《SCIRR39影響少突膠質細胞分化及其生物學意義研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由趙沉浮擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SCIRR39影響少突膠質細胞分化及其生物學意義研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙沉浮
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
少突膠質細胞分化形成髓鞘是脊髓損傷修復過程中的重要事件。SCIRR39在損傷修復期脊髓白質少突膠質細胞中明顯上調。在NGF誘導的PC12細胞中,SCIRR39能夠通過下調RhoA活性,促進細胞分化。SCIRR39還能夠調節髓鞘相關抑制因子MAG、OMgp和NogoA的表達。在少突膠質細胞中，RhoA信號途徑和髓鞘相關抑制因子都是調節其分化和髓鞘形成的重要因素。本項目通過細胞增殖，細胞周期和形態學統計，明確SCIRR39對少突膠質細胞分化和髓鞘形成的影響，並通過分子生物學手段對RhoA信號途徑相關分子進行檢測，探明SCIRR39影響少突膠質細胞分化和髓鞘形成的分子機制，進而建立大鼠脊髓損傷模型，觀察SCIRR39在動物體內對脊髓損傷修復過程中髓鞘形成和髓鞘相關抑制因子表達的影響，闡明SCIRR39在脊髓損傷修復過程中的作用，為損傷脊髓的治療提供新的理論和靶點。
結題摘要
SCIRR39是我們實驗室在前期實驗中已證明的在原代培養的神經元損傷修復過程中顯著上調的一個基因，其功能尚不明確。利用實時定量PCR, Western blotting和免疫螢光方法, 發現SCIRR39可表達於正常的PC12細胞，並且在其分化過程中上調。細胞增殖和細胞周期結果顯示，SCIRR39能夠抑制細胞增殖並導致S期細胞比例下降。尤為重要的是，免疫螢光和RhoA pull-down分析顯示SCIRR39 能夠通過RhoA信號途徑影響NGF誘導的PC12細胞的神經突的延伸。此外， 在NGF誘導的PC12細胞中，SCIRR39表達的改變能夠調節Fyn（RhoA活性的調節因子）的表達和磷酸化水平，但不影響ROCK II蛋白的表達。最後，免疫螢光和RhoA pull-down分析顯示干涉敲低SCIRR39引起的明顯的神經突延伸抑制作用能夠被RhoA抑制劑C3-轉移酶所逆轉。我們的研究結果顯示SCIRR39能夠通過RhoA途徑促進NGF誘導的PC12細胞神經突的延伸。此研究結果提示SCIRR39可能通過改變分化進程參與了神經元損傷修復的過程。 實驗室前期研究結果顯示，SCIRR39在大鼠少突膠質細胞分化過程中明顯上調。然而，SCIRR39在中樞神經系統中的功能尚未明確。利用實時定量PCR和Western blotting方法, 發現SCIRR39在OPC和少突膠質細胞中均有表達。 此外，細胞增殖和細胞周期結果顯示，SCIRR39能夠抑制OPC的增殖，並導致S期細胞比例下降。RhoA是調節少突膠質細胞分化和髓鞘形成的一個重要信號分子。我們的實驗結果表明，SCIRR39能夠促進少突膠質細胞的分化和髓鞘形成。尤其重要的是，SCIRR39促進少突膠質細胞分化的功能需要 RhoA-ROCKs信號途徑的參與。此外，在少突膠質細胞中，SCIRR39表達的改變能夠調節Fyn的表達和磷酸化水平。最後，在體外實驗中，SCIRR39能夠促進髓鞘的形成。上述結果顯示，SCIRR39介導的RhoA活性降低能夠促進少突膠質細胞的分化和髓鞘形成。綜上所述，在體外實驗中，SCIRR39可能參與了少突膠質細胞分化和髓鞘形成過程。 我們還檢測了SCIRR39對髓鞘相關抑制因子(MAIFs)表達的影響。髓鞘相關抑制因子包括髓鞘相關糖蛋白(MAG), 少突膠質細胞髓鞘糖蛋白 (OMgp)和Nogo A。在少突
