《SMB基因在擬南芥細胞脫分化中的作用及機制研究》是依託同濟大學,由杜喜玲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:SMB基因在擬南芥細胞脫分化中的作用及機制研究
- 項目類別:青年科學基金項目
- 項目負責人:杜喜玲
- 依託單位:同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
植物細胞經歷脫分化可以形成具有分生能力的胚性細胞,個體發育中側根的發生、組織培養形成愈傷等都涉及到細胞脫分化。脫分化是愈傷組織形成的關鍵環節,但植物細胞脫分化的分子機制尚不清晰。為了分離鑑定植物細胞脫分化相關基因,我們前期以擬南芥脫分化突變體kyp-2葉柄為材料,與野生型葉柄對照,鑑定出脫分化相關基因SMB(SOMBRERO)。本課題擬進一步分析SMB基因在脫分化進程中的表達模式以及表達量的變化;利用顯微及亞顯微技術分析驗證SMB基因缺失或過表達對擬南芥細胞脫分化進程的影響;通過互補測驗分析證明SMB基因能夠恢復kyp-2突變體的脫分化能力,從而鑑定SMB基因在擬南芥細胞脫分化進程中的作用;並通過染色質免疫共沉澱分析SMB基因轉錄活性是否受H3K9、H3K4甲基化修飾的調控。通過本課題,為植物細胞脫分化分子機制深入研究奠定基礎,為組織培養技術的廣泛套用提供理論依據和支持。
結題摘要
植物細胞具有全能性,經歷脫分化後可以形成具有分生能力的胚性細胞,個體發育中側根的發生、組織培養形成愈傷等都涉及到細胞脫分化。近些年,植物細胞脫分化的分子機制研究取得了一定的進展,但是仍未分離和鑑定出參與植物細胞脫分化的特定基因。 本課題利用affymetrix晶片及生物信息學技術分析擬南芥細胞脫分化過程中差異表達基因,篩選出脫分化候選基因SMB(SOMBRERO)。 觀察分析擬南芥細胞脫分化過程中SMB基因表達量及smb-3突變體葉柄細胞微結構變化,發現SMB基因受激素誘導,smb-3突變體脫分化能力減弱;分析35S::SMB轉基因植株體葉柄外脫分化過程中葉柄細胞微結構的變化,SMB基因過表達,擬南芥細胞脫分化過程中愈傷組織形成增多,脫分化進程加快,認為SMB基因在擬南芥脫分化中發揮重要作用;進一步分析細胞脫分化過程中其同源基因BRN2表達量變化,結果顯示BRN2的表達受激素影響,但與SMB基因在擬南芥細胞脫分化中無明顯作用。 本實驗結果表明SMB促進擬南芥細胞脫分化過程,在擬南芥脫分化過程中發揮重要作用。