《Sirt1調控hTERT表達在胃癌發生中作用的研究》是依託山東大學，由楊青擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Sirt1調控hTERT表達在胃癌發生中作用的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊青
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
端粒酶逆轉錄酶（hTERT）表達升高導致端粒酶活化被認為是包括胃癌在內的惡性腫瘤逃逸衰老不斷增殖的主要機制。本課題組長期致力於胃癌發病機制的研究，發現胃癌中hTERT表達升高且與腫瘤的大小及轉移密切相關，表觀遺傳學分子可以與c-Myc等轉錄因子相互作用調控hTERT的表達。通過預實驗，我們觀察到新型組蛋白去乙醯化酶Sirt1在胃癌中低表達，且與hTERT基因呈負相關，但Sirt1調控hTERT的具體機制及在胃癌發生中的作用不詳。本項目擬在前期工作的基礎上，利用臨床標本和胃癌細胞株分析胃癌中Sirt1對hTERT的調控作用並在分子水平探討Sirt1調控hTERT表達的具體機制；然後通過體外胃癌細胞株培養和體內裸鼠成瘤實驗，從克隆形成能力、凋亡、衰老和在體成瘤等方面闡明Sirt1調控hTERT在胃癌發生中的具體作用；為揭示胃癌中hTERT的調控機制提供新理論，為胃癌治療提供新的藥物作用靶點。
結題摘要
胃癌是世界範圍內最常見的惡性腫瘤之一，已成為惡性腫瘤中的第二大殺手。目前，表觀遺傳學調控是胃癌發生機理中的研究熱點。組蛋白去乙醯化酶Sirt1的活性發揮依賴於尼克醯胺腺嘌呤二核苷酸（NAD），參與了能量代謝、氧化應激、衰老等過程，但是Sirt1在腫瘤發生髮展中的作用尚無定論。本課題組利用胃癌細胞株和裸鼠等實驗模型的研究發現，Sirt1可以降低胃癌細胞的活性，減弱細胞的克隆形成能力，將細胞周期阻滯於G1期，誘導胃癌細胞衰老並在體抑制胃癌細胞的成瘤能力，起到抑制胃癌生長的作用。惡性腫瘤細胞區別於正常細胞最重要的特徵是細胞可以無限增殖，而端粒酶的激活是細胞越過衰老屏障發生惡性轉化的關鍵步驟。人端粒酶由結構RNA成分、催化亞單位端粒酶逆轉錄酶（hTERT）及相關蛋白組成，其中hTERT被認為是端粒酶活性的限速因子。既往研究顯示，去乙醯化酶Sirt1在酵母甚至哺乳動物的細胞中起到沉默端粒的作用。本課題組的實驗結果顯示，Sirt1對hTERT蛋白的穩定性沒有影響，但是可以降低hTERT的mRNA和蛋白表達水平，減弱端粒酶的活性，提示Sirt1可以調節hTERT基因的轉錄。這一調節作用與轉錄因子c-Myc密切相關，因為將hTERT基因啟動子區的c-Myc結合位點突變後，Sirt1對hTERT的調節作用消失。進一步的研究發現，在胃癌細胞內，Sirt1能夠與c-Myc發生相互結合，通過c-Myc結合在hTERT的啟動子區，調控hTERT基因的啟動子活性。上述實驗說明，Sirt1通過c-Myc抑制hTERT基因的表達。隨後的細胞學和裸鼠成瘤實驗結果顯示，干擾Sirt1對胃癌細胞的促進作用在干擾hTERT基因後均得到回覆，說明Sirt1通過負向調控hTERT起到抑制胃癌的作用。隨後本課題組在臨床標本中對Sirt1的表達情況及其與hTERT表達的相關性進行分析。檢測結果顯示，Sirt1在胃癌組織中表達明顯降低，且Sirt1的表達水平與hTERT呈負向相關，說明Sirt1通過抑制hTERT參與了胃癌的發生髮展過程。本研究闡明了Sirt1在胃癌發生過程中的作用及具體調控機制，為開發有效防治胃癌的藥物提供了新靶點。
