《SCCA1高表達轉基因鼠皮膚屏障功能的分子機制研究》是依託北京大學，由姜薇擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SCCA1高表達轉基因鼠皮膚屏障功能的分子機制研究
- 項目負責人：姜薇
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
臨床中我們發現作為鱗癌標誌物的SCCA1在很多角化不全和炎症性皮膚病中表達增高，研究顯示SCCA1的高表達與皮膚屏障受損相關，但其作用機制尚不清楚。參與表皮終末分化階段的重要蛋白（FLG、IVL、TGM1、KLK5、KLK7）和表皮皮脂都在皮膚屏障功能中起重要作用。因此，我們提出假說：SCCA1高表達影響了皮脂合成和/或干擾了角質形成細胞的分化和脫落，從而引起皮膚屏障功能受損。為了驗證上述假說，我們製備SCCA1高表達轉基因鼠，並通過測定TEWL、定量電鏡觀察角化橋粒和板層體的數量、Nile紅染色觀察脂質數量，直接免疫螢光和QRT-PCR測定角質形成細胞分化和脫落相關基因及蛋白以及皮脂合成限速酶的表達情況。從而評價轉基因鼠是否存在屏障功能障礙，進而論證我們的假說。本研究結果從分子水平證實SCCA1可成為評價皮膚屏障功能受損程度和治療效果的一項重要指標，具有非常重要的臨床科學價值。
結題摘要
臨床中我們發現作為鱗狀細胞癌標誌物的SCCA1在很多角化不全和炎症性皮膚病（如銀屑病、特應性皮炎等）中表達增高，而這些疾病都存在不同程度皮膚屏障功能受損。國外有學者提出SCCA1的升高與皮膚屏障功能受損有關，但其作用機制尚不清楚。參與表皮終末分化階段的重要蛋白（FLG、IVL、TGM1、KLK5、KLK7）和表皮皮脂都在皮膚屏障功能中起重要作用。因此，我們提出假說：SCCA1高表達影響了皮脂合成和/或干擾了角質形成細胞的分化和脫落，從而引起皮膚屏障功能受損。為了驗證上述假說，我們將人SCCA1基因導入C57BL/6小鼠，然後比較轉基因鼠和正常鼠在組織病理、透射電鏡的情況，並取兩組小鼠的皮膚組織提取RNA進行QRT-PCR分析SCCA1、TGM1、Locrin、KLK5、KLK7基因的表達情況，由於二組小鼠的表達無差異，我們使用2,4-二硝基氟苯（DNFB）誘導轉基因鼠和正常鼠產生皮炎破壞其皮膚屏障，然後利用Western-blot技術比較未處理的兩組小鼠以及誘導皮炎的兩組小鼠SCCA1、TGM1、Locrin、KLK5、KLK7蛋白的表達情況，結果發現未處理的轉基因鼠的SCCA1並未呈現出高表達狀態（即基因表達並沒有出現預期的蛋白表達升高），未處理的轉基因鼠KLK-7的表達明顯少於正常鼠。而誘導皮炎後的轉基因鼠SCCA1、TGM1、KLK5的表達明顯高於誘導皮炎的正常鼠，間接論證了我們的假說。本研究結果從分子水平證實SCCA1可成為評價皮膚屏障功能受損程度和治療效果的一項重要指標，具有非常重要的臨床科學價值。
