《STAT3異構體的表達與I期非小細胞肺癌預後的關聯性分析》是依託上海交通大學，由趙珩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：STAT3異構體的表達與I期非小細胞肺癌預後的關聯性分析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙珩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肺癌是最常見惡性腫瘤，根治性手術後的I期非小細胞肺癌(NSCLC)患者仍有40％術後5年出現復發或轉移。說明有一些NSCLC的早期基因突變類型決定其復發和轉移性特徵。Stat3持續激活與肺癌發生髮展密切相關，阻斷JAK-STAT3信號轉導通路可以抑制肺腫瘤細胞生長。通過肺癌組織Stat3基因分析，我們發現Stat3由於內含子突變導致的另類剪下,從而表達52KD小分子STAT3蛋白異構體。我們提出科學假說：Stat3基因在肺癌細胞的獲功能性突變或異體表達是導致腫瘤異質性的關鍵因素，並導致腫瘤原位復發和轉移。圍繞這一假說，我們將鑑定Stat3異構體表達的基因調控功能和對腫瘤細胞生長轉移影響；並將其與病理資料、預後等進行分析，闡明STAT3異構體表達與I期肺癌患者預後關聯性。本課題實施將加深對肺癌發生髮展和復發機理的理解。
結題摘要
前期根據基因組測序結果我們推測在肺腫瘤組織中存在STAT3的斷裂體，這個斷裂體可能參與肺癌的發生髮展。本年度我們在相應的肺癌細胞系及腫瘤組織中進一步驗證了這個斷裂體的存在，我們首先選取了非小細胞肺癌的癌組織和癌旁組織進行驗證，結果表明斷裂體在部分肺腫瘤患者中發生並且均在癌組織中發現，在癌旁組織中沒有檢測到。根據斷裂體分子量的大小，我們推測在STAT3蛋白300-355位的胺基酸範圍內有一個精確的斷裂位點，進一步的實驗發現STAT3-(1-355)在細胞內不需要外源細胞因子的刺激就可以獨立入核，並且在細胞核內成不均勻分布，說明STAT3-N端的斷裂體可能直接進入細胞核調控基因轉錄。我們根據CHIP克隆實驗和CHIP晶片實驗發現，有一組新的序列能夠和STAT3結合，我們命名為AGG序列，另外EMSA實驗和DNA 共沉澱實驗顯示，STAT3可以和AGG序列結合，構建一系列的突變體表明STAT3結合在第二個AGG序列的位置，雙螢光素酶報告基因實驗顯示STAT3可以調控AGG序列，進一步我們發現STAT3-N端的斷裂體可以被CBP顯著乙醯化修飾，進一步實驗表明CBP調控的STAT3-N端斷裂體的乙醯化修飾有獨立調控AGG序列的能力。通過AGG核酸的共沉澱實驗表明，STAT3-N端的斷裂體可以被AGG序列拉下來。敲除掉170-180位的胺基酸會破壞STAT3對AGG序列的調控。綜上，前期我們通過一系列的實驗發現肺腫瘤樣本中表達STAT3-N端斷裂體，進一步實驗表明這個斷裂體有獨立並且持續調控基因轉錄的功能。表達STAT3-N端斷裂體的細胞是否參與了細胞的惡性轉化及遷移等過程，還需要進行進一步的驗證。
