《RNF180下調JAK/STAT-3信號通路活性抑制胃癌淋巴結轉移的機制研究》是依託天津醫科大學，由鄧靖宇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：RNF180下調JAK/STAT-3信號通路活性抑制胃癌淋巴結轉移的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄧靖宇
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
JAK/STAT-3通路激活對於細胞增殖和惡性轉化起到極為重要作用，並與惡性腫瘤侵襲及轉移密切相關。我們在前期研究發現胃癌細胞向淋巴結轉移受控於STAT-3的表達水平和磷酸化程度，並發現胃癌組織中RNF180基因啟動子DNA甲基化導致RNF180表達下調而促進胃癌的預後變差。RNF180含有RING結構域，屬泛素連線酶E3家族，提示RNF180可能通過泛素化降解Jak/STAT-3信號分子或Jak/STAT-3信號的上游活化因子而抑制STAT-3的表達及其下游調控因子的激活，最終抑制了胃癌細胞淋巴結轉移的發生。本項目將深入研究RNF180調控Jak/STAT-3信號的分子途徑，以及影響胃癌細胞淋巴管轉移的Jak/STAT-3信號下游效應分子，為控制胃癌轉移提供新的策略。
結題摘要
研究背景：環指蛋白180（Ring finger protein 180，RNF180）是E3泛素連線酶中重要的成員之一。作為抑癌基因，RNF180和胃癌患者的預後密切相關，並能抑制胃癌細胞的增殖、侵襲和遷移，以及抑制胃癌細胞發生淋巴結轉移。信號轉導與轉錄激活因子3（Signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）被認為是人類癌症中最為常見的致癌基因之一，在胃癌的進展中尤其是淋巴結轉移的發生中扮演著重要的角色。在這項研究中，我們試著探索RNF180是否通過調控JAK/STAT3信號通路而抑制了胃癌的進展，以及從分子機制上解釋FNF180和STAT3在胃癌中的相互關係及相互作用機理。研究方法：我們初步探索了RNF180和STAT3在胃癌細胞中表達水平、生物學功能、臨床適用性和可能涉及的分子機制。常用的細胞功能實驗，包括體內和體外實驗，均被採用來證實RNF180和STAT3潛在的相關性。轉錄組學和蛋白質組學實驗用於探索胃癌細胞中RNF180調控JAK/STAT3信號傳導途徑的潛在分子機制。結果和數據：胃癌組織晶片通過免疫組織化學染色發現RNF180在胃癌組織中的表達和STAT3呈顯著負相關，RNF180在胃癌組織中低表達。此外，對於胃癌細胞轉染RNF180過表達質粒後可明顯抑制STAT3磷酸化的發生，是抑制JAK/STAT3信號途徑激活後發揮生物學功能的重要因素。非標記蛋白質泛素化組學檢測發現相對於對照細胞（空載體質粒轉染）而言，轉染RNF180過表達質粒（RNF180-GFP質粒）的胃癌細胞中ras同源基因家族成員C（RhoC）的泛素化水平顯著增加。進一步研究，我們通過細胞內免疫共沉澱法、蛋白質穩定及降解實驗和泛素化免疫沉澱法證實RNF180能夠和RhoC在細胞內互作且能夠通過蛋白酶體途徑促進RhoC蛋白降解。隨後的小髮夾干擾RNA實驗分析發現胃癌細胞中STAT3磷酸化水平的降低是受RhoC調控的。科學意義：RNF180能夠通過蛋白酶體途徑降解胃癌細胞中的RhoC蛋白而減少STAT3蛋白磷酸化修飾，進而抑制了胃癌的進展。這一分子機制的發現，使得RNF180有望成為臨床上胃癌患者新的靶向治療目的基因。
