PDA培養基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)

PDA培養基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基的簡稱，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次對應馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。

基本介紹

• 中文名：PDA培養基
• 外文名：Potato Dextrose Agar （Medium）
• 全稱：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基
• 性質：固體培養基，半合成培養基
• 配方：馬鈴薯，葡萄糖，瓊脂，自來水
• 優點：宜於微生物生長發育、節省原料等

特點及用途

一種常用的培養基，宜培養酵母菌、黴菌、蘑菇等真菌。

分裝於試管

按物理性狀劃分：固體培養基

按培養基成分劃分：半合成培養基

配製方法

配方

馬鈴薯 200克 葡萄糖 20克

瓊脂 15~20克 蒸餾水1000毫升

自然PH

配製步驟

其做法是先洗淨去皮,再稱取200g馬鈴薯切成小塊，加水煮爛（煮沸20~30分鐘，能被玻璃棒戳破即可），用八層紗布過濾，加熱，再據實際實驗需要加15-20g瓊脂，繼續加熱攪拌混勻，待瓊脂溶解完後，加入葡萄糖，攪拌均勻，稍冷卻後再補足水分至1000毫升，分裝試管或者錐形瓶，加塞、包紮，（115℃）滅菌20分鐘左右後取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻後貯存備用。

煮馬鈴薯塊

其他事項

1.培養基經滅菌後，必須放在37C溫箱培養24h，無菌生長者方可使用。

2.PDA培養基一般不需要調pH。對於要調節pH的培養基，一般用pH試紙測定其pH。如果培養基偏酸或偏鹼時，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調節。調節時應逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過酸或過鹼破壞培養基成分。

3.培養基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養基，用於菌類的震盪培養。

4.培養基也可以加入氯黴素或土黴素，加入量為0.2g/L培養基，主要是為了抑制細菌的生長，減少干擾性

PDA培養基的配製

(1)稱量和熬煮

按培養基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾，濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。

(2)加熱溶解

把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂15～20g(提前搞碎)，然後放在石棉網上，小火加熱，並用玻棒不斷攪拌，以防瓊脂糊底或溢出，待瓊脂完全溶解後，再補充水分至所需量。

(3)分裝

按實訓要求，將配製的培養基分裝入試管或500ml三角瓶內。分裝時可用三角漏斗以免使培養基沾在管口或瓶口上造成污染。

分裝量：固體培養基約為試管高度的1/5，滅菌後製成斜面，分裝入三角瓶內以不超過其容積的一半為宜;半固體培養基以試管高度的1/3為宜，滅菌後垂直待凝。

(4)加棉塞

培養基分裝完畢後，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑膠塞或試管帽等)，以阻止外界微生物進入培養基內造成污染，並保證有良好的通氣性能。

(5)包紮

加塞後，將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩或橡皮筋紮好，用記號筆註明培養基名稱、組別、配製日期。

棉塞製作

棉塞的作用：一是防止雜菌污染;二是可過濾空氣，保證通氣良好，並可減緩培養基水分的蒸發，所以正確地製備棉塞是培養基製備中重要的一環。

正確的棉塞是形狀、大小，鬆緊應與試管口(或三角燒瓶)完全適合。過緊則妨礙空氣流通，操作不便;過松時，空氣會毫無障礙地進入試管(或三角燒瓶)中，達不到滅菌的目的。棉塞過小往往易掉進試管內，因此棉塞質量的優劣對實訓的結果有很大的影響。正確的棉塞頭較大，加塞時，應使棉塞長度的1/3留在試管口外，2/3在試管口內。目前，有條件的實訓室已使用堅固的塑膠試管帽、金屬試管帽、矽膠泡沫塞替代棉塞，製作棉塞要選纖維較長的棉花，一般不選用脫脂棉。因為它容易吸水變濕，造成污染，而且價格也貴