《RhoA/ROCK對NMDA受體的調控作用及其在學習記憶中的意義》是依託上海交通大學，由李琴擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：RhoA/ROCK對NMDA受體的調控作用及其在學習記憶中的意義
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李琴
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
ROCK與NMDA受體的關係在前期實驗中已初步驗證，但RhoA/ROCK如何調節NMDA受體並參與學習記憶的機制尚不清楚。本項目擬套用水迷宮實驗觀察RhoA/ROCK對空間學習記憶能力的影響；在體內外記錄場電位檢測RhoA/ROCK對NMDA受體介導的突觸可塑性的影響及NR2B亞基在其中的作用；全細胞膜片鉗記錄RhoA/ROCK對NMDA電流的影響；套用免疫螢光、免疫共沉澱等分子生物學方法檢測ROCK和NMDA受體的定位、相互作用及對NR2B亞基磷酸化的調控作用。本研究旨在闡明RhoA/ROCK對學習記憶的影響及NMDA受體在其中的作用。在突觸可塑性中探索RhoA/ROCK對NMDA受體的調節作用，將對學習記憶的生理及病理生理機制進一步闡明，為腦退行性疾病防治尋找新的有效藥物提供更深入的理論依據。
結題摘要
採用AD模型和慢性缺血性痴呆模型，運用Morris 水迷宮行為學方法檢測大鼠空間學習記憶能力；採用大腦中動脈栓塞模型，通過神經缺失評分觀察缺血損傷程度。實驗發現長期給予Rho激酶抑制劑干預能夠顯著改善AD模型和缺血性痴呆所致的學習記憶障礙，縮短逃避潛伏期，增強空間辨別能力，這一學習記憶能力的改善可能與Rho激酶抑制劑顯著提高缺血皮層和海馬組織中NMDA受體亞基NR2A和NR2B的蛋白表達有關。Rho激酶抑制劑干預還能改善大腦中動脈缺血再灌注引起的神經損傷，降低神經缺失評分，但在此模型中未檢測到NMDA受體亞基NR2A和NR2B的蛋白有明顯變化。在這急性缺血損傷和缺血痴呆模型中，我們觀察到，凋亡家族成員Bcl-2和Bax均參與了損傷和修復過程。給予Rho激酶抑制劑干預後，均能上調兩種損傷模型中皮層組織中Bcl-2/Bax蛋白表達比率的下降，提示抑制Rho激酶對缺血損傷後皮層神經元凋亡有保護作用，可能與促進抗凋亡基因Bcl-2的表達，抑制促凋亡基因Bax的表達，從而抑制了細胞凋亡通路有關。另外實驗還觀察到Rho激酶抑制劑Y27632處理AD模型線蟲株系CL4176後加速了Aβ誘導的麻痹表型，在細胞實驗中觀察到抑制RhoA/Rho激酶通路能夠減輕Aβ誘導的PC12細胞凋亡，這一結果和前期實驗發現的抑制Rho激酶能夠改善學習記憶能力相一致。通過細胞外液加入Rho激酶抑制劑Y27632對NMDA電流無明顯的直接影響。表明抑制Rho激酶對NMDA受體功能無直接影響，其可能通過其他通路對NMDA受體產生影響或通過進入細胞內作用於NMDA受體胞內段而發揮作用，上述實驗結果均提示RhoA/Rho激酶通路可能是改善學習記憶功能的作用靶點之一。進一步的實驗還在研究過程中。
