《Pax2表達上調在腎臟缺血再灌注中的保護作用研究》是依託上海交通大學，由汪鶯昱擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Pax2表達上調在腎臟缺血再灌注中的保護作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：汪鶯昱
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
急性腎損傷( acute kidney injury, AKI)是臨床上死亡率較高的常見重症疾病。研究發現，Pax2基因在AKI時的腎小管上皮細胞中可重新表達，另有細胞實驗證實激活血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）的2型受體（AT2R），而非1型受體（AT1R），可上調Pax2的表達，抑制細胞凋亡及促進增殖。然而在AKI體內實驗中尚未證實激活AT2R可上調Pax2的表達，促進受損小管上皮細胞的再生修復，而這有望成為AKI治療的新方法。因此，本項目將分別以腎臟缺血再灌注損傷大鼠模型和腎小管上皮細胞株為研究對象，通過拮抗AT1R和/或激動AT2R，觀察AT2R和Pax2的時空表達變化，以及細胞凋亡、去分化、增殖、轉化的再生修復進程；並通過構建Pax2反義質粒，抑制細胞Pax2表達，探討Pax2信號轉導途徑在損傷後修復過程中的作用。本研究將在AKI治療的新領域中進行初步探索。
結題摘要
急性腎損傷（AKI）病因廣泛，是住院患者的主要死亡原因之一。迄今尚無能有效防治AKI的藥物。腎急性缺血再灌注(I/R)是AKI的主要病因之一，對腎小管上皮細胞壞死後的再生與修復的研究已成為熱點之一。本研究通過建立SD大鼠雙腎缺血/再灌注腎損傷模型，嘗試通過血管緊張素II 2型受體（AT2R）激動劑治療由腎缺血再灌注導致的AKI。總之，本項目通過對AT2R激動劑在急性腎缺血再灌注損傷中的保護作用研究為探索新的治療措施開闢了新的領域。 結果：1.血BUN和SCr均在缺血再灌注後24小時達到高峰，至120小時已恢復正常。PAS評分顯示腎小管損傷在24小時最嚴重，且在120小時仍顯著高於對照組。TUNNEL實驗發現腎小管上皮的凋亡在再灌注後開始升高，24小時後達峰值，隨後只有緩慢下降，120小時仍顯著高於對照組。 2. AT2R和PAX2在腎小管上皮細胞中都出現了再表達。Real-time PCR，Western-blot以及免疫組化結果顯示AT2R在24小時達到高峰，隨後回落，但在120小時仍高於對照組。而PAX2則在72小時達高峰，至120小時也仍高於對照組。 3. CGP42112A的使用未影響動物的血壓及心率。在24小時和72小時用藥組的血BUN和SCr均明顯下降，這一作用可被AT2R拮抗劑PD123319阻斷。PAS評分的結果也顯示，單用CGP42112A組評分顯著低於模型組及CGP42112A加PD123319組，並且在120小時的評分已接近對照組。同時，通過對凋亡蛋白PARP、去分化標誌物Vimentin和增殖蛋白Ki67的Western-blot檢測，發現在24、72以及120小時這3個標記蛋白分別明顯上調了表達，且與模型組趨勢一致，即PARP的高峰表達在24小時，而Vimentin和Ki67則在72小時達到最高峰。PD123319可相應得阻斷這些效應。另外，模型中腎靜脈血管緊張素II的濃度在24小時最高，而CGP42112A對此無影響。尿KIM-1濃度在24、72和120小時均明顯降低，提示上皮細胞的損傷得到了改善。 4. 套用CGP42112A後，AT2R的表達明顯上調，表達高峰移至72小時，而PAX2在72小時的峰值明顯下降。推測PAX2可能是通過被AT2R反向調節而參與了急性腎缺血再灌注損傷過程。
