《PP2A介導的組蛋白去磷酸化對DNA損傷修復的調控》是依託中山大學，由張波擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：PP2A介導的組蛋白去磷酸化對DNA損傷修復的調控
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張波
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
環境因素誘導的遺傳損傷與腫瘤發生密切相關，DNA損傷修復受組蛋白修飾的調控。課題組前期研究發現蛋白磷酸酶2A（PP2A）與組蛋白γH2AX和p-H3（Ser10）特異結合，PP2A酶活性改變影響組蛋白去磷酸化過程。為了闡明PP2A介導的組蛋白去磷酸化在細胞DNA損傷修復中的作用，本課題首先觀察化學、輻射誘導DNA損傷時PP2A對γH2AX和p-H3（Ser10）去磷酸化的調控作用，闡明二者的時相變化規律及與DNA損傷修復的關係；構建B亞基缺陷細胞株明確各B亞基的功能，用免疫共沉澱方法篩選和驗證與組蛋白的特異結合；通過調控PP2A功能，研究組蛋白去磷酸化對細胞周期的調控以及對DNA損傷修復和細胞轉歸的影響；探索γH2AX和p-H3（Ser10）作為DNA損傷修復生物標誌物套用於職業暴露人群監測的可行性。本研究把遺傳損傷與表觀遺傳調控有機整合，對闡明DNA損傷修復的表觀遺傳機制具有重要意義。
結題摘要
本項目通過細胞體外惡性轉化模型的分子機制探討、腫瘤標本與正常組織的對比分析以及職業流行病學調查，闡述了表觀遺傳調控在DNA損傷修復中的作用。研究發現，單個DNA損傷修復基因（ERCC1、ERCC2、ATM、MSH2）缺陷細胞株雖然對B(a)P誘導DNA損傷比較敏感，但並不能縮短B(a)P等致癌物誘導的細胞轉化周期，而癌基因高表達細胞株對B(a)P誘導的細胞轉化更加敏感；以調控組蛋白去磷酸化的蛋白磷酸酶2A（PP2A）為切入點，發現在B(a)P誘導細胞體外惡性轉化過程中，miR34b-α4-PP2A通路發揮了重要通路，進而在PP2A的下游，發現PP2A-miR27a-Fbxw7通路在SV40 ST抗原誘導的細胞體外惡性轉化中發揮作用；此外，miR638是B(a)P誘導細胞轉化的另一個重要靶點。鑒於組蛋白修飾、miRNA和DNA甲基化之間的相互調控作用，我們用甲基化晶片篩選並鑑定了B(a)P誘導細胞轉化過程中差異甲基化的6個基因，為後續研究提供了線索；已知p16基因在多種腫瘤組織中呈現高甲基化，我們分析了p16基因甲基化與環境化學物暴露的關係，發現PAHs暴露引起p16基因啟動子區特異位點的高甲基化，並且甲基化程度與內暴露水平和外周血DNA損傷水平正相關；此外meta分析顯示吸菸也與p16基因高甲基化相關（OR=2.25, 95%CI=1.81-2.80），提示p16基因高甲基化可能是化學致癌早期的生物標誌物。
