Prox1抑制IL-2表達的分子機制及在CD4+ T細胞活化中的作用

《Prox1抑制IL-2表達的分子機制及在CD4+ T細胞活化中的作用》是依託復旦大學，由謝幼華擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Prox1抑制IL-2表達的分子機制及在CD4+ T細胞活化中的作用
• 依託單位：復旦大學
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：謝幼華

項目摘要

Naive CD4+ T細胞受抗原呈遞細胞刺激後活化，進而增殖、分化為Th1和Th2等效應細胞，分別在細胞免疫和體液免疫反應中起關鍵作用。IL-2在CD4+ T細胞活化時表達上調近千倍，對CD4+ T細胞的活化、增殖、分化及效應功能至關重要。為維持免疫反應的平衡，IL-2的表達受到嚴格的調控。本課題組首先報導了Prox1在CD4+ T細胞中的表達，且其表達水平在CD4+ T細胞活化過程中隨IL-2等細胞因子表達的上升而下降。初步研究結果顯示，Prox1抑制IL-2啟動子的活性，提示Prox1可能是CD4+ T細胞活化的負調因子。本課題擬通過在培養細胞和轉基因小鼠中的研究，深入分析Prox1抑制IL-2表達的分子機制，探索Prox1在CD4+ T細胞活化過程中的生物學功能。

結題摘要

在本研究中，我們通過將表達Prox1的慢病毒載體（Lentivirus）轉導CD4+ Jurkat細胞、HEK293T細胞和HepG2細胞分別製備了Prox1穩定表達株，也製備了Prox1轉基因小鼠。通過蛋白質組結合質譜分析和基因表達分析發現了Prox1負調控IL-2、Cyp7A1等靶基因表達的一種機制：Prox1通過結合去甲基化酶LSD1招募NuRD複合物使靶基因啟動子區H3K4去甲基化從而抑制基因的表達。轉基因小鼠的CD4+ T細胞表型改變不很明顯，對轉基因小鼠更為全面的觀察和檢查正在進行中，上述機制的體內生物學功能還有待更深入的研究。 另一方面。我們在研究中發現Prox1極為顯著地正調控低氧應激因子（HIF-1α）的活性。HIF-1α在多種生理和病理過程中都起了重要的作用，特別在腫瘤的發展和轉移中被認為是一個關鍵因子。肝癌是我國最常見的癌症之一，肝癌的預後較差，肝癌細胞易侵襲和轉移是主要原因之一。肝癌侵襲和轉移的機制尚不清楚。課題組發現肝癌細胞中Prox1蛋白高表達與肝癌患者預後較差密切相關。發現Prox1促進肝癌細胞的侵襲和轉移，可能是通過上調低氧應激因子HIF-1a的表達以及通過提高HIF-1a蛋白的穩定性而實現的。肝癌細胞內HIF-1a蛋白水平的提高造成與上皮－間質轉化相關基因的表達，從而有利於肝癌細胞的侵襲和轉移。這一研究結果為干預肝癌的侵襲和轉移提供了新的靶點。同時拓展了對Prox1功能和作用機制的認識，為後續研究開拓了新的方向。