《T-型鈣通道Cav3.2參與偏頭痛發生及機制研究》是依託蘇州大學，由陶金擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：T-型鈣通道Cav3.2參與偏頭痛發生及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陶金
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
偏頭痛是一類周期性發作的神經系統疾病，其發病機制迄今仍未明確。我們的前期研究結果顯示：T-型鈣通道Cav3.2在中小直徑三叉神經節（TG）神經元中大量表達。誘導偏頭痛先兆發作後TG神經元Cav3.2通道蛋白表達顯著增高，提示Cav3.2可能參與偏頭痛的病理生理。本項目在前期研究的基礎上，套用行為學、組織化學、分子生物學及電生理等實驗方法，首先研究Cav3.2對小鼠偏頭痛行為學及皮層擴散性抑制的影響；其次闡明TG內Cav3亞型的表達/定位及Cav3.2對TG神經元功能活動及信號轉導蛋白磷酸化的影響；最後揭示Cav3.2對TG神經元突觸遞質釋放、神經元興奮性改變、離子通道電流變化及胞內鈣震盪的影響及機制。研究結果不僅將揭示Cav3.2參與偏頭痛發生的細胞及分子機制，有助於發展和完善偏頭痛的病因學說，而且也將為偏頭痛的臨床治療和研發理想的藥物提供新的分子靶標。
結題摘要
偏頭痛是一類複雜的三叉神經血管系統疾病，其機制未明，迄今臨床缺乏有效的治療措施。本項目在前期研究的基礎上，套用行為學、組織化學、分子生物學及電生理等實驗方法，首先研究T-型鈣通道亞型Cav3.2對小鼠行為學及皮層擴散性抑制的影響；其次闡明三叉神經節（TG）內Cav3亞型的表達/定位及Cav3.2對TG神經元功能活動及信號轉導蛋白磷酸化的影響；最後揭示Cav3.2對TG神經元突觸末梢遞質釋放、神經元興奮性改變、離子通道電流變化及胞內鈣震盪的影響及機制。我們的研究結果顯示：1、小鼠運動及平衡能力（轉軸實驗）和自主活動（開場實驗）結果表明Cav3.2亞型對小鼠的自主運動能力無影響。畏光實驗中，硬腦膜刺激模型組Cav3.2亞型阻斷後小鼠進入明區次數顯著增加，提示Cav3.2阻斷可導致小鼠畏光反應顯著下降。TG核團定位注射，免疫螢光及蛋白電泳顯示TG神經元Cav3.2基因能被shRNA有效沉默。2、TG內Cav3.2基因沉默使硬腦膜刺激誘發的小鼠畏光反應顯著下降。3、共聚焦雷射顯微鏡研究結果顯示，Cav3.2在外周感覺神經元中與IB4及CGRP有顯著共表達，而與NF200共染色較少。4、Cav3.2降低顯著地降低了DH-TG神經元突觸間的遞質釋放；Cav3.2亞型與A型鉀離子通道亞單位Kv4.2存在蛋白物理性結合，進而調控小直徑TG神經元興奮性。5、電刺激上矢狀竇區硬腦膜能夠明顯增加TG神經元的興奮性，並增加高電壓鈣離子通道電流密度，選擇性增加IB4陰性的小直徑TG神經元的高電壓鈣通道和低電壓鈣通道電流密度，同時抑制A-型鉀離子通道電流密度，但對鈉通道和延遲整流型鉀離子通道電流密度無明顯影響。綜上所述，我們的研究結果不僅將揭示Cav3.2參與偏頭痛發生的細胞及分子機制，有助於發展和完善偏頭痛的病因學說，而且也將為偏頭痛的臨床治療和研發理想的藥物提供新的分子靶標。
