相關蛋白因子；利用免疫蛋白印跡實驗，檢測內質網應激相關因子和凋亡蛋白。結果表明，槲皮素可以干預細胞的氧化應激損傷，尤其是在作用濃度為 20 μM時。槲皮素干預組的ROS量相對於其他實驗組降低，Nrf2 和下游的NQO1, HO-1表達量增加，而內質網應激因子Bip, CHOP, P-eIF2α均有減少，細胞凋亡相關蛋白Bax表達下調，Bcl-2表達上調。這說明槲皮素能夠通過激活Nrf2通路，減少內質網應激，增加抗凋亡蛋白對過氧化氫作用損傷的人視網膜色素上皮細胞發揮保護作用。
