《Spata16基因在小鼠精子發生過程中的作用機理研究》是依託北京大學，由黃衛人擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Spata16基因在小鼠精子發生過程中的作用機理研究
- 項目負責人：黃衛人
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
精子發生相關蛋白-16(SPATA16)在精子發生過程中發揮重要作用，其突變導致精子頂體缺陷和圓頭精子症，但作用機制不明確。本項目前期研究發現，SPATA16與頂體形成相關蛋白PICK1存在相互作用，PICK1對頂體蛋白的轉運起重要作用，因此推測SPATA16可能與PICK1相互作用參與頂體形成和精子變形過程。本項目擬：（1）採用免疫螢光共定位和免疫電鏡方法觀測SPATA16蛋白在小鼠精子發生過程中的定位及表達特性；（2）利用GST pull-down、免疫共沉澱等方法確定SPATA16與PICK1蛋白相互作用及其作用的分子基礎；（3）運用免疫螢光技術分析SPATA16和PICK1相互作用在頂體形成和精子變形過程中的生物學功能，細胞水平揭示其生物學功能的作用機制。本項目對進一步闡明SPATA16在精子發生中的作用機制具有重要學術意義，也將為圓頭精子症的發生機理研究、基因診斷和臨床治療提供理論依據
結題摘要
人類精子發生相關蛋白-16(SPATA16)在精子發生過程中發揮重要作用，其突變導致精子頂體缺陷和圓頭精子症，但在精子發生過程中具體的生理功能和作用機制不明確。在本項目中，我們通過製備特異性的SPATA16抗體，研究了SPATA16在小鼠組織中的特異表達，結果發現SPATA16為睪丸特異性表達，其表達量隨著精子發生的過程逐步增加，在出生後6周達到最高值。項目通過免疫螢光共定位和免疫電鏡方法觀測SPATA16蛋白在小鼠精子發生過程中表達在睪丸細胞的細胞質，其亞細胞定位與高爾基體重合，推測其有可能參與高爾基體相關功能。項目利用酵母雙雜交技術研究發現SPATA16蛋白與PICK1相互作用，利用GST pull-down方法確定SPATA16與PICK1蛋白相互作用及其作用的分子基礎；之前的研究發現PICK1在精子頂體成熟和頂體蛋白轉運過程中具有重要的作用。因此SPATA16有可能與PICK1聯合參與頂體蛋白的轉運功能。本項目對進一步闡明SPATA16在精子發生中的作用機制具有重要學術意義，也將為圓頭精子症的發生機理研究、基因診斷和臨床治療提供理論依據
