《Semaphorin4D/CD100調節糖尿病慢性創面癒合的作用及機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由劉蓓擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Semaphorin4D/CD100調節糖尿病慢性創面癒合的作用及機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉蓓
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
糖尿病慢性創面是外科經常遇到的難題，目前在臨床上仍缺乏有效的治療方法。血管病變引起的組織細胞慢性缺血缺氧是其發生的重要原因，但分子機制尚未完全闡明。文獻報導和我們前期研究表明，免疫信號蛋白CD100不僅是創面癒合起始階段的關鍵分子，並且在體內外都可誘導強有力的血管新生。我們前期初步臨床研究中發現，糖尿病足潰瘍組織中CD100表達較急性創面顯著降低，但CD100表達下降是否和糖尿病足患者病情相關，補充外源CD100能否通過促進血管生成而促進創面癒合還不清楚。本課題擬在前期基礎上擴大糖尿病足患者樣本的收集，分析CD100及其受體表達同病情、病程及預後的關係；利用糖尿病小鼠慢性創面模型及缺氧高糖內皮細胞培養模型，通過加入外源CD100及調節受體信號，探討其對創面癒合進程、血管生成作用及內皮細胞功能的影響，目的是闡明CD100參與糖尿病慢性創面癒合的作用及機制，為糖尿病慢性創面藥物治療探索新靶點。
結題摘要
糖尿病慢性創面是外科經常遇到的難題，目前在臨床上仍缺乏有效的治療方法。免疫信號蛋白CD100不僅是創面癒合起始階段的關鍵分子，並且在體內外都可誘導強有力的血管新生。但是關於CD100和慢性創面癒合的關係還未有深入研究。方法 本研究選取人急性創面、慢性創面、及正常組織標本，用免疫組化染色的方法分析CD100分子在上述不同類型皮膚組織中的表達差異；製備BKS糖尿病小鼠創面模型，創面局部皮下注射CD100 250 ng（50µl），對照組注射PBS，術後隔天拍照計算創面面積占原始面積比率。HE和Masson染色作組織學檢查，CD34免疫組化染色標記新生血管，CD68染色標記巨噬細胞檢測評價炎症狀態；CD100-/-小鼠製備創面模型， 通過外源補充CD100研究創面癒合的過程。 結果 人正常皮膚組織中CD100主要表達於表皮，其中胞膜高表達，真皮不表達；急性創面中表皮CD100膜表達水平顯著降低。慢性創面中CD100在表皮組織低表達而真皮表達顯著升高。糖尿病小鼠組織學結果表明第7、13、21天CD100組表皮與真皮的新生評分顯著優於PBS組（P＜0.05）；肉芽組織厚度評分在第7、13天大於PBS組，第21天小於PBS組（P＜0.05），膠原重塑優於PBS組。在各個時間點CD100組血管化程度優於PBS組（P＜0.05）；炎症狀態輕於PBS組（P＜0.05）。CD100-/-小鼠在創面建立後第13天，創面基本完全癒合，整個創面癒合過程中，補充CD100組小鼠創面癒合速度明顯快於對照組，兩組間差異具有統計學意義（P＜0.05） 結論 在人皮膚組織損傷早期，表皮組織膜型CD100的脫落可能對創面癒合發揮重要作用，慢性創面中表皮膜型CD100水平過低不能脫落釋放到創面局部可能和創面難愈有關。在糖尿病小鼠和基因敲除鼠CD100-/-小鼠創面模型上，局部套用外源性的CD100分子，能夠通過促進創面的血管化，減輕炎症反應促進糖尿病小鼠創面癒合。本項目研究為闡明CD100參與創面癒合過程的作用提供了理論及實驗依據。可溶型CD100分子可能成為潛在的糖尿病慢性創面治療藥物。
