《Tudor-SN蛋白調控細胞周期的分子機制研究》是依託天津醫科大學，由楊潔擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Tudor-SN蛋白調控細胞周期的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊潔
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本課題組長期從事Tudor-SN蛋白結構與功能的系統研究，發現它由SN和Tudor兩個功能片段組成。近期我們發現它在腫瘤細胞中高表達，相反在肌肉和粒細胞等終末期細胞中不表達。深入研究發現它可以促進G1/S進程；且其Thr-103位點可以被CDK1磷酸化。基於此我們提出本項目的構想：Tudor-SN參與調控細胞周期和細胞增殖，在細胞應激損傷下，參與DNA損傷修復，對細胞起保護作用。我們將利用HeLa細胞和獨有的Tudor-SN基因敲除MEF細胞，通過周期同步化、流式測定、甘油密度梯度離心、免疫共沉澱等方法探討Tudor-SN是否被CDK2/CDK4/CDK6等磷酸化，調控E2F1/Rb的結合促進G1/S期進程；是否作為CDK1底物，Thr-103位點特異性磷酸化後，調控G2-M期進程；在UV誘導損傷下，p53激活CDK1過度磷酸化，是否促進Tudor-SN磷酸化，參與DNA損傷修復。
結題摘要
本課題組長期從事多功能Tudor-SN蛋白的結構與功能研究。近期我們發現它在腫瘤細胞中高表達，並可以促進G1/S進程；且其Thr-103位點可以被CDK1磷酸化。基於此我們提出構想：Tudor-SN參與調控細胞周期和細胞增殖，在細胞應激損傷下，參與DNA損傷修復，對細胞起保護作用。 1： Tudor-SN蛋白參與細胞周期調控，是促進G1期向S期進展的重要調節因子。機制探討發現Tudor-SN蛋白作為G1/S期CDK類蛋白激酶的底物，通過與E2F1形成複合物，募集GCN5至E2F-1轉錄複合體，促進S期基因的轉錄活性，進而促進細胞周期G1期向S 期的進程。該研究為進一步揭示Tudor-SN蛋白參與腫瘤發生髮展的機制提供理論依據。 2：以第一部分為基礎，揭示了乳腺癌細胞中Tudor-SN與TGF-β通路存在著互動調控作用，一方面乳腺癌細胞內TGFβ的過度激活導致了Tudor-SN表達水平的異常升高，另一方面過度表達的Tudor-SN又可以通過募集組蛋白乙醯化酶GCN5至TGF-β通路下游蛋白Smad2/3/4的啟動子區域，促進Smad基因的轉錄表達，從而促進乳腺癌細胞的增殖及轉移。該研究進一步證實了Tudor-SN與乳腺癌轉移的相關性，提示Tudor-SN可以作為乳腺癌轉移的分子標誌物，為乳腺癌的分子診斷提供了新的指標。 3：應激刺激造成DNA損傷後Tudor-SN蛋白可以被募集到DNA損傷位點，進一步促進DNA損傷信號經ATM及其介導的磷酸化通路的傳遞，繼而激活下游的效應分子，引起G2/M期周期阻滯及DNA損傷修復。該研究為進一步揭示Tudor-SN在腫瘤發生髮展及化療放療敏感性中的作用奠定了基礎。 4：除了DNA損傷應激外，我們還揭示了氧化應激條件下，Tudor-SN作為應激顆粒的重要組成成分，影回響激顆粒的形成及大小，在此過程中JNK激酶對其T103位點的磷酸化修飾具有重要意義。
